摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
目录 | 第10-13页 |
引言 | 第13-17页 |
第一部分 Tim-3 在脓毒血症中的表达 | 第17-31页 |
·引言 | 第17页 |
·材料与设备 | 第17-18页 |
·实验动物 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·设备 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-23页 |
·麻醉药的配置 | 第18页 |
·建立小鼠脓毒血症模型 | 第18页 |
·取小鼠腹腔灌洗液 | 第18-19页 |
·取小鼠脾淋巴细胞 | 第19页 |
·除蛋白中的内毒素 | 第19页 |
·蛋白定量(按照 BCA 蛋白定量试剂盒操作) | 第19-20页 |
·细胞总 RNA 提取步骤 | 第20页 |
·反转录步骤 | 第20-21页 |
·实时定量 PCR 步骤 | 第21页 |
·引物序列 | 第21-22页 |
·ELISA (检测依据细胞因子检测试剂盒说明书) | 第22-23页 |
·统计学处理 | 第23页 |
·结果 | 第23-29页 |
·Tim-3 在脓毒血症中的表达 | 第23-26页 |
·Tim-3 参与脓毒血症的病理过程 | 第26-29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第二部分 Tim-3 在脓毒血症中的作用机制研究(一) | 第31-41页 |
·引言 | 第31页 |
·材料与设备 | 第31-32页 |
·细胞系 | 第31页 |
·试剂 | 第31页 |
·设备 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·细胞培养 | 第32页 |
·细胞的冻存 | 第32页 |
·巨噬细胞的分选 | 第32页 |
·Tim-3 通路阻断对 CLP 脾脏巨噬细胞细胞因子影响实验 | 第32-33页 |
·腹腔巨噬细胞吞噬能力检测 | 第33页 |
·统计学处理 | 第33页 |
·结果 | 第33-37页 |
·阻断 Tim-3 通路或者 Tim-3 的低表达能增强巨噬细胞反应 | 第33-36页 |
·过表达 Tim-3 的巨噬细胞能够抑制 TLRs 诱导的促炎因子的产生 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-41页 |
第三部分 Tim-3 在脓毒血症中的作用机制研究(二) | 第41-51页 |
·引言 | 第41页 |
·材料 | 第41页 |
·实验动物 | 第41页 |
·试剂 | 第41页 |
·设备 | 第41页 |
·方法 | 第41-43页 |
·内毒素血症模型的构建 | 第41-42页 |
·小鼠的饲养和繁殖 | 第42页 |
·小鼠尾部基因组 DNA 的提取 | 第42-43页 |
·PCR 反应 | 第43页 |
·琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第43页 |
·结果 | 第43-48页 |
·TLR4 参与了 Tim-3 介导的反应 | 第43-45页 |
·Tim-3 能够通过抑制 TLR4 反应,维持机体的免疫自稳 | 第45-46页 |
·小鼠的繁殖情况及其基因型鉴定结果 | 第46-47页 |
·阻断 TLR4-KO 小鼠上 Tim-3 通路不能明显影响脓毒血症的病理过程 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
综述 | 第53-60页 |
参考文献 | 第57-60页 |
硕士期间获得成果 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-65页 |
发表文章 | 第65-80页 |