| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-25页 |
| 第一节 红花背景介绍 | 第16-17页 |
| 第二节 黄酮类代谢 | 第17-25页 |
| 一、 代谢途径中主要的关键酶 | 第18-22页 |
| 二、 黄酮类代谢的调节 | 第22-23页 |
| 三、 酶的亚细胞定位和酶复合物的研究 | 第23-24页 |
| 四、 总结 | 第24-25页 |
| 第二章 红花悬浮细胞体系的建立 | 第25-35页 |
| 第一节 实验材料 | 第25-27页 |
| 一、 种子来源 | 第25页 |
| 二、 试剂 | 第25-26页 |
| 三、 仪器 | 第26-27页 |
| 第二节 愈伤组织诱导 | 第27-28页 |
| 一 种子萌发 | 第27页 |
| 二 愈伤诱导 | 第27-28页 |
| 第三节 悬浮细胞形成 | 第28-32页 |
| 一、 获取悬浮细胞 | 第28页 |
| 二、 悬浮细胞培养 | 第28页 |
| 三、 悬浮细胞生长曲线 | 第28页 |
| 四、 茉莉酸甲酯（MJ）对悬浮细胞生长影响 | 第28-29页 |
| 五、 结果 | 第29-32页 |
| 第四节 茉莉酸甲酯对红花悬浮细胞黄酮类化合物成分以及 CtCHI3626 表达的影响 | 第32-33页 |
| 一、 茉莉酸甲酯对红花悬浮细胞黄酮类化合物成分的影响 | 第32页 |
| 二、 茉莉酸甲酯对 CtCHI3626 表达量的影响 | 第32-33页 |
| 第五节 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 红花基因表达研究的参考基因筛选 | 第35-47页 |
| 第一节 实验材料和方法 | 第35-38页 |
| 一、 实验材料 | 第35页 |
| 二、 实验方法 | 第35-38页 |
| 第二节 实验结果 | 第38-46页 |
| 一、 候选基因的选择以及 qPCR 实验 | 第38-41页 |
| 二、 对候选基因表达稳定性进行统计学分析 | 第41-44页 |
| 三、 选定的参考基因对 CtFAD2-10 和 CtKASII 基因表达定量 | 第44-46页 |
| 第三节 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 红花黄酮类代谢相关基因的克隆 | 第47-90页 |
| 第一节 候选基因筛选 | 第47-52页 |
| 一、 红花 EST 文库以及基因芯片数据分析 | 第47-50页 |
| 二、 筛选候选基因 | 第50-52页 |
| 第二节 RACE 克隆相关基因片段 | 第52-67页 |
| 一 实验材料和方法 | 第52-62页 |
| 三、 实验结果 | 第62-67页 |
| 第三节 相关基因的全长克隆 | 第67-70页 |
| 一、 全长引物设计 | 第67页 |
| 二、 全长克隆 | 第67-69页 |
| 三 结果 | 第69-70页 |
| 第四节 相关基因的生物信息学分析 | 第70-86页 |
| 一 查尔酮异构酶基因 | 第71-75页 |
| 二 糖基转移酶基因 | 第75-83页 |
| 三、 昼夜节律途径中关键酶基因 | 第83-86页 |
| 第五节 黄酮类化合物代谢关键酶基因的表达 | 第86-90页 |
| 一、 实验材料 | 第86页 |
| 二、 实验方法 | 第86-88页 |
| 四、 结果与分析 | 第88-89页 |
| 五、 小结 | 第89-90页 |
| 第五章 红花中编码 CHI,CHS 和 GT 的基因功能验证 | 第90-123页 |
| 第一节 原核表达 | 第90-103页 |
| 一、 所用材料与试剂 | 第90-92页 |
| 二、 实验方法 | 第92-96页 |
| 三、 实验结果 | 第96-102页 |
| 四、 小结 | 第102-103页 |
| 第二节 相关基因的真核重组载体构建 | 第103-111页 |
| 一、 目的基因和 pMT39 载体重组 | 第103-110页 |
| 二、 将重组载体导入到 LBA4404 | 第110-111页 |
| 第三节 农杆菌介导的红花遗传转化 | 第111-123页 |
| 一、 红花外植体的农杆菌转化 | 第111-115页 |
| 二、 花粉管导入法获得红花转基因植株 | 第115-121页 |
| 三、 小结 | 第121-123页 |
| 结论与讨论 | 第123-126页 |
| 参考文献 | 第126-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
