研究提要 | 第1-11页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
·CHO细胞无血清培养表达系统研究进展 | 第12-15页 |
·CHO细胞简介 | 第12页 |
·CHO细胞的无血清培养研究进展 | 第12-14页 |
·主要营养物质介绍 | 第14-15页 |
·工程细胞株的构建及筛选 | 第15页 |
·重组人促卵泡激素(rhFSH)研究进展 | 第15-17页 |
·人促卵泡激素(hFSH)的介绍 | 第15-16页 |
·重组人促卵泡激素(rhFSH)的研究现状 | 第16-17页 |
·细胞大规模培养研究进展 | 第17-22页 |
·滚瓶、转瓶培养简介 | 第17页 |
·细胞培养用生物反应器介绍 | 第17-20页 |
·大规模培养方式的研究 | 第20-22页 |
·本论文的立体依据及研究意义 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-33页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·材料 | 第24页 |
·工程细胞 | 第24-25页 |
·无血清培养基 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-33页 |
·细胞计数法 | 第26页 |
·细胞复苏法 | 第26页 |
·滚瓶培养法 | 第26-27页 |
·转瓶培养法 | 第27页 |
·表达量检测方法 | 第27页 |
·滚瓶分批式培养法 | 第27页 |
·连续式培养法 | 第27-28页 |
·流加式培养法 | 第28页 |
·灌注式微载体培养法 | 第28页 |
·滚瓶筛选混合配方培养基方法 | 第28-29页 |
·高密度培养筛选实验法 | 第29页 |
·反应器适应实验法 | 第29页 |
·维持阶段补加葡萄糖方法 | 第29-30页 |
·葡萄糖检测法 | 第30页 |
·种子培养法 | 第30页 |
·40L反应器培养法 | 第30页 |
·纯化方法 | 第30-31页 |
·唾液酸含量检测方法 | 第31页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法 | 第31页 |
·体内生物活性测定方法 | 第31-32页 |
·HPLC法 | 第32-33页 |
第三章 结果与讨论 | 第33-59页 |
·小规模培养工艺的研究 | 第33-40页 |
·细胞增殖周期的确定 | 第33-34页 |
·不同补料速率对细胞增殖状态的影响 | 第34-36页 |
·不同温度对细胞表达状态的影响 | 第36-39页 |
·不同搅拌速率对细胞增殖状态的影响 | 第39-40页 |
·CHO细胞表达rhFSH的小规模培养工艺研究 | 第40-47页 |
·分批式培养工艺的培养曲线 | 第40-42页 |
·连续式培养工艺的培养曲线 | 第42-44页 |
·流加式培养工艺 | 第44-45页 |
·灌注微载体式培养工艺 | 第45-47页 |
·主细胞库的检定 | 第47-50页 |
·主细胞库检定要求 | 第47-48页 |
·工程细胞检定报告 | 第48-50页 |
·CHO配方培养基的研究 | 第50-54页 |
·配方培养基的滚瓶初筛研究 | 第50-51页 |
·滚瓶高密度接种培养基筛选结果 | 第51-52页 |
·配方培养基5L反应器培养结果 | 第52页 |
·维持阶段葡萄糖添加效果 | 第52-54页 |
·CHO细胞表达rhFSH的中试放大培养工艺的研究 | 第54-57页 |
·40L反应器六批次培养图谱 | 第54-55页 |
·六批次质量检测结果 | 第55-57页 |
·工作展望 | 第57-59页 |
·进一步稳定放大生产工艺的摸索 | 第57-58页 |
·检定方法的研究 | 第58-59页 |
第四章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
附录 | 第64-70页 |
中文摘要 | 第70-71页 |
Abstract | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |