摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
1 文献综述 | 第7-11页 |
·昆虫的先天免疫 | 第7页 |
·模式识别受体 | 第7-8页 |
·肽聚糖识别蛋白研究进展 | 第8-11页 |
·肽聚糖识别蛋白 | 第8页 |
·肽聚糖识别蛋白的结构 | 第8页 |
·肽聚糖识别蛋白的组织分布 | 第8-9页 |
·肽聚糖识别蛋白的功能 | 第9-11页 |
2 引言 | 第11-13页 |
·研究的目的及意义 | 第11页 |
·主要研究内容 | 第11-12页 |
·柞蚕模式识别受体PGRP-A基因序列的测定 | 第11页 |
·柞蚕PGRP-A基因完整ORF的原核表达 | 第11-12页 |
·技术路线 | 第12-13页 |
3 材料与方法 | 第13-24页 |
·实验材料 | 第13页 |
·仪器与试剂 | 第13-16页 |
·主要实验仪器 | 第13页 |
·主要生化试剂 | 第13-14页 |
·常用溶液的配制 | 第14-16页 |
·实验方法 | 第16-24页 |
·柞蚕组织的收集 | 第16页 |
·柞蚕总RNA的提取 | 第16页 |
·提取的总RNA的质量检测 | 第16页 |
·第一链cDNA的合成 | 第16-17页 |
·柞蚕PGRP-A基因的全长cDNAPCR扩增 | 第17-19页 |
·PCR扩增后目的产物的纯化 | 第19页 |
·目的片段的连接和转化 | 第19页 |
·柞蚕PGRP-A基因序列的拼接与分析 | 第19-20页 |
·柞蚕PGRP-A蛋白完整ORF的原核表达 | 第20-21页 |
·柞蚕PGRP-A基因全长cDNA的扩增 | 第20页 |
·原核表达载体的构建 | 第20-21页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第21页 |
·SDS-PAGE电泳分析 | 第21页 |
·Westernblotting分析 | 第21-22页 |
·重组蛋白的大量诱导及纯化 | 第22页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第22页 |
·重组蛋白的纯化 | 第22页 |
·柞蚕PGRP-A序列与氨基酸序列同源性分析和系统进化树构建 | 第22-24页 |
4 结果 | 第24-30页 |
·柞蚕总RNA的检测 | 第24页 |
·柞蚕PGRP-A基因序列的测定和分析 | 第24-25页 |
·柞蚕PGRP-A与其他昆虫PGRP的同源性分析 | 第25-26页 |
·原核表达载体的构建 | 第26-28页 |
·柞蚕PGRP-A全长ORF的扩增 | 第26-27页 |
·双酶切鉴定 | 第27-28页 |
·重组蛋白的原核表达及纯化 | 第28-29页 |
·IPTG不同浓度诱导的原核表达 | 第28页 |
·重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
·Westernblotting检测 | 第29-30页 |
5 讨论 | 第30-31页 |
·柞蚕蛹注射和柞蚕成虫注射的区别 | 第30页 |
·柞蚕PGRP-A基因全长与序列分析 | 第30页 |
·柞蚕PGRP-A的原核表达和WesternBlotting | 第30-31页 |
6 结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
个人简介 | 第37页 |
读研期间发表的论文 | 第37页 |