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猪嗜血支原体MSG1蛋白与猪红细胞膜蛋白相互作用的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 猪嗜血支原体病原学及病原与宿主相互作用的研究进展第11-33页
 1 猪嗜血支原体病原学第11-16页
   ·起源与分类第11-12页
   ·形态及理化特性第12-13页
   ·分子生物学特点第13-15页
   ·致病机理第15-16页
 2. 病原与宿主相互作用的研究进展第16-25页
   ·病毒-宿主之间的相互作用第16-17页
   ·细菌-宿主之间的相互作用第17-18页
   ·寄生虫-宿主之间的相互作用第18-19页
   ·研究病原蛋白与宿主蛋白相互作用的方法第19-25页
 参考文献第25-33页
第二章 猪嗜血支原体MSG1蛋白相关红细胞膜蛋白的筛选与鉴定第33-43页
 摘要第33-34页
 1 材料第34-36页
   ·质粒、菌株与实验动物第34页
   ·试剂第34页
   ·MSG1重组蛋白的制备第34-35页
   ·红细胞膜蛋白的制备第35-36页
   ·串联亲和层析法筛选MSG1相关红细胞膜蛋白第36页
   ·质谱分析(MS)第36页
 2 结果第36-39页
   ·MSG1蛋白的表达及纯化第36-37页
   ·猪红细胞膜蛋白的提取第37-38页
   ·MSG1相关红细胞膜蛋白的筛选第38页
   ·质谱分析鉴定红细胞膜蛋白第38-39页
 3 讨论第39-40页
 参考文献第40-41页
 ABSTRACT第41-43页
第三章 猪乳铁蛋白(LTF)、带三蛋白(band 3)多克隆抗体的制备及鉴定第43-61页
 摘要第43-44页
 1 材料与方法第44-52页
   ·菌株、质粒、实验动物第44页
   ·主要试剂第44页
   ·pET32a-LTF-N762重组质粒的构建第44-47页
   ·LTF-N762重组蛋白的表达与鉴定第47-48页
   ·动物免疫第48页
   ·多克隆抗体的鉴定第48-50页
   ·Band 3兔多抗的制备第50页
   ·多克隆抗体的纯化第50-51页
   ·猪红细胞膜蛋白western blot鉴定第51页
   ·猪红细胞IFA鉴定第51-52页
 2 实验结果第52-57页
   ·LTF-N762基因的扩增第52页
   ·p32a-LTF-N762重组质粒的鉴定第52-53页
   ·LTF-N762重组蛋白的表达第53页
   ·重组蛋白western blot鉴定第53-54页
   ·LTF-N762重组蛋白的纯化第54页
   ·抗血清抗体效价测定第54页
   ·多抗western blot鉴定第54-55页
   ·多克隆抗体的纯化第55页
   ·猪红细胞膜蛋白western blot鉴定第55-56页
   ·猪红细胞间接免疫荧光实验(IFA)第56-57页
 3 讨论第57-58页
 参考文献第58-59页
 ABSTRACT第59-61页
第三章 猪嗜血支原体MSG1蛋白与猪红细胞膜蛋白相互作用的研究第61-81页
 摘要第61-62页
 1 材料与方法第62-68页
   ·细胞及主要试剂第62页
   ·抗原蛋白的制备第62页
   ·单抗(1A7)腹水的制备第62-63页
   ·单克隆抗体的纯化第63页
   ·MSG1蛋白与红细胞及哺乳动物细胞的作用第63-64页
   ·β-actin siRNA干扰实验第64-66页
   ·激光共聚焦实验第66-67页
   ·MSG1与LIF和β-actin体外相互作用的pull-down实验第67-68页
 2 结果第68-75页
   ·单克隆抗体的纯化第68页
   ·MSG1蛋白与红细胞的作用第68-69页
   ·MSG1蛋白与哺乳动物细胞相互作用第69-70页
   ·β-actin siRNA干扰实验第70-71页
   ·激光共聚焦实验第71-73页
   ·MSG1与LTF和β-actin体外相互作用的pull-down实验第73-75页
 3 讨论第75-77页
 参考文献第77-79页
 ABSTRACT第79-81页
全文总结第81-83页
致谢第83-85页
附录第85-88页

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