| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 符号及缩略语 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-45页 |
| 第一章 Rab蛋白与细胞分裂 | 第19-34页 |
| 1 细胞分裂染色体排列与分离的调控 | 第19-21页 |
| ·动粒的主要结构与功能 | 第19页 |
| ·动粒-微管作用 | 第19-20页 |
| ·动粒及动粒相关蛋白 | 第20-21页 |
| 2 Rab蛋白及其功能作用 | 第21-30页 |
| ·Rab蛋白的结构与分布 | 第22-23页 |
| ·Rab蛋白的循环与调节 | 第23-27页 |
| ·Rab的功能 | 第27-30页 |
| 3 Rab与细胞分裂 | 第30-34页 |
| ·Rab与胞质分裂 | 第30-32页 |
| ·Rab与染色体分离和中板排列 | 第32-34页 |
| 第二章 卵母细胞老化与Sirt1 | 第34-45页 |
| 1 卵母细胞老化 | 第34-40页 |
| ·卵母细胞老化的特征及其对发育的影响 | 第34-35页 |
| ·卵母细胞老化的机理 | 第35-36页 |
| ·影响卵母细胞老化的因素 | 第36-38页 |
| ·卵母细胞老化控制机理及应用 | 第38-40页 |
| 2 Sirt1的结构与功能 | 第40-45页 |
| ·Sirt1的结构、表达与定位 | 第40-41页 |
| ·Sirt1的功能与细胞寿命 | 第41-42页 |
| ·Sirt1的抑制剂和激活剂 | 第42-45页 |
| 第二部分 试验研究 | 第45-121页 |
| 第三章 Rab5a在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用 | 第45-67页 |
| 1 材料 | 第45-50页 |
| ·主要仪器 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46-48页 |
| ·试剂配制 | 第48-50页 |
| 2 方法 | 第50-55页 |
| ·小鼠卵母细胞的采集及培养 | 第50页 |
| ·显微注射 | 第50页 |
| ·小鼠卵母细胞RNA的提取及逆转录 | 第50-52页 |
| ·PCR | 第52页 |
| ·蛋白免疫印迹(western blot) | 第52-53页 |
| ·免疫荧光染色 | 第53-54页 |
| ·核型分析 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-65页 |
| ·Rab5a在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的分布变化 | 第55-57页 |
| ·Rab5a敲低效率检测及其对卵母细胞体外成熟的影响 | 第57-59页 |
| ·Rab5a对纺锤体和染色体的影响 | 第59-63页 |
| ·Rab5a对动粒-微管作用的影响 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 5 小结 | 第66-67页 |
| 第四章 Rab5a影响减数分裂的信号通路探讨 | 第67-77页 |
| 1 材料 | 第68-69页 |
| ·仪器 | 第68页 |
| ·主要试剂 | 第68页 |
| ·试剂配方 | 第68-69页 |
| 2 方法 | 第69-70页 |
| ·免疫荧光染色方法三 | 第69页 |
| ·Westen blot | 第69-70页 |
| 3 结果 | 第70-75页 |
| ·Rab5a对Lamin的影响 | 第70-71页 |
| ·Rab5a对NuMA的影响 | 第71-73页 |
| ·Rab5a对CENPF的影响 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 5 小结 | 第76-77页 |
| 第五章 CENPF介导了Rab5a在减数分裂中的作用 | 第77-86页 |
| 1 材料 | 第77页 |
| ·仪器 | 第77页 |
| ·主要试剂 | 第77页 |
| 2 方法 | 第77页 |
| 3 结果 | 第77-85页 |
| ·CENPF敲低效果检测 | 第77-78页 |
| ·CENPF对纺锤体和染色体的影响 | 第78-81页 |
| ·CENPF对动粒的影响 | 第81-82页 |
| ·CENPF和Rab5a共敲低效果检测 | 第82-85页 |
| 4 讨论 | 第85页 |
| 5 小结 | 第85-86页 |
| 第六章 Rab6a在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用 | 第86-96页 |
| 1 材料 | 第86-87页 |
| ·主要仪器 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86-87页 |
| 2 方法 | 第87-88页 |
| ·去透明带 | 第87页 |
| ·荧光定量PCR | 第87-88页 |
| 3 结果 | 第88-95页 |
| ·Rab6a在减数分裂过程中的定位 | 第88-89页 |
| ·Rab6a RNAi序列选择及敲低效果检测 | 第89-91页 |
| ·Rab6a对减数分裂进程的影响 | 第91-92页 |
| ·Rab6a对纺锤体和染色体的影响 | 第92-95页 |
| 4 讨论 | 第95页 |
| 5 小结 | 第95-96页 |
| 第七章 Rab6a对卵母细胞成熟过程中细胞器的影响 | 第96-105页 |
| 1 材料 | 第96-97页 |
| ·主要仪器 | 第96页 |
| ·主要试剂 | 第96-97页 |
| ·试剂配制 | 第97页 |
| 2 方法 | 第97页 |
| ·活细胞染色法 | 第97页 |
| 3 结果 | 第97-102页 |
| ·Rab6a对CG的影响 | 第97-99页 |
| ·Rab6a对Golgi的影响 | 第99-100页 |
| ·Rab6a对ER的影响 | 第100-102页 |
| 4 讨论 | 第102-103页 |
| 5 小结 | 第103-105页 |
| 第八章 猪卵母细胞老化的分子调控初探 | 第105-121页 |
| 1 材料 | 第106-107页 |
| ·仪器 | 第106页 |
| ·试剂 | 第106页 |
| ·试剂配制 | 第106-107页 |
| 2 方法 | 第107-109页 |
| ·猪卵母的采集和培养 | 第107-108页 |
| ·体外老化和白藜芦醇处理 | 第108页 |
| ·卵母细胞收集 | 第108页 |
| ·猪卵免疫荧光染色 | 第108-109页 |
| ·Mito Tracker免疫荧光染色 | 第109页 |
| ·Western blot | 第109页 |
| 3 结果 | 第109-118页 |
| ·Sirtl在卵母细胞老化过程中的表达变化 | 第109-110页 |
| ·白藜芦醇对卵母细胞老化过程中形态学变化的影响 | 第110-112页 |
| ·白藜芦醇处理对体外老化的猪卵母细胞染色体和纺锤体的影响 | 第112-113页 |
| ·白藜芦醇对体外老化的猪卵母细胞皮质颗粒分布的影响 | 第113-115页 |
| ·白藜芦醇对猪老化卵母细胞线粒体变化的影响 | 第115-118页 |
| 4 讨论 | 第118-119页 |
| 5 小结 | 第119-121页 |
| 全文结论 | 第121-123页 |
| 创新点 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-139页 |
| 附录：攻读博士期间论文发表情况 | 第139-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
