| 摘要 | 第1-16页 |
| Abstract | 第16-18页 |
| 1 引言 | 第18-35页 |
| ·胚胎着床及其分子调控 | 第18-22页 |
| ·胚胎着床 | 第18页 |
| ·蜕膜化 | 第18-19页 |
| ·类固醇激素及其受体 | 第19-21页 |
| ·代谢与蜕膜化过程 | 第21-22页 |
| ·Ass1的研究进展 | 第22-29页 |
| ·Ass1的生化结构 | 第22-23页 |
| ·Ass1的基因表达调节 | 第23-26页 |
| ·Ass1的生物学功能 | 第26-28页 |
| ·精氨琥珀酸合酶缺失症 | 第28-29页 |
| ·精氨酸在哺乳动物生殖发育中的作用 | 第29-33页 |
| ·精氨酸的产生及其代谢网络 | 第29-30页 |
| ·精氨酸在哺乳动物生殖发育中的作用 | 第30-33页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第33-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-64页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·实验动物模型 | 第35-37页 |
| ·正常妊娠 | 第35页 |
| ·假孕 | 第35页 |
| ·延迟着床和激活 | 第35-36页 |
| ·人工诱导蜕膜化 | 第36页 |
| ·类固醇激素处理 | 第36页 |
| ·Ass1的特异性抑制剂体内注射 | 第36-37页 |
| ·材料收集和保存 | 第37页 |
| ·子宫的收集 | 第37页 |
| ·子宫内膜的收集 | 第37页 |
| ·血清的收集 | 第37页 |
| ·Ass1和Asl cRNA探针制备 | 第37-43页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·RNA的提取 | 第37-39页 |
| ·反转录 | 第39页 |
| ·PCR | 第39-40页 |
| ·PCR产物回收 | 第40页 |
| ·回收的产物与pGEM-T载体连接 | 第40-41页 |
| ·转化 | 第41页 |
| ·插入方向鉴定 | 第41页 |
| ·提取阳性克隆质粒 | 第41-42页 |
| ·片断扩增和回收 | 第42页 |
| ·地高辛标记cRNA探针 | 第42-43页 |
| ·原位杂交 | 第43-45页 |
| ·载玻片的制备 | 第43页 |
| ·冰冻切片制备 | 第43-44页 |
| ·原位杂交试剂制备 | 第44页 |
| ·原位杂交流程 | 第44-45页 |
| ·免疫组织化学 | 第45-47页 |
| ·相关试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·操作步骤 | 第46-47页 |
| ·载体构建和RNA干涉片段合成 | 第47-51页 |
| ·Ha-Ass1 Ha-Asl过表达载体构建 | 第47-48页 |
| ·Ass1-PGL-Basic启动子及截短载体构建 | 第48-49页 |
| ·Ass1-mCRE-Luc突变载体构建 | 第49-50页 |
| ·Creb和Ass1干涉片段 | 第50-51页 |
| ·小鼠子宫内膜基质细胞分离及培养 | 第51-52页 |
| ·培养前的准备工作 | 第51页 |
| ·小鼠子宫内膜基质细胞的分离与培养 | 第51-52页 |
| ·人传代子宫内膜基质细胞培养 | 第52页 |
| ·细胞处理 | 第52-56页 |
| ·小鼠基质细胞处理 | 第52-55页 |
| ·人的传代基质细胞处理 | 第55-56页 |
| ·Real-time PCR | 第56-57页 |
| ·RNA提取 | 第56页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·操作过程 | 第56-57页 |
| ·数据分析 | 第57页 |
| ·Western blot | 第57-61页 |
| ·相关试剂的配制 | 第57-60页 |
| ·蛋白样品收取和浓度测定 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE | 第60-61页 |
| ·Western blot | 第61页 |
| ·高效液相色谱(HPLC) | 第61-63页 |
| ·相关试剂的配制 | 第61-62页 |
| ·操作步骤 | 第62-63页 |
| ·CCK-8 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-85页 |
| ·Ass1和Asl在早期妊娠小鼠子宫内膜中的表达 | 第64-65页 |
| ·原位杂交检测Ass1和Asl在早期妊娠小鼠子宫中的表达 | 第64页 |
| ·Real-time PCR检测Ass1及Asl在早期妊娠小鼠子宫中的表达 | 第64-65页 |
| ·免疫组化检测Ass1及Asl在早期妊娠小鼠子宫中的表达 | 第65页 |
| ·Assl和Asl在假孕和延迟激活着床小鼠子宫中的表达 | 第65-66页 |
| ·Assl和Asl在小鼠人工诱导子宫蜕膜瘤中表达 | 第66-67页 |
| ·原位杂交检测Ass1和Asl在小鼠人工诱导子宫蜕膜瘤中表达 | 第66页 |
| ·Real-time PCR检测Ass1和Asl在小鼠人工诱导子宫蜕膜瘤中表达 | 第66-67页 |
| ·精氨酸在妊娠小鼠第4天和第8天子宫内膜和血清中的水平 | 第67页 |
| ·Ass1与蜕膜化的关系 | 第67-74页 |
| ·Ass1抑制剂对体内小鼠蜕膜化影响 | 第67-68页 |
| ·Ass1在体外诱导蜕膜化过程中的表达及作用 | 第68-74页 |
| ·cAMP对Ass1表达的调节 | 第74-80页 |
| ·cAMP应答元件结合蛋白在早期妊娠小鼠子宫内膜中的表达 | 第74-75页 |
| ·cAMP诱导小鼠基质细胞蜕膜化 | 第75页 |
| ·cAMP诱导基质细胞Ass1的表达 | 第75-76页 |
| ·cAMP通过PKA激酶调节Ass1的表达 | 第76-77页 |
| ·p-Creb调节Ass1的表达 | 第77-79页 |
| ·p-Creb对Ass1的转录调节 | 第79-80页 |
| ·精氨酸在蜕膜化过程中的作用 | 第80-85页 |
| ·L-Arg对小鼠基质细胞增殖的影响 | 第80-81页 |
| ·L-Arg对蜕膜化的影响 | 第81-83页 |
| ·L-Arg对Ass1和Asl的影响 | 第83-85页 |
| 4 讨论 | 第85-92页 |
| ·cAMP调节小鼠的蜕膜化过程 | 第85-86页 |
| ·cAMP通过磷酸化Creb调节Ass1的表达 | 第86页 |
| ·Ass1促进着床后子宫内膜基质细胞蜕膜化 | 第86-87页 |
| ·精氨酸促进小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化 | 第87-89页 |
| ·精氨酸促进子宫内膜基质细胞增殖 | 第89页 |
| ·精氨酸内环境稳态的维持 | 第89-92页 |
| 5 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-115页 |
| 图版 | 第115-120页 |
| 附录A 中英文对照 | 第120-121页 |
| 攻读博士期间待发表的学术论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122页 |
