| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩写名词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·研究进展 | 第12-15页 |
| ·MAPK级联途径 | 第12-15页 |
| ·MAPK级联途径的组成 | 第12-13页 |
| ·植物体中MAPKKKs研究进展 | 第13页 |
| ·植物体中MAPKs研究进展 | 第13-14页 |
| ·MAPKKs的研究进展 | 第14-15页 |
| ·miRNAs及miRNAs的靶基因模拟 | 第15-18页 |
| ·miRNAs的发现 | 第15页 |
| ·miRNAs的合成 | 第15-16页 |
| ·miRNAs功能研究 | 第16-17页 |
| ·miRNAs功能研究方法进展 | 第17页 |
| ·miRNAs靶模拟的作用机制 | 第17页 |
| ·基因模拟在拟南芥miRNAs功能验证上的应用 | 第17-18页 |
| ·GATEWAY技术构建表达载体的原理 | 第18页 |
| ·研究目的 | 第18-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-32页 |
| ·水稻材料 | 第20页 |
| ·菌株、载体和感受态细胞 | 第20页 |
| ·试剂及常用仪器 | 第20页 |
| ·MIRNAs靶模拟基因克隆 | 第20-24页 |
| ·PCR扩增OsIPS1基因序列 | 第20-22页 |
| ·构建OsPS1的T载体 | 第22页 |
| ·PCR扩增miRNAs靶模拟基因 | 第22-24页 |
| ·遗传转化载体的构建和转化 | 第24-26页 |
| ·Gateway技术构建超表达载体 | 第24-25页 |
| ·遗传转化 | 第25-26页 |
| ·构建OsMKK进化树 | 第26页 |
| ·OsMKK芯片表达谱 | 第26-27页 |
| ·CTAB法提取植物基因组DNA | 第27-28页 |
| ·CTAB大样法抽提DNA及SOUTHERN BLOT分析 | 第28页 |
| ·CTAB大样法抽提DNA | 第28页 |
| ·Southern blot | 第28页 |
| ·RNA抽提 | 第28-29页 |
| ·RNA反转录 | 第29-30页 |
| ·表达量分析 | 第30页 |
| ·OsMKK基因功能初步鉴定 | 第30-32页 |
| ·OsMKK在非生物逆境下的表达量分析 | 第30页 |
| ·OsMKK转基因植株芽期逆境胁迫 | 第30-31页 |
| ·OsMKK转基因水稻甘露醇模拟干旱实验 | 第30-31页 |
| ·OsMKK转基因水稻耐盐性实验 | 第31页 |
| ·OsMKK转基因水稻水稻芽期ABA敏感性实验 | 第31页 |
| ·OsMKK转基因植株PEG干旱模拟 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·OsMKK家族的进化树 | 第32页 |
| ·OsMKK基因芯片表达谱分析 | 第32-33页 |
| ·OsMKK基因在激素处理后的表达分析 | 第33-34页 |
| ·OsMKK转基因植株在非生物逆境下的分析 | 第34-35页 |
| ·OsMKK转基因植株拷贝数和表达量的检测 | 第35-37页 |
| ·OsMKK转基因植株拷贝数检测 | 第35-36页 |
| ·OsMKK转基因植株表达量检测 | 第36-37页 |
| ·OsMKK转基因植株芽期抗逆实验 | 第37-40页 |
| ·OsMKK转基因植株芽期甘露醇胁迫分析 | 第37-39页 |
| ·OsMKK转基因水稻芽期盐胁迫分析 | 第39页 |
| ·OsMKK转基因植株对ABA敏感性分析 | 第39-40页 |
| ·OsMKK转基因水稻苗期PEG干旱模拟实验 | 第40-42页 |
| ·可能与抗旱相关的MIRNAs的筛选 | 第42-44页 |
| ·靶模拟基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·OsIPS1基因克隆 | 第44页 |
| ·MIM1862的克隆 | 第44-46页 |
| ·遗传转化载体的构建和转化 | 第46-48页 |
| ·遗传转化载体的构建 | 第46页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| ·OsMKK5可能与花器官发育有关 | 第48页 |
| ·OsMKK1和OsMKK3可能是与抗旱有关的基因 | 第48页 |
| ·OsMKK能够参与多种非生物胁迫 | 第48-49页 |
| ·OsMKK4与抗病性相关 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录PROTOCOLS | 第57-69页 |