中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-20页 |
·α-Syn 的结构和功能 | 第13-14页 |
·α-Syn 与神经退行性疾病 | 第14页 |
·环境毒物对α-Syn 的影响 | 第14-15页 |
·农药对α-Syn 的影响 | 第14-15页 |
·金属离子对α-Syn 的影响 | 第15页 |
·α-Syn 的检测方法 | 第15-16页 |
·AVM 毒理学研究进展 | 第16-18页 |
·鸽子作为实验动物的意义 | 第18页 |
·本试验目的与意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-30页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要的菌株与载体 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验动物及分组 | 第21页 |
·实验动物饲养与处理 | 第21页 |
·实验材料采集 | 第21页 |
·引物设计与合成 | 第21-22页 |
·王鸽α-Syn 基因序列的克隆 | 第22-24页 |
·脑组织中总RNA 的抽提 | 第22页 |
·总RNA 含量与纯度检测 | 第22页 |
·反转录反应 | 第22-23页 |
·王鸽α-Syn 基因PCR 扩增及鉴定 | 第23页 |
·王鸽α-Syn 基因PCR 产物的胶回收 | 第23页 |
·王鸽α-Syn 基因的克隆、鉴定及序列测定与分析 | 第23-24页 |
·王鸽α-Syn 基因 3′-UTR 克隆 | 第24页 |
·王鸽α-Syn 基因重组表达载体的构建与鉴定 | 第24-26页 |
·王鸽α-Syn 基因的克隆、鉴定及序列测定与分析 | 第24-25页 |
·王鸽α-Syn 原核表达载体的构建 | 第25页 |
·王鸽α-Syn 重组表达菌的诱导表达 | 第25页 |
·重组融合蛋白王鸽α-Syn 的SDS-PAGE 鉴定 | 第25页 |
·重组融合王鸽α-Syn 蛋白的纯化 | 第25-26页 |
·抗王鸽α-Syn 多克隆抗体的制备和鉴定 | 第26-27页 |
·抗原乳化 | 第26页 |
·动物接种 | 第26页 |
·抗血清的收集 | 第26页 |
·王鸽α-Syn 多克隆抗体效价测定 | 第26-27页 |
·王鸽α-Syn 多克隆抗体特异性的鉴定 | 第27页 |
·王鸽脑组织中α-Syn 含量的免疫组化检测 | 第27-29页 |
·载(盖)玻片的处理 | 第27-28页 |
·石蜡切片的制作 | 第28页 |
·PV 免疫组化二步法 | 第28页 |
·结果判定 | 第28-29页 |
·数据统计与分析 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-43页 |
·王鸽α-Syn 基因克隆与测序结果 | 第30-38页 |
·王鸽脑组织中总RNA 的提取与鉴定 | 第30页 |
·王鸽α-Syn 基因的PCR 扩增结果 | 第30-31页 |
·王鸽α-Syn PCR 产物胶回收结果 | 第31页 |
·王鸽α-Syn 基因序列的测序结果 | 第31-32页 |
·王鸽α-Syn 基因编码区分析结果 | 第32-36页 |
·α-Syn 的3′RACE 反应结果 | 第36-38页 |
·重组表达载体的构建与鉴定 | 第38-40页 |
·目的片段与载体双酶切结果 | 第38-39页 |
·融合蛋白的表达、鉴定与纯化结果 | 第39-40页 |
·多克隆抗体的制备和鉴定结果 | 第40-42页 |
·间接ELISA 法测定多克隆抗体效价的结果 | 第40-41页 |
·Western blot 检测结果 | 第41-42页 |
·免疫组化方法检测α-Syn 基因在王鸽脑内的分布规律 | 第42页 |
·免疫组化方法优化选择 | 第42页 |
·α-Syn 在王鸽脑不同部位的表达 | 第42页 |
·王鸽AVM 急性中毒临床表现及α-Syn 在脑不同部位表达量的变化 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-49页 |
·王鸽α-Syn 基因克隆 | 第43-44页 |
·王鸽α-Syn 基因编码区及同源性分析 | 第43页 |
·王鸽α-Syn 3′UTR 克隆 | 第43-44页 |
·重组王鸽α-Syn 蛋白表达条件优化 | 第44-45页 |
·王鸽α-Syn 多克隆抗体的制备 | 第45页 |
·α-Syn 在王鸽脑不同部位的分布 | 第45-46页 |
·免疫组化方法的建立和优化 | 第45-46页 |
·α-Syn 在王鸽脑中的分布 | 第46页 |
·AVM 急性中毒对 α-Syn 表达的影响 | 第46-49页 |
·AVM 急性中毒的临床表现 | 第46-47页 |
·AVM 急性中毒对 α-Syn 表达的影响 | 第47-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57-61页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第61页 |