| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-16页 |
| ·课题研究背景 | 第9页 |
| ·植物的氮代谢 | 第9-10页 |
| ·植物体内铵的转运 | 第9页 |
| ·植物体内硝的还原 | 第9-10页 |
| ·植物体内铵同化 | 第10页 |
| ·植物体内氮素的运输和储存 | 第10页 |
| ·天冬酰胺合成酶的研究进展 | 第10-15页 |
| ·AS-B结构特性 | 第10-11页 |
| ·植物Asn合成途径 | 第11页 |
| ·AS-B的催化反应机制 | 第11-12页 |
| ·AS基因的表达 | 第12-13页 |
| ·Asn与光呼吸的关系 | 第13-14页 |
| ·AS-B在植物氮代谢中的功能 | 第14-15页 |
| ·AS基因与氮素利用率 | 第15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 PnAS1、PnAS2和PnAS3基因克隆、序列分析及功能鉴定 | 第16-28页 |
| ·材料与方法 | 第16-21页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-27页 |
| ·小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3的克隆 | 第21-23页 |
| ·小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3的生物信息学分析 | 第23-25页 |
| ·原核表达载体pET-14b-PnAS1、pET-14b-PnAS2和pET-14b-PnAS3的构建和鉴定 | 第25-26页 |
| ·小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3在天冬酰胺突变体ER中的表达 | 第26-27页 |
| ·本章小结与讨论 | 第27-28页 |
| 3 小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3基因的表达模式分析 | 第28-38页 |
| ·材料与方法 | 第28-30页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3基因全组织表达特性分析 | 第30-31页 |
| ·小黑杨PnAS1,PnAS2及PnAS3基因在日节律中的表达分析 | 第31页 |
| ·小黑杨PnAS1、PnAS2及PnAS3基因在持续48h光照/黑暗处理中表达分析 | 第31-32页 |
| ·PnAS1、PnAS2及PnAS3对不同氮素形态、供氮水平的响应 | 第32-36页 |
| ·MSX处理 | 第36-37页 |
| ·本章小结与讨论 | 第37-38页 |
| 4 PnAS1转化84K杨树 | 第38-56页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·实验菌种 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-45页 |
| ·植物过表达载体Prok2-PnAS1的构建 | 第38-40页 |
| ·Prok2-PnAS1电击转化农杆菌 | 第40-42页 |
| ·转基因84K杨的再生试验及分子检测 | 第42-43页 |
| ·不同氮素水平下转基因84K杨的生长特性 | 第43页 |
| ·不同氮素水平下转基因84K杨的生理生化指标分析 | 第43-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-54页 |
| ·84K杨的遗传转化 | 第45页 |
| ·转基因84K杨的再生试验 | 第45-46页 |
| ·转基因84K杨的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·转基因植株的Realtime-PCR荧光定量检测 | 第47-48页 |
| ·不同氮素处理条件下转基因84K杨的形态特征 | 第48页 |
| ·转基因84K杨在不同氮素处理水平下生长量的测定 | 第48-49页 |
| ·地径、叶面积、株高的测定 | 第49-50页 |
| ·氮素利用率NUE的测定 | 第50-51页 |
| ·可溶性蛋白含量的测定 | 第51页 |
| ·游离氨基酸含量的测定 | 第51-54页 |
| ·本章小结与讨论 | 第54-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
