摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-18页 |
·植物防御反应 | 第10页 |
·转录因子的概念及功能研究 | 第10-11页 |
·bZIP 转录因子家族的研究进展 | 第11-14页 |
·植物bZIP 类转录因子的结构特点 | 第12页 |
·植物bZIP 蛋白的分类和分布 | 第12-13页 |
·植物bZIP 类转录因子的调控机制 | 第13-14页 |
·植物基因功能研究策略—超表达和VIGS | 第14-15页 |
·转基因烟草研究现状 | 第15-17页 |
·研究目的意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-26页 |
·试验材料 | 第18页 |
·供试植物材料 | 第18页 |
·供试菌株和质粒 | 第18页 |
·主要仪器与试剂(见附录2、3) | 第18页 |
·实验方法、步骤 | 第18-26页 |
·荧光定量PCR 分析基因的表达模式 | 第18-22页 |
·序列分析 | 第18-19页 |
·内参基因与候选基因的引物设计 | 第19页 |
·辣椒苗处理 | 第19-20页 |
·辣椒总RNA 提取 | 第20页 |
·反转录反应 | 第20-21页 |
·实时荧光定量PCR | 第21页 |
·荧光定量PCR 数据分析 | 第21-22页 |
·烟草无菌苗的准备 | 第22页 |
·烟草和农杆菌预培养 | 第22页 |
·农杆菌侵染法烟草转基因 | 第22页 |
·抗性植株的PCR 鉴定(见附录10) | 第22-23页 |
·bZIP 基因的超表达功能研究 | 第23-24页 |
·T1 代烟草植株无菌苗的准备 | 第23页 |
·盐处理,观察其表形和测定生理指标 | 第23页 |
·热处理,观察其表形和测定生理指标 | 第23页 |
·ABA 处理,观察其表形和测定生理指标 | 第23页 |
·低温处理 | 第23页 |
·转基因烟草的抗病性检测 | 第23-24页 |
·VIGS 诱导基因沉默的功能研究 | 第24-25页 |
·辣椒苗培养 | 第24页 |
·辣椒苗VIGS 处理 | 第24页 |
·辣椒苗VIGS 处理后的盐处理 | 第24-25页 |
·辣椒苗VIGS 处理后的青枯病原菌处理 | 第25页 |
·烟草中CabZIP1 基因的超表达对病程相关性基因表达 | 第25-26页 |
·内参基因与候选基因的引物设计 | 第25-26页 |
·实时荧光定量PCR(方法同1.2.1.6) | 第26页 |
3 结果分析 | 第26-45页 |
·CabZIP1 基因荧光定量PCR 分析 | 第26-30页 |
·CabZIP1 生物信息学分析 | 第26-27页 |
·actin 基因与目的基因荧光定量PCR 条件优化 | 第27页 |
·荧光定量PCR 引物扩增效率的确定 | 第27页 |
·Actin 与CabZIP1 引物的溶解曲线分析 | 第27-28页 |
·CabZIP1 基因表达情况分析 | 第28-30页 |
·在外源激素处理下CabZIP1 基因表达情况 | 第28-29页 |
·各种逆境下CabZIP1 基因的表达情况 | 第29-30页 |
·转CabZIP1 基因烟草T1 代种子的获取 | 第30-34页 |
·无菌苗的获得 | 第30页 |
·外植体的处理 | 第30-31页 |
·烟草遗传转化及抗性植株筛选 | 第31页 |
·转CabZIP1 基因烟草T1 代种子的卡那抗性筛选 | 第31-32页 |
·抗性植株的PCR 检测 | 第32-33页 |
·RNA 提取和RT-PCR 检测 | 第33-34页 |
·CabZIP1 基因在烟草中超表达对防御反应的效应分析 | 第34-41页 |
·转基因烟草在盐胁迫下的生长实验 | 第34-36页 |
·转基因烟草高温处理 | 第36-37页 |
·转基因烟草外源激素处理 | 第37-40页 |
·转基因烟草低温处理 | 第40页 |
·青枯病原菌侵染实验 | 第40-41页 |
·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默对防御反应的效应分析 | 第41-44页 |
·辣椒苗培养 | 第41页 |
·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默 | 第41-42页 |
·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默后盐处理实验 | 第42-43页 |
·VIGS 诱导辣椒CabZIP1 基因沉默后青枯病原菌实验 | 第43-44页 |
·烟草中CabZIP1 基因的超表达对病程相关性基因表达影响 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-49页 |
·CabZIP1 基因的结构功能 | 第45页 |
·CabZIP1 基因对外源激素的应答情况 | 第45-47页 |
·几种逆境处理下CabZIP1 基因的表达 | 第47页 |
·CabZIP1 基因对青枯病菌侵染的应答 | 第47-48页 |
·CabZIP1 基因对非生物胁迫高盐的应答 | 第48页 |
·CabZIP1 基因超表达植株对病程相关性基因表达影响 | 第48-49页 |
5 小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
附录 | 第56-66页 |