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CHO细胞表达rhFSH的大规模无血清培养工艺的研究

研究提要第1-11页
英文缩略词表第11-12页
第一章 绪论第12-24页
   ·CHO细胞无血清培养表达系统研究进展第12-15页
     ·CHO细胞简介第12页
     ·CHO细胞的无血清培养研究进展第12-14页
     ·主要营养物质介绍第14-15页
     ·工程细胞株的构建及筛选第15页
   ·重组人促卵泡激素(rhFSH)研究进展第15-17页
     ·人促卵泡激素(hFSH)的介绍第15-16页
     ·重组人促卵泡激素(rhFSH)的研究现状第16-17页
   ·细胞大规模培养研究进展第17-22页
     ·滚瓶、转瓶培养简介第17页
     ·细胞培养用生物反应器介绍第17-20页
     ·大规模培养方式的研究第20-22页
   ·本论文的立体依据及研究意义第22-24页
第二章 材料与方法第24-33页
   ·实验材料第24-26页
     ·材料第24页
     ·工程细胞第24-25页
     ·无血清培养基第25页
     ·主要仪器第25-26页
   ·实验方法第26-33页
     ·细胞计数法第26页
     ·细胞复苏法第26页
     ·滚瓶培养法第26-27页
     ·转瓶培养法第27页
     ·表达量检测方法第27页
     ·滚瓶分批式培养法第27页
     ·连续式培养法第27-28页
     ·流加式培养法第28页
     ·灌注式微载体培养法第28页
     ·滚瓶筛选混合配方培养基方法第28-29页
     ·高密度培养筛选实验法第29页
     ·反应器适应实验法第29页
     ·维持阶段补加葡萄糖方法第29-30页
     ·葡萄糖检测法第30页
     ·种子培养法第30页
     ·40L反应器培养法第30页
     ·纯化方法第30-31页
     ·唾液酸含量检测方法第31页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法第31页
     ·体内生物活性测定方法第31-32页
     ·HPLC法第32-33页
第三章 结果与讨论第33-59页
   ·小规模培养工艺的研究第33-40页
     ·细胞增殖周期的确定第33-34页
     ·不同补料速率对细胞增殖状态的影响第34-36页
     ·不同温度对细胞表达状态的影响第36-39页
     ·不同搅拌速率对细胞增殖状态的影响第39-40页
   ·CHO细胞表达rhFSH的小规模培养工艺研究第40-47页
     ·分批式培养工艺的培养曲线第40-42页
     ·连续式培养工艺的培养曲线第42-44页
     ·流加式培养工艺第44-45页
     ·灌注微载体式培养工艺第45-47页
   ·主细胞库的检定第47-50页
     ·主细胞库检定要求第47-48页
     ·工程细胞检定报告第48-50页
   ·CHO配方培养基的研究第50-54页
     ·配方培养基的滚瓶初筛研究第50-51页
     ·滚瓶高密度接种培养基筛选结果第51-52页
     ·配方培养基5L反应器培养结果第52页
     ·维持阶段葡萄糖添加效果第52-54页
   ·CHO细胞表达rhFSH的中试放大培养工艺的研究第54-57页
     ·40L反应器六批次培养图谱第54-55页
     ·六批次质量检测结果第55-57页
   ·工作展望第57-59页
     ·进一步稳定放大生产工艺的摸索第57-58页
     ·检定方法的研究第58-59页
第四章 结论第59-60页
参考文献第60-64页
附录第64-70页
中文摘要第70-71页
Abstract第71-73页
致谢第73页

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