| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-32页 |
| ·引言 | 第10页 |
| ·miRNA研究历史和现状 | 第10-14页 |
| ·microRNA的发现和鉴定 | 第10-11页 |
| ·microRNA的生成加工 | 第11-13页 |
| ·microRNA的作用机制 | 第13页 |
| ·microRNA的靶点预测和验证 | 第13-14页 |
| ·microRNA的降解 | 第14页 |
| ·microRNA和肿瘤的关系 | 第14-21页 |
| ·microRNA与肺癌的关系 | 第15-16页 |
| ·microRNA与白血病的关系 | 第16-17页 |
| ·microRNA与乳腺癌的关系 | 第17-19页 |
| ·microRNA与肝癌的关系 | 第19-20页 |
| ·microRNA与胃癌的关系 | 第20页 |
| ·microRNA与结肠癌的关系 | 第20-21页 |
| ·细胞周期与肿瘤的关系 | 第21-25页 |
| ·细胞周期的特点 | 第21-22页 |
| ·细胞周期相关分子 | 第22-24页 |
| ·细胞周期与癌症的关系 | 第24-25页 |
| ·启动子DNA甲基化 | 第25-32页 |
| ·启动子与基因表达 | 第25-26页 |
| ·启动子DNA的甲基化方式 | 第26-27页 |
| ·启动子DNA甲基化与miRNA和肿瘤的关系 | 第27-29页 |
| ·启动子甲基化的检测方法 | 第29-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-57页 |
| ·材料 | 第32-40页 |
| ·细胞系 | 第32页 |
| ·质粒和菌种 | 第32页 |
| ·病人样本 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33-34页 |
| ·miRNA,siRNA和miRNA inhibitor | 第34-37页 |
| ·试剂及溶液配制 | 第37-40页 |
| ·实验方法 | 第40-57页 |
| ·细胞培养 | 第40-41页 |
| ·RNA抽提 | 第41页 |
| ·逆转录 | 第41-42页 |
| ·荧光定量PCR | 第42-43页 |
| ·质粒构建 | 第43-46页 |
| ·转染 | 第46-47页 |
| ·细胞增殖检测 | 第47-48页 |
| ·EdU渗人检测 | 第48-49页 |
| ·细胞周期检测 | 第49页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第49-50页 |
| ·双报告检测 | 第50页 |
| ·western blot检测 | 第50-52页 |
| ·DNA甲基化检测 | 第52-54页 |
| ·甲基化寡核昔酸诱导DNA甲基化 | 第54-55页 |
| ·裸鼠皮下成瘤模型实验 | 第55页 |
| ·免疫组化实验 | 第55-56页 |
| ·统计学分析 | 第56-57页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第57-90页 |
| ·miR-545在肺癌组织中低表达 | 第57-60页 |
| ·研究对象的选择 | 第60-62页 |
| ·miR-545抑制肺癌细胞增殖 | 第62-65页 |
| ·miR-545抑制DNA合成 | 第65-66页 |
| ·miR-545阻滞肺癌细胞周期在G1期 | 第66-67页 |
| ·miR-545诱导肺癌细胞凋亡 | 第67-69页 |
| ·miR-545的靶基因研究 | 第69-78页 |
| ·miR-545通过靶向抑制cyclin D1和CDK4抑制细胞增殖 | 第71-75页 |
| ·miR-545靶向抑制PAK2 | 第75-78页 |
| ·miR-545与启动子甲基化研究 | 第78-88页 |
| ·miR-545启动子分析 | 第79-80页 |
| ·甲基化寡核苷酸诱导DNA甲基化 | 第80-83页 |
| ·5'-Aza-dC诱导DNA去甲基化 | 第83-88页 |
| ·讨论和结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第102页 |