| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 一、文献综述 | 第11-24页 |
| 1 丹参研究现状 | 第11-16页 |
| ·丹参的来源 | 第11页 |
| ·丹参的形态特征 | 第11-12页 |
| ·丹参生物学特性 | 第12页 |
| ·丹参化学成分研究 | 第12-13页 |
| ·丹参化学及药理活性 | 第13页 |
| ·丹参分子生物学研究 | 第13-15页 |
| ·丹参功能基因研究 | 第15-16页 |
| 2 表观遗传概述 | 第16-17页 |
| ·表观遗传的含义 | 第16-17页 |
| ·表观遗传的研究内容 | 第17页 |
| 3 DNA甲基化研究现状 | 第17-22页 |
| ·DNA甲基化的含义 | 第17-18页 |
| ·植物DNA甲基化的模式 | 第18-19页 |
| ·植物DNA甲基化酶 | 第19页 |
| ·DNA甲基化在植物生长发育中的作用 | 第19-22页 |
| ·DNA甲基化在植物防御中的作用 | 第20页 |
| ·DNA甲基化调控植物的生长发育 | 第20页 |
| ·DNA甲基化与春化作用及开花 | 第20-21页 |
| ·DNA甲基化的研究方法 | 第21-22页 |
| ·基因组整体水平的甲基化检测方法 | 第21-22页 |
| ·特定DNA位点的甲基化检测 | 第22页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 二、实验部分 | 第24-76页 |
| 1 不同遗传背景丹参的MSAP分析 | 第24-51页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·样品来源 | 第24-25页 |
| ·实验主要仪器及试剂 | 第25-27页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第25页 |
| ·实验主要试剂 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·丹参基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·DNA纯度及浓度检测 | 第28页 |
| ·MSAP接头及引物的配置 | 第28-29页 |
| ·接头及引物储备液 | 第28页 |
| ·EcoR I及Hpall/MspI接头的配置 | 第28-29页 |
| ·EcoR I/Hpall及EcoR I/MspI双酶切 | 第29页 |
| ·双酶切产物连接 | 第29页 |
| ·MSAP预扩增体系及程序 | 第29-30页 |
| ·MSAP选择性扩增 | 第30-31页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31-32页 |
| ·银染 | 第32-33页 |
| ·数据统计与分析 | 第33页 |
| ·多态性条带的回收、纯化、测序及分析 | 第33-34页 |
| ·多态性条带的回收 | 第33-34页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第34页 |
| ·DNA片段测序及序列分析 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-48页 |
| ·丹参DNA提取结果 | 第34-35页 |
| ·最佳双酶切时间的确定 | 第35-36页 |
| ·MSAP预扩增结果 | 第36-37页 |
| ·MSAP选择性扩增扩增体系优化结果 | 第37-41页 |
| ·优化Mg~(2+)结果 | 第37-38页 |
| ·优化dNTP结果 | 第38-39页 |
| ·优化Taq酶结果 | 第39页 |
| ·优化引物浓度结果 | 第39-40页 |
| ·预扩增产物稀释倍数的影响 | 第40-41页 |
| ·聚丙烯酰胺电泳最佳电泳时间的考察 | 第41页 |
| ·最佳银染方法的考察 | 第41-42页 |
| ·MSAP引物筛选 | 第42-43页 |
| ·不同遗传背景丹参的遗传多样性分析 | 第43-46页 |
| ·MSAP扩增结果多态性分析 | 第43-44页 |
| ·MSAP遗传多样性分析 | 第44-46页 |
| ·不同遗传背景丹参的DNA甲基化水平分析 | 第46-48页 |
| ·差异片段比对分析 | 第48页 |
| ·小结 | 第48-51页 |
| 2 不同生理时期丹参的MSAP分析 | 第51-54页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·样品来源 | 第51页 |
| ·实验主要仪器及试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-54页 |
| ·不同生理时期丹参DNA甲基化水平分析 | 第52-53页 |
| ·差异片段比对分析结果 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54页 |
| 3 不同遗传背景丹参脂溶性成分含量测定 | 第54-63页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·样品来源 | 第54-55页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第55页 |
| ·实验仪器 | 第55页 |
| ·实验试剂 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-62页 |
| ·色谱条件 | 第55-56页 |
| ·对照品溶液的制备 | 第56页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第56-57页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第57-58页 |
| ·方法学考察 | 第58-62页 |
| ·系统精密度试验 | 第58-59页 |
| ·重复性试验 | 第59页 |
| ·稳定性试验 | 第59-60页 |
| ·加样回收试验 | 第60-62页 |
| ·不同遗传背景丹参脂溶性成分含量测定结果 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 4 不同遗传背景丹参水溶性成分含量测定 | 第63-70页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·样品来源 | 第63页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第63页 |
| ·实验仪器 | 第63页 |
| ·实验试剂 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-68页 |
| ·色谱条件 | 第63-64页 |
| ·对照品溶液的配制 | 第64-65页 |
| ·供试品溶液的制备 | 第65页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第65-66页 |
| ·方法学考察 | 第66-68页 |
| ·系统精密度试验 | 第66页 |
| ·重复性试验 | 第66-67页 |
| ·稳定性试验 | 第67页 |
| ·加样回收率试验 | 第67-68页 |
| ·样品测定结果 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 5 讨论 | 第70-76页 |
| ·不同提取方法对丹参基因组DNA的影响 | 第70页 |
| ·不同遗传背景丹参的遗传多样性分析 | 第70-71页 |
| ·丹参生长发育过程中DNA甲基化水平及模式的变化 | 第71页 |
| ·丹参DNA甲基化差异片段分析 | 第71-76页 |
| ·不同遗传背景丹参DNA甲基化片段多样性分析 | 第71-73页 |
| ·不同生长发育阶段丹参DNA甲基化差异片段分析 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第88-89页 |