| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-41页 |
| ·脂类代谢及其调控 | 第13-25页 |
| ·脂肪组织概述 | 第13-14页 |
| ·脂肪细胞分化及调控 | 第14-22页 |
| ·脂肪沉积及调控 | 第22-25页 |
| ·肌内脂肪研究进展 | 第25-27页 |
| ·肌内脂肪的生成 | 第25-26页 |
| ·肌内脂肪与肉品质的关系 | 第26页 |
| ·营养因素对肌内脂肪含量的影响 | 第26-27页 |
| ·肌内脂肪含量的遗传控制 | 第27-32页 |
| ·脂肪酸结合蛋白概述 | 第28-30页 |
| ·心脏脂肪酸结合蛋白结构 | 第30-31页 |
| ·心脏脂肪酸结合蛋白功能 | 第31-32页 |
| ·转基因动物制备方法 | 第32-39页 |
| ·原核显微注射法 | 第32-33页 |
| ·逆转录病毒载体法 | 第33-34页 |
| ·精子介导的基因转移 | 第34页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第34-35页 |
| ·体细胞核移植法 | 第35-36页 |
| ·PiggyBac转座子 | 第36-39页 |
| ·本研究的意义 | 第39-41页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第41-71页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第41页 |
| ·实验动物和细胞 | 第41页 |
| ·试剂盒 | 第41-42页 |
| ·酶和Marker | 第42页 |
| ·抗体和引物 | 第42页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第42-43页 |
| ·实验仪器设备 | 第43-44页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备所需试剂的配制 | 第44-45页 |
| ·质粒DNA提取所需试剂的配制 | 第45页 |
| ·基因组DNA提取所需试剂的配制 | 第45-46页 |
| ·总RNA提取所需试剂的配制 | 第46页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所需试剂的配制 | 第46页 |
| ·总蛋白质提取所需试剂的配制 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE所需试剂的配制 | 第46-47页 |
| ·Western blot所需试剂的配制 | 第47页 |
| ·细胞培养所需试剂的配制 | 第47-48页 |
| ·3T3-L1小鼠前脂肪细胞诱导分化所需试剂的配制 | 第48页 |
| ·油红O染色实验所需试剂的配制 | 第48页 |
| ·组织切片所需试剂的配制 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-71页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第49页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第49-50页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第50页 |
| ·普通PCR | 第50-52页 |
| ·高保真PCR | 第52-53页 |
| ·DNA的酶切 | 第53-54页 |
| ·PCR和酶切产物的切胶回收 | 第54页 |
| ·PCR和酶切产物的回收 | 第54页 |
| ·DNA的连接及转化 | 第54-55页 |
| ·In-Fusion实验 | 第55页 |
| ·荧光定量PCR | 第55-56页 |
| ·3T3-L1小鼠前脂肪细胞培养及诱导分化 | 第56页 |
| ·细胞培养及传代 | 第56-57页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第57页 |
| ·细胞瞬时转染实验 | 第57页 |
| ·细胞稳定转染实验 | 第57-59页 |
| ·总RNA的提取 | 第59页 |
| ·反转录合成cDNA | 第59-60页 |
| ·总蛋白的提取 | 第60-61页 |
| ·Western blot实验 | 第61-62页 |
| ·油红O染色 | 第62页 |
| ·3T3-L1细胞甘油三酯含量的测定 | 第62-63页 |
| ·显微注射法制备转基因小鼠 | 第63-66页 |
| ·小鼠基因组DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·小鼠骨骼肌甘油三酯含量的测定 | 第67页 |
| ·小鼠骨骼肌游离脂肪酸含量的测定 | 第67-68页 |
| ·小鼠组织石蜡切片 | 第68-69页 |
| ·小鼠骨骼肌冰冻切片 | 第69-71页 |
| 第三章 结果与分析 | 第71-97页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第71-78页 |
| ·重组质粒pIRES2-EGFP-FABP3和pcDNA3-FABP3的菌液PCR鉴定结果 | 第71页 |
| ·重组质粒pIRES2-EGFP-FABP3和pcDNA3-FABP3的酶切鉴定结果 | 第71-73页 |
| ·重组质粒pIRES2-EGFP-FABP3和pcDNA3-FABP3的测序鉴定结果 | 第73-75页 |
| ·PiggyBac转座子重组质粒PB[FABP3,EGFP]和PB[EGFP]的菌液PCR结果 | 第75页 |
| ·PiggyBac转座子重组质粒PB[FABP3,EGFP]和PB[EGFP]的酶切鉴定结果 | 第75-76页 |
| ·PiggyBac转座子重组质粒PB[FABP3,EGFP]和PB[EGFP]的测序鉴定结果 | 第76页 |
| ·其它真核表达载体的构建结果 | 第76-78页 |
| ·转基因细胞系的建立及检测 | 第78-84页 |
| ·细胞的培养 | 第78页 |
| ·真核表达质粒瞬时转染细胞结果 | 第78-79页 |
| ·小鼠前脂肪细胞稳定表达细胞株的筛选 | 第79-80页 |
| ·稳定转染细胞株的RT-PCR检测 | 第80-81页 |
| ·稳定转染细胞株的western blot检测 | 第81页 |
| ·细胞诱导分化及油红O染色结果 | 第81页 |
| ·细胞甘油三酯含量测定结果 | 第81-82页 |
| ·FABP3上调对脂代谢相关基因表达的影响 | 第82-84页 |
| ·转基因小鼠的制备 | 第84-89页 |
| ·转座子表达质粒瞬时转染细胞结果 | 第84-85页 |
| ·显微注射方法制备转基因小鼠 | 第85页 |
| ·转基因小鼠基因组水平检测结果 | 第85-87页 |
| ·转基因小鼠RT-PCR检测结果 | 第87页 |
| ·转基因小鼠western blot检测结果 | 第87-88页 |
| ·转基因小鼠活体成像结果 | 第88-89页 |
| ·转基因小鼠相关指标的测定 | 第89-93页 |
| ·转基因小鼠体重测量结果 | 第89页 |
| ·转基因小鼠甘油三酯和游离脂肪酸测定结果 | 第89-90页 |
| ·转基因小鼠骨骼肌冰冻切片结果 | 第90页 |
| ·FABP3过表达对小鼠骨骼肌脂代谢的影响 | 第90-91页 |
| ·FABP3过表达对肝脏脂代谢的影响 | 第91-93页 |
| ·讨论与展望 | 第93-97页 |
| 第四章 结论 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 致谢 | 第115-117页 |
| 附录 | 第117-143页 |
| 作者简历 | 第143页 |
