| 前言 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-12页 |
| Abstract | 第12-24页 |
| 第1章 绪论 | 第24-42页 |
| ·表观遗传机制及其对癌变的负调控 | 第25-29页 |
| ·DNA 甲基化 | 第25-27页 |
| ·染色体重组和组蛋白修饰 | 第27-29页 |
| ·肾细胞肿瘤 RCT 的表观遗传基因变异和临床应用 | 第29-42页 |
| ·DNA 甲基化 | 第30-33页 |
| ·染色质重塑和组蛋白的致癌突变 | 第33-37页 |
| ·miRNA | 第37-42页 |
| 第2章 材料与方法 | 第42-64页 |
| ·一般资料 | 第42页 |
| ·组织样本采集 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·试剂配制 | 第43-47页 |
| ·PBS：按下表配制 | 第43-44页 |
| ·蛋白提取液(10ml) 按下表配制 | 第44-45页 |
| ·蛋白电泳缓冲液即 1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 | 第45页 |
| ·2 x SDS-PAGE loading buffer 按下表配制 | 第45页 |
| ·免疫印迹实验 | 第45-46页 |
| ·酶切重组质粒，转染及纯化 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·主要方法 | 第48-64页 |
| ·腺病毒 | 第48-52页 |
| ·肾组织及细胞系总 RNA 提取 | 第52-53页 |
| ·逆转录反应 | 第53-54页 |
| ·实时定量 PCR 测定组织细胞 TRAILmRNA 水平 | 第54-55页 |
| ·实时定量PCR比较肾组织与细胞系TRAIL-mRNA含量差异 | 第55-56页 |
| ·肾组织及细胞系蛋白提取 | 第56页 |
| ·SDS-PAGE 配制方法 | 第56-58页 |
| ·免疫印迹 | 第58页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 | 第58-62页 |
| ·MTT | 第62-63页 |
| ·动物实验 | 第63页 |
| ·肝功能损害的评价 | 第63页 |
| ·统计学方法 | 第63-64页 |
| 第3章 结果 | 第64-81页 |
| ·实时定量 PCR 比较肾细胞癌与正常对照 MIR-138，MIR-199 的含量差异 | 第64-69页 |
| ·实时定量 PCR 比较肾细胞癌组织与正常肾组织 MIR-138，MIR-199 的含量差异 | 第64-67页 |
| ·实时定量 PCR 比较肾细胞癌细胞株与正常细胞株中MIR-138，MIR-199 的含量差异 | 第67-68页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 MRE 限制 RCC 细胞内外源基因的表达 | 第68-69页 |
| ·免疫组织化学染色观察 MRE 介导 TRAIL 选择性地表达于 RCC细胞 | 第69-72页 |
| ·腺病毒载体 | 第69-70页 |
| ·WESTERN BLOT检测 TRAIL 在肾癌细胞株和正常细胞株上的表达 | 第70-71页 |
| ·实时定量PCR比较TRAILMRNA在肾癌细胞株和正常细胞株含量差异 | 第71-72页 |
| ·MIR-138，MIR-199 的量与 TRAIL 表达的关系49 | 第72-74页 |
| ·WESTERN BLOT检测转染模拟剂和抑制剂后 TRAIL 表达水平差异 | 第72-73页 |
| ·实时定量 PCR 检测转染模拟剂和抑制剂后 TRAIL 表达水平差异 | 第73-74页 |
| ·AD-TRAIL-3MRES与肾癌特异性的细胞凋亡的关系 | 第74-75页 |
| ·Western blot 检测转染三种不同腺病毒后凋亡途径表达水平差异 | 第74-75页 |
| ·流式细胞仪检测转染三种不同腺病毒后细胞的 sub- G0/G1 比 | 第75页 |
| ·MTT 法检测转染 AD-TRAIL-3MREs 后 RCC 细胞的存活 | 第75-77页 |
| ·动物实验 | 第77-78页 |
| ·MRE 调控 TRAIL 表达与异种移植到小鼠的肿瘤生长 | 第77-78页 |
| ·小鼠体内肿瘤进行 TRAIL 与细胞凋亡相关蛋白表达的免疫印迹分析 | 第78页 |
| ·检测小鼠肝功能 | 第78-81页 |
| 第4章 讨论 | 第81-89页 |
| ·比较肾细胞癌与正常对照及肾细胞癌细胞株与正常细胞间MIR- 138，MIR-199 的含量差异 | 第83-84页 |
| ·MRE 抑制在正常细胞中外源基因表达 | 第84-85页 |
| ·TRAIL 监管 RCC 细胞 MIR-138，MIR-199 的 MRE | 第85页 |
| ·AD-TRAIL-3MRES选择性诱发 RCC 凋亡抑制其生长 | 第85-87页 |
| ·AD-TRAIL-3MRES对正常细胞没有毒性作用 | 第87页 |
| ·TRAIL 表达抑制异种移植到小鼠的肿瘤生长 | 第87-89页 |
| 第5章 结论 | 第89-90页 |
| 创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-114页 |
| 攻读博士期间主要学术成果 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116页 |
