摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 猪嗜血支原体病原学及病原与宿主相互作用的研究进展 | 第11-33页 |
1 猪嗜血支原体病原学 | 第11-16页 |
·起源与分类 | 第11-12页 |
·形态及理化特性 | 第12-13页 |
·分子生物学特点 | 第13-15页 |
·致病机理 | 第15-16页 |
2. 病原与宿主相互作用的研究进展 | 第16-25页 |
·病毒-宿主之间的相互作用 | 第16-17页 |
·细菌-宿主之间的相互作用 | 第17-18页 |
·寄生虫-宿主之间的相互作用 | 第18-19页 |
·研究病原蛋白与宿主蛋白相互作用的方法 | 第19-25页 |
参考文献 | 第25-33页 |
第二章 猪嗜血支原体MSG1蛋白相关红细胞膜蛋白的筛选与鉴定 | 第33-43页 |
摘要 | 第33-34页 |
1 材料 | 第34-36页 |
·质粒、菌株与实验动物 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·MSG1重组蛋白的制备 | 第34-35页 |
·红细胞膜蛋白的制备 | 第35-36页 |
·串联亲和层析法筛选MSG1相关红细胞膜蛋白 | 第36页 |
·质谱分析(MS) | 第36页 |
2 结果 | 第36-39页 |
·MSG1蛋白的表达及纯化 | 第36-37页 |
·猪红细胞膜蛋白的提取 | 第37-38页 |
·MSG1相关红细胞膜蛋白的筛选 | 第38页 |
·质谱分析鉴定红细胞膜蛋白 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-41页 |
ABSTRACT | 第41-43页 |
第三章 猪乳铁蛋白(LTF)、带三蛋白(band 3)多克隆抗体的制备及鉴定 | 第43-61页 |
摘要 | 第43-44页 |
1 材料与方法 | 第44-52页 |
·菌株、质粒、实验动物 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·pET32a-LTF-N762重组质粒的构建 | 第44-47页 |
·LTF-N762重组蛋白的表达与鉴定 | 第47-48页 |
·动物免疫 | 第48页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第48-50页 |
·Band 3兔多抗的制备 | 第50页 |
·多克隆抗体的纯化 | 第50-51页 |
·猪红细胞膜蛋白western blot鉴定 | 第51页 |
·猪红细胞IFA鉴定 | 第51-52页 |
2 实验结果 | 第52-57页 |
·LTF-N762基因的扩增 | 第52页 |
·p32a-LTF-N762重组质粒的鉴定 | 第52-53页 |
·LTF-N762重组蛋白的表达 | 第53页 |
·重组蛋白western blot鉴定 | 第53-54页 |
·LTF-N762重组蛋白的纯化 | 第54页 |
·抗血清抗体效价测定 | 第54页 |
·多抗western blot鉴定 | 第54-55页 |
·多克隆抗体的纯化 | 第55页 |
·猪红细胞膜蛋白western blot鉴定 | 第55-56页 |
·猪红细胞间接免疫荧光实验(IFA) | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-59页 |
ABSTRACT | 第59-61页 |
第三章 猪嗜血支原体MSG1蛋白与猪红细胞膜蛋白相互作用的研究 | 第61-81页 |
摘要 | 第61-62页 |
1 材料与方法 | 第62-68页 |
·细胞及主要试剂 | 第62页 |
·抗原蛋白的制备 | 第62页 |
·单抗(1A7)腹水的制备 | 第62-63页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第63页 |
·MSG1蛋白与红细胞及哺乳动物细胞的作用 | 第63-64页 |
·β-actin siRNA干扰实验 | 第64-66页 |
·激光共聚焦实验 | 第66-67页 |
·MSG1与LIF和β-actin体外相互作用的pull-down实验 | 第67-68页 |
2 结果 | 第68-75页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第68页 |
·MSG1蛋白与红细胞的作用 | 第68-69页 |
·MSG1蛋白与哺乳动物细胞相互作用 | 第69-70页 |
·β-actin siRNA干扰实验 | 第70-71页 |
·激光共聚焦实验 | 第71-73页 |
·MSG1与LTF和β-actin体外相互作用的pull-down实验 | 第73-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-79页 |
ABSTRACT | 第79-81页 |
全文总结 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
附录 | 第85-88页 |