中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
缩略语 | 第10-12页 |
前言 | 第12-28页 |
1 植物病原细菌hrp基因簇 | 第12-15页 |
1.1 hrp基因概述 | 第12-13页 |
1.2 hrp基因簇及其结构和功能 | 第13-15页 |
2 植物病原细菌harpin蛋白 | 第15-19页 |
2.1 Harpin蛋白概述 | 第15-17页 |
2.2 水稻白叶枯病菌Hpa1_(Xoo)蛋白 | 第17-18页 |
2.3 Hpa1_(Xoo)截短片段(多肽)研究进展 | 第18-19页 |
3 水杨酸、茉莉酸和乙烯介导的抗病防卫信号通路 | 第19-25页 |
3.1 三种抗病信号通路概述 | 第19-20页 |
3.2 三种抗病信号通路及相关调控基因研究进展 | 第20-22页 |
3.3 三种抗病信号通路的交叉互作 | 第22-25页 |
4 Harpin蛋白诱导的植物3种抗病防卫信号通路相关基因表达 | 第25-27页 |
4.1 外源应用harpin蛋白诱导的抗病基因表达 | 第25-26页 |
4.2 内源表达harpin蛋白诱导的抗病基因表达 | 第26-27页 |
5 本研究的目和意义 | 第27-28页 |
材料与方法 | 第28-41页 |
1 植物材料 | 第28页 |
2 主要试剂和仪器 | 第28-29页 |
2.1 主要试剂 | 第28-29页 |
2.2 主要仪器 | 第29页 |
3 培养基的配制 | 第29-30页 |
4 常用溶液 | 第30页 |
5 转基因烟草植株的验证 | 第30-36页 |
5.1 转基因烟草植株的获得 | 第30-31页 |
5.2 转基因烟草gDNA的提取及PCR检测 | 第31-33页 |
5.3 转基因烟草总RNA的提取、纯化及检测 | 第33-35页 |
5.3.1 总RNA的提取及纯化 | 第33-34页 |
5.3.2 总RNA的质量检测 | 第34-35页 |
5.4 转基因烟草目的基因RT-PCR分析 | 第35-36页 |
5.4.1 反转录合成cDNA | 第35页 |
5.4.2 PCR检测目的基因N21 | 第35-36页 |
6 转基因烟草基因芯片分析 | 第36-37页 |
6.1 烟草植株准备 | 第36页 |
6.2 不同转基因烟草叶片RNA提取及质量检测 | 第36页 |
6.3 芯片杂交分析 | 第36-37页 |
7 转基因烟草和出发亲本烟草差异表达基因分析 | 第37页 |
7.1 转hpa1_(Xoo)基因烟草和出发亲本烟草 | 第37页 |
7.2 转AB基因烟草和出发亲本烟草 | 第37页 |
7.3 转N21基因烟草和出发亲本烟草 | 第37页 |
8 转基因烟草间差异表达基因分析 | 第37-38页 |
8.1 转hpa1_(Xoo)基因烟草和转AB基因烟草 | 第37页 |
8.2 转hpa1_(Xoo)基因烟草和转N21基因烟草 | 第37页 |
8.3 转AB基因烟草和转N21基因烟草 | 第37-38页 |
9 转N21基因烟草3种抗病信号通路和防卫反应差异表达基因分析 | 第38页 |
10 转N21基因烟草3种抗病信号通路和防卫反应差异表达基因验证 | 第38-41页 |
10.1 RNA提取、纯化及质量检测 | 第38页 |
10.2 荧光定量PCR检测 | 第38页 |
10.3 荧光定量PCR检测 | 第38-41页 |
结果与分析 | 第41-65页 |
1 转基因烟草植株的验证 | 第41-43页 |
1.1 转基因烟草gDNA的PCR检测 | 第41-42页 |
1.1.1 T2代转基因烟草gDNA的PCR检测 | 第41页 |
1.1.2 T3代转基因烟草gDNA的PCR检测 | 第41-42页 |
1.2 转基因烟草N21转录表达验证 | 第42-43页 |
2 转N21基因烟草基因芯片分析 | 第43-57页 |
2.1 转基因烟草芯片杂交分析 | 第43-46页 |
2.2 转基因烟草差异表达基因分析 | 第46-57页 |
2.2.1 转hpa1_(Xoo)基因烟草和出发亲本烟草 | 第47-48页 |
2.2.2 转AB基因烟草和出发亲本烟草 | 第48-50页 |
2.2.3 转N21基因烟草和出发亲本烟草 | 第50-52页 |
2.2.4 转hpa1_(Xoo)基因烟草和转AB基因烟草 | 第52-53页 |
2.2.5 转hpa1_(Xoo)基因烟草和转N21基因烟草 | 第53-55页 |
2.2.6 转AB基因烟草和转N21基因烟草 | 第55-57页 |
2.2.7 转基因烟草间共同差异表达基因和单独差异表达基因分析 | 第57页 |
3 转N21基因烟草3种抗病信号通路和防卫反应相关差异表达基因分析 | 第57-62页 |
3.1 转N21基因烟草3种抗病信号通路差异表达基因 | 第57-59页 |
3.2 转N21基因烟草防卫反应相关差异表达基因分析 | 第59-62页 |
3.2.1 差异表达基因类别 | 第59-61页 |
3.2.2 极显著差异表达基因 | 第61-62页 |
4 转N21基因烟草3种抗病信号通路和防卫反应相关差异表达基因验证 | 第62-65页 |
4.1 转N21基因烟草3种抗病信号通路差异表达基因荧光定量PCR | 第62-64页 |
4.1.1 3种抗病信号通路分子标志基因荧光定量PCR分析 | 第62-63页 |
4.1.2 3种抗病信号通路相关基因荧光定量PCR分析 | 第63-64页 |
4.2 转N21基因烟草防卫反应相关基因荧光定量PCR分析 | 第64-65页 |
讨论 | 第65-68页 |
1 转hpa1_(Xoo)、AB和N21基因烟草防卫基因表达的差异 | 第65页 |
2 转N21基因烟草的抗病机制 | 第65-66页 |
3 3种抗病防卫信号通路及其交互作用 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-84页 |
附录一 | 第84-85页 |
附录二 | 第85-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
本论文受助资金项目 | 第103-104页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第104-105页 |