| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第1章 绪论 | 第7-18页 |
| ·马铃薯Y病毒的研究进展 | 第7-10页 |
| ·马铃薯Y病毒简介 | 第7页 |
| ·PVY的分子生物学特征 | 第7-10页 |
| ·真核翻译起始因子eIF4E的研究现状 | 第10-13页 |
| ·eIF4E的简介 | 第10-11页 |
| ·eIF4E同PVY抗性相关性 | 第11-13页 |
| ·基因功能研究策略 | 第13-17页 |
| ·过表达技术 | 第13-14页 |
| ·RNA干扰技术 | 第14-16页 |
| ·基因敲除技术 | 第16-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第2章 试验材料与方法 | 第18-30页 |
| ·试验材料 | 第18-20页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·载体与菌株 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要培养基 | 第18-19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·研究所需设备及仪器 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-30页 |
| ·候选基因的确定 | 第20-23页 |
| ·植物表达载体构建 | 第23-27页 |
| ·工程菌的制备 | 第27页 |
| ·农杆菌介导烟草的遗传转化 | 第27-28页 |
| ·烟草转化株的PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·烟草转化植株的病理试验 | 第29-30页 |
| 第3章 试验结果与分析 | 第30-46页 |
| ·确定候选基因 | 第30-32页 |
| ·基因组序列分析 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR扩增与测序结果 | 第31-32页 |
| ·目的基因表达载体构建 | 第32-36页 |
| ·克隆目的基因 | 第32-33页 |
| ·表达载体构建 | 第33-34页 |
| ·重组子鉴定 | 第34-36页 |
| ·工程菌株制备与鉴定 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36-42页 |
| ·烟草无菌体系建立 | 第36-37页 |
| ·预培养 | 第37-38页 |
| ·浸染 | 第38-39页 |
| ·共培养 | 第39-40页 |
| ·卡那霉素抗性筛选 | 第40-42页 |
| ·烟草转化株的PCR鉴定 | 第42-43页 |
| ·转化株的病理试验结果 | 第43-46页 |
| 第4章 讨论 | 第46-48页 |
| ·烟草中PVY抗性基因eIF4E-6 与va的对应性 | 第46页 |
| ·针对病理试验的分析 | 第46-47页 |
| ·过表达策略的体现及本研究的一些问题 | 第47-48页 |
| 第5章 结论与展望 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第48页 |
| ·工作展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 在校期间发表的论文 | 第57页 |