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人脐带间质干细胞来源exosomes介导miR-92b参与修复大鼠急性心肌梗死损伤机制

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 绪论第14-24页
   ·间质干细胞与缺血性心脏病第14-15页
     ·间质干细胞来源及生物学特征第14页
     ·间质干细胞与缺血性心脏病第14-15页
   ·exosomes与心血管疾病第15-16页
     ·exosomes的来源及生物学特性第15页
     ·exosomes与心血管疾病第15-16页
   ·microRNA与心肌梗死第16-22页
     ·microRNA生物合成及作用方式第16页
     ·microRNA与心肌梗死第16-22页
   ·小结第22-24页
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第24-26页
   ·研究目的第24页
   ·研究方法第24-25页
   ·实验设计方案第25页
   ·研究意义第25-26页
第三章 exosomes修复急性心肌梗死过程中相关microRNA表达量测定第26-48页
   ·材料与仪器第26-28页
     ·主要材料第26-27页
     ·主要仪器第27-28页
   ·方法第28-35页
     ·hucMSC的分离培养、hucMSC-CM的制备及hucMSC-exosomes的分离纯化鉴定保存第28-29页
     ·乳鼠原代心肌组织来源细胞培养第29页
     ·细胞冻存、复苏、培养、传代与计数第29-30页
     ·构建SD大鼠急性心肌梗死模型第30-31页
     ·小动物高频彩色超声仪检测术后大鼠心功能第31页
     ·大鼠原代心肌细胞缺氧模型的建立第31-32页
     ·Western blot第32页
     ·组织与血清标本的处理及保存第32-33页
     ·细胞及组织中总RNA的提取第33页
     ·血清及exosomes中总RNA提取第33-34页
     ·逆转录反应及荧光定量RT-PCR第34-35页
     ·实验数据处理与统计第35页
   ·结果第35-42页
     ·hucMSC的形态特征第35-36页
     ·hucMSC-exosomes大小及浓度检测第36-38页
     ·乳鼠原代心肌组织细胞的形态特征第38页
     ·实验动物分组第38-39页
     ·给予hucMSC-exosomes治疗后大鼠心脏功能改善第39页
     ·exosomes减少缺氧诱导的原代心肌细胞凋亡相关蛋白表达第39-40页
     ·exosomes中microRNAs表达变化第40-41页
     ·心肌梗死大鼠血清中microRNA变化第41页
     ·心肌梗死大鼠心脏组织中microRNA变化第41-42页
   ·讨论第42-48页
第四章 miR-92b影响损伤心肌细胞修复的机制探讨第48-62页
   ·材料与仪器第48-49页
     ·主要材料第48页
     ·主要仪器第48-49页
   ·方法第49-51页
     ·生物信息学分析第49页
     ·miRNA-mimics/Inhibitor转染第49页
     ·提取蛋白第49-50页
     ·蛋白定量(BCA Protein Assay Kit,PIERCE, Inc.)第50页
     ·引物设计第50-51页
     ·定量PCR检测Smad7的mRNA变化第51页
     ·Western blot检测Smad7变化第51页
     ·统计学处理第51页
   ·结果第51-59页
     ·microRNA-92b的生物信息学特征第51-52页
     ·microRNA-92b靶基因预测及验证第52-56页
     ·exosomes处理心肌细胞H9C2(2-1) Smad7的mRNA变化第56-57页
     ·miRNA-mimics/Inhibitor转染浓度摸索第57-58页
     ·Western blot检测miR-92b靶基因Smad7变化第58-59页
   ·讨论第59-62页
结论与展望第62-63页
参考文献第63-73页
致谢第73-74页
攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议第74页

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