摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
·间质干细胞与缺血性心脏病 | 第14-15页 |
·间质干细胞来源及生物学特征 | 第14页 |
·间质干细胞与缺血性心脏病 | 第14-15页 |
·exosomes与心血管疾病 | 第15-16页 |
·exosomes的来源及生物学特性 | 第15页 |
·exosomes与心血管疾病 | 第15-16页 |
·microRNA与心肌梗死 | 第16-22页 |
·microRNA生物合成及作用方式 | 第16页 |
·microRNA与心肌梗死 | 第16-22页 |
·小结 | 第22-24页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第24-26页 |
·研究目的 | 第24页 |
·研究方法 | 第24-25页 |
·实验设计方案 | 第25页 |
·研究意义 | 第25-26页 |
第三章 exosomes修复急性心肌梗死过程中相关microRNA表达量测定 | 第26-48页 |
·材料与仪器 | 第26-28页 |
·主要材料 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-35页 |
·hucMSC的分离培养、hucMSC-CM的制备及hucMSC-exosomes的分离纯化鉴定保存 | 第28-29页 |
·乳鼠原代心肌组织来源细胞培养 | 第29页 |
·细胞冻存、复苏、培养、传代与计数 | 第29-30页 |
·构建SD大鼠急性心肌梗死模型 | 第30-31页 |
·小动物高频彩色超声仪检测术后大鼠心功能 | 第31页 |
·大鼠原代心肌细胞缺氧模型的建立 | 第31-32页 |
·Western blot | 第32页 |
·组织与血清标本的处理及保存 | 第32-33页 |
·细胞及组织中总RNA的提取 | 第33页 |
·血清及exosomes中总RNA提取 | 第33-34页 |
·逆转录反应及荧光定量RT-PCR | 第34-35页 |
·实验数据处理与统计 | 第35页 |
·结果 | 第35-42页 |
·hucMSC的形态特征 | 第35-36页 |
·hucMSC-exosomes大小及浓度检测 | 第36-38页 |
·乳鼠原代心肌组织细胞的形态特征 | 第38页 |
·实验动物分组 | 第38-39页 |
·给予hucMSC-exosomes治疗后大鼠心脏功能改善 | 第39页 |
·exosomes减少缺氧诱导的原代心肌细胞凋亡相关蛋白表达 | 第39-40页 |
·exosomes中microRNAs表达变化 | 第40-41页 |
·心肌梗死大鼠血清中microRNA变化 | 第41页 |
·心肌梗死大鼠心脏组织中microRNA变化 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42-48页 |
第四章 miR-92b影响损伤心肌细胞修复的机制探讨 | 第48-62页 |
·材料与仪器 | 第48-49页 |
·主要材料 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-51页 |
·生物信息学分析 | 第49页 |
·miRNA-mimics/Inhibitor转染 | 第49页 |
·提取蛋白 | 第49-50页 |
·蛋白定量(BCA Protein Assay Kit,PIERCE, Inc.) | 第50页 |
·引物设计 | 第50-51页 |
·定量PCR检测Smad7的mRNA变化 | 第51页 |
·Western blot检测Smad7变化 | 第51页 |
·统计学处理 | 第51页 |
·结果 | 第51-59页 |
·microRNA-92b的生物信息学特征 | 第51-52页 |
·microRNA-92b靶基因预测及验证 | 第52-56页 |
·exosomes处理心肌细胞H9C2(2-1) Smad7的mRNA变化 | 第56-57页 |
·miRNA-mimics/Inhibitor转染浓度摸索 | 第57-58页 |
·Western blot检测miR-92b靶基因Smad7变化 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-62页 |
结论与展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议 | 第74页 |