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C型清道夫受体在日本囊对虾先天免疫中的功能研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
符号说明第11-13页
第一章 综述无脊椎动物的先天免疫与清道夫受体第13-24页
    一、无脊椎动物先天免疫概述第13-16页
        1. 物理防御第13页
        2. 细胞免疫第13-14页
        3. 体液免疫第14-16页
    二、模式识别受体在先天免疫中的功能第16-18页
        1. Toll样受体第16页
        2. 半乳糖苷结合凝集素第16-17页
        3. 含硫酯蛋白第17页
        4. 丝氨酸蛋白酶同系物第17-18页
        5. 清道夫受体第18页
    三、清道夫受体的结构与功能第18-22页
        1. 清道夫受体的结构第18-20页
        2. 清道夫受体在先天免疫中的作用第20-22页
    四、本研究的科学问题与意义第22-24页
第二章 C型清道夫受体促进血细胞对WSSV的吞噬作用第24-69页
    一、前言第24-25页
    二、材料与方法第25-34页
        1. 试剂,仪器,菌株和载体第25-26页
        2. 实验动物第26页
        3. WSSV接种液的制备和对虾的免疫刺激第26页
        4. 完整WSSV的制备第26-27页
        5. WSSV绝对拷贝数的测定第27-28页
        6. MjSRC的cDNA克隆和序列分析第28-29页
        7. MjSRC的体外重组表达、纯化和抗血清的制备第29页
        8. MjSRC的组织分布和表达模式第29-30页
        9. RNA干扰和过表达实验第30-31页
        10. WSSV的荧光标记以及吞噬率和吞噬指数的检测第31页
        11. 免疫细胞化学实验第31-32页
        12. Pull-down实验和co-IP实验第32页
        13. rMjSRC-EX的胶体金标记和免疫电镜实验第32-33页
        14. 交联实验第33页
        15. 网格蛋白抑制剂实验第33-34页
        16. 溶酶体染色和溶酶体抑制剂第34页
        17. 对虾存活率的统计第34页
    三、结果第34-64页
        1. MjSRC全长cDNA的克隆、序列比对和进化树的构建第34-39页
        2. 对虾体内的MjSRC在受到WSSV刺激后呈上调表达第39-42页
        3. MjSRC限制对虾体内WSSV的复制第42-45页
        4. MjSRC促进日本囊对虾对WSSV的吞噬作用第45-48页
        5. MjSRC可以识别WSSV的囊膜蛋白第48-51页
        6. 在受到WSSV刺激后,MjSRC发生三聚化并从细胞膜内化到细胞质第51-54页
        7. Mjβ-arrestin2与MjSRC相互作用并介导MjSRC的内化第54-57页
        8. MjSRC-arrestin2介导的血细胞对WSSV的吞噬是网格蛋白依赖的第57-62页
        9. 血细胞中的溶酶体参与WSSV的清除第62-64页
    四、讨论第64-69页
第三章 MjSRC加强血细胞的对细菌的吞噬作用和调控抗菌肽的表达第69-84页
    一、前言第69-70页
    二、材料与方法第70-74页
        1. 实验动物准备和RNA提取第70-71页
        2. 蛋白的重组表达和纯化第71-72页
        3. 荧光定量PCR第72页
        4. 蛋白免疫印迹技术第72页
        5. RNA干扰和过表达技术第72页
        6. 荧光标记细菌和血细胞吞噬率的计算第72-73页
        7. 细菌结合实验第73页
        8. 多糖结合实验第73-74页
        9. 细菌清除实验第74页
        10. 液体抑菌实验第74页
    三、结果第74-81页
        1. 对虾血细胞中的MjSRC在受到细菌刺激后上调表达第74-75页
        2. MjSRC结合不同的细菌和多糖第75-77页
        3. MjSRC在对虾体内具有清除细菌的功能第77-78页
        4. MjSRC促进血细胞对细菌的吞噬功能第78-79页
        5. MjSRC调控抗菌肽的表达但不调控吞噬相关基因的表达第79-80页
        6. MjSRC的体外抑菌活性第80-81页
    四、讨论第81-84页
创新点总结第84-85页
    1. MjSRC具有促进血细胞吞噬WSSV的功能第84页
    2. MjSRC可以加强血细胞对细菌的吞噬能力以及调节抗菌肽基因的表达第84-85页
参考文献第85-95页
致谢第95-97页
在读期间发表的论文第97-99页
学位论文评阅及答辩情况表第99页

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