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辣椒CabZIP1转录因子的功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-18页
   ·植物防御反应第10页
   ·转录因子的概念及功能研究第10-11页
   ·bZIP 转录因子家族的研究进展第11-14页
     ·植物bZIP 类转录因子的结构特点第12页
     ·植物bZIP 蛋白的分类和分布第12-13页
     ·植物bZIP 类转录因子的调控机制第13-14页
   ·植物基因功能研究策略—超表达和VIGS第14-15页
   ·转基因烟草研究现状第15-17页
   ·研究目的意义第17-18页
2 材料与方法第18-26页
   ·试验材料第18页
     ·供试植物材料第18页
     ·供试菌株和质粒第18页
     ·主要仪器与试剂(见附录2、3)第18页
   ·实验方法、步骤第18-26页
     ·荧光定量PCR 分析基因的表达模式第18-22页
       ·序列分析第18-19页
       ·内参基因与候选基因的引物设计第19页
       ·辣椒苗处理第19-20页
       ·辣椒总RNA 提取第20页
       ·反转录反应第20-21页
       ·实时荧光定量PCR第21页
       ·荧光定量PCR 数据分析第21-22页
     ·烟草无菌苗的准备第22页
     ·烟草和农杆菌预培养第22页
     ·农杆菌侵染法烟草转基因第22页
     ·抗性植株的PCR 鉴定(见附录10)第22-23页
     ·bZIP 基因的超表达功能研究第23-24页
       ·T1 代烟草植株无菌苗的准备第23页
       ·盐处理,观察其表形和测定生理指标第23页
       ·热处理,观察其表形和测定生理指标第23页
       ·ABA 处理,观察其表形和测定生理指标第23页
       ·低温处理第23页
       ·转基因烟草的抗病性检测第23-24页
     ·VIGS 诱导基因沉默的功能研究第24-25页
       ·辣椒苗培养第24页
       ·辣椒苗VIGS 处理第24页
       ·辣椒苗VIGS 处理后的盐处理第24-25页
       ·辣椒苗VIGS 处理后的青枯病原菌处理第25页
     ·烟草中CabZIP1 基因的超表达对病程相关性基因表达第25-26页
       ·内参基因与候选基因的引物设计第25-26页
       ·实时荧光定量PCR(方法同1.2.1.6)第26页
3 结果分析第26-45页
   ·CabZIP1 基因荧光定量PCR 分析第26-30页
     ·CabZIP1 生物信息学分析第26-27页
     ·actin 基因与目的基因荧光定量PCR 条件优化第27页
     ·荧光定量PCR 引物扩增效率的确定第27页
     ·Actin 与CabZIP1 引物的溶解曲线分析第27-28页
     ·CabZIP1 基因表达情况分析第28-30页
       ·在外源激素处理下CabZIP1 基因表达情况第28-29页
       ·各种逆境下CabZIP1 基因的表达情况第29-30页
   ·转CabZIP1 基因烟草T1 代种子的获取第30-34页
     ·无菌苗的获得第30页
     ·外植体的处理第30-31页
     ·烟草遗传转化及抗性植株筛选第31页
     ·转CabZIP1 基因烟草T1 代种子的卡那抗性筛选第31-32页
     ·抗性植株的PCR 检测第32-33页
     ·RNA 提取和RT-PCR 检测第33-34页
   ·CabZIP1 基因在烟草中超表达对防御反应的效应分析第34-41页
     ·转基因烟草在盐胁迫下的生长实验第34-36页
     ·转基因烟草高温处理第36-37页
     ·转基因烟草外源激素处理第37-40页
     ·转基因烟草低温处理第40页
     ·青枯病原菌侵染实验第40-41页
   ·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默对防御反应的效应分析第41-44页
     ·辣椒苗培养第41页
     ·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默第41-42页
     ·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默后盐处理实验第42-43页
     ·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默后青枯病原菌实验第43-44页
   ·烟草中CabZIP1 基因的超表达对病程相关性基因表达影响第44-45页
4 讨论第45-49页
   ·CabZIP1 基因的结构功能第45页
   ·CabZIP1 基因对外源激素的应答情况第45-47页
   ·几种逆境处理下CabZIP1 基因的表达第47页
   ·CabZIP1 基因对青枯病菌侵染的应答第47-48页
   ·CabZIP1 基因对非生物胁迫高盐的应答第48页
   ·CabZIP1 基因超表达植株对病程相关性基因表达影响第48-49页
5 小结第49-50页
参考文献第50-54页
致谢第54-56页
附录第56-66页

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