中文摘要 | 第1-17页 |
Abstract | 第17-21页 |
第一章 文献综述 | 第21-33页 |
1 桔小实蝇的危害 | 第21页 |
2 昆虫卵巢发育研究进展 | 第21-27页 |
·卵巢简介 | 第21页 |
·卵巢原始生殖细胞的形成 | 第21-23页 |
·卵巢生殖干细胞的形成 | 第23页 |
·卵巢微环境中的信号转导机制 | 第23-26页 |
·卵巢发育中的脂质代谢与卵黄原形成 | 第26-27页 |
3 Tudor与piRNA通路 | 第27-29页 |
·piRNA起源 | 第27-28页 |
·Tudor和piRNA通路蛋白在卵巢发育中的功能 | 第28-29页 |
4 海藻糖代谢 | 第29-30页 |
·海藻糖简介 | 第29页 |
·昆虫海藻糖酶研究进展 | 第29-30页 |
5 本研究立题依据及研究内容 | 第30-33页 |
第二章 桔小实蝇卵巢转录组数据库的建立及分析 | 第33-75页 |
第一节 桔小实蝇卵巢转录组数据库的建立 | 第33-43页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
·供试虫源 | 第33页 |
·供试主要试剂及仪器 | 第33-34页 |
·桔小实蝇卵巢总RNA的提取 | 第34-35页 |
·卵巢样品基因组DNA的去除 | 第35页 |
·桔小实蝇卵巢转录组测序及数据分析 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-42页 |
·桔小实蝇卵巢总RNA的提取质量 | 第36-37页 |
·桔小实蝇卵巢转录组测序情况分析 | 第37-39页 |
·桔小实蝇卵巢转录组功能注释 | 第39-42页 |
3 小结 | 第42-43页 |
第二节 桔小实蝇卵巢发育相关基因及通路分析 | 第43-69页 |
1 材料与方法 | 第43-47页 |
·供试虫源 | 第43页 |
·主要试剂及仪器 | 第43-44页 |
·卵巢发育相关基因和通路鉴定与分析 | 第44页 |
·卵巢发育相关基因的空间表达模式分析 | 第44-47页 |
2 结果与分析 | 第47-68页 |
·卵巢发育相关基因和通路鉴定与分析 | 第47-52页 |
·卵巢发育相关基因的空间表达模式 | 第52-68页 |
3 小结 | 第68-69页 |
本章讨论 | 第69-75页 |
第三章 桔小实蝇piRNA通路相关基因克隆及功能分析 | 第75-113页 |
第一节 桔小实蝇piRNA通路相关基因克隆与序列分析 | 第75-94页 |
1 材料与方法 | 第75-81页 |
·供试虫源 | 第75页 |
·主要试剂及仪器 | 第75-76页 |
·引物设计与合成 | 第76-77页 |
·PCR扩增 | 第77页 |
·克隆及测序 | 第77页 |
·桔小实蝇tud基因序列比对 | 第77页 |
·桔小实蝇piwi、ago3、aub和tud基因的序列分析 | 第77-81页 |
2 结果与分析 | 第81-93页 |
·桔小实蝇piRNA通路相关基因的cDNA克隆和序列信息分析 | 第81-90页 |
·桔小实蝇piRNA通路基因和tudor基因的系统发育分析 | 第90-93页 |
3 小结 | 第93-94页 |
第二节 桔小实蝇piRNA通路相关基因的功能研究 | 第94-110页 |
1 材料与方法 | 第94-100页 |
·供试虫源 | 第94页 |
·主要试剂及仪器 | 第94-95页 |
·用于合成dsRNA的引物设计 | 第95页 |
·dsRNA的合成 | 第95-99页 |
·显微注射 | 第99页 |
·RNAi沉默效率检测及生理学观察 | 第99-100页 |
2 结果与分析 | 第100-109页 |
·dsRNA的合成 | 第100页 |
·对照比较 | 第100-102页 |
·沉默效率检测及生物学测定 | 第102-109页 |
3 小结 | 第109-110页 |
本章讨论 | 第110-113页 |
第四章 干扰桔小实蝇Bdtud基因后的差异基因表达谱分析 | 第113-123页 |
1 材料与方法 | 第113-115页 |
·供试虫源 | 第113页 |
·主要试剂及仪器 | 第113页 |
·RNA的提取 | 第113-114页 |
·数字基因表达谱测序 | 第114页 |
·数据分析 | 第114-115页 |
2 结果与分析 | 第115-119页 |
·RNA提取质量 | 第115-116页 |
·GO功能分类和富集显著性分析 | 第116页 |
·基因的表达量及差异表达基因筛选 | 第116-119页 |
3 小结 | 第119-120页 |
本章讨论 | 第120-123页 |
第五章 海藻糖代谢对桔小实蝇卵巢发育的影响 | 第123-139页 |
第一节 桔小实蝇海藻糖酶基因克隆与序列分析 | 第123-131页 |
1 材料和方法 | 第123-127页 |
·供试虫源 | 第123页 |
·主要试剂及仪器 | 第123-124页 |
·合成RACE反应的第一链cDNA | 第124-125页 |
·引物设计与合成 | 第125页 |
·PCR扩增 | 第125-126页 |
·克隆和测序 | 第126页 |
·基因序列分析 | 第126-127页 |
2 结果与分析 | 第127-130页 |
·桔小实蝇海藻糖酶基因的cDNA克隆与序列分析 | 第127-129页 |
·桔小实蝇海藻糖酶基因的系统发育分析 | 第129-130页 |
3 小结 | 第130-131页 |
第二节 桔小实蝇海藻糖酶基因在卵巢发育过程中的功能探索 | 第131-137页 |
1 材料和方法 | 第131-133页 |
·供试虫源 | 第131页 |
·主要试剂及仪器 | 第131页 |
·用于合成dsRNA的引物设计 | 第131-132页 |
·dsRNA的合成 | 第132页 |
·显微注射 | 第132页 |
·RNAi沉默效率检测 | 第132页 |
·RNAi表型观察 | 第132页 |
·海藻糖含量的测定 | 第132-133页 |
2 结果与分析 | 第133-136页 |
·沉默效率检测 | 第133-134页 |
·海藻糖含量的测定 | 第134-135页 |
·表型检测 | 第135-136页 |
3 小结 | 第136-137页 |
本章讨论 | 第137-139页 |
第六章 主要结果和结论、创新点及研究展望 | 第139-143页 |
1 主要结果和结论 | 第139-140页 |
2 创新点 | 第140-141页 |
3 研究展望 | 第141-143页 |
参考文献 | 第143-159页 |
缩略词 | 第159-161页 |
在读期间发表论文情况 | 第161-163页 |
致谢 | 第163-165页 |