| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 一、文献综述 | 第8-16页 |
| 1、猪流行性腹泻诊断方法的研究进展 | 第8-16页 |
| ·PED的主要诊断方法 | 第9-10页 |
| ·流行病学诊断 | 第9-10页 |
| ·临床及病理诊断 | 第10页 |
| ·实验室诊断 | 第10-16页 |
| ·病原学诊断 | 第10-11页 |
| ·病毒的分离、鉴定 | 第10-11页 |
| ·免疫电镜法(IEM) | 第11页 |
| ·血清学诊断 | 第11-13页 |
| ·免疫荧光法 | 第11-12页 |
| ·微量血清中和试验 | 第12页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA法) | 第12-13页 |
| ·分子生物学技术诊断 | 第13-16页 |
| ·荧光定量PCR | 第14-15页 |
| ·原位PCR法(insitu-PCR) | 第15页 |
| ·巢式PCR法(nested-PCR) | 第15-16页 |
| 二、仔猪流行性腹泻的诊断 | 第16-30页 |
| 1、引言 | 第16页 |
| 2、材料与方法 | 第16-24页 |
| ·试验相关材料 | 第16-18页 |
| ·病料来源 | 第16页 |
| ·相关仪器设备及试验相关试剂 | 第16-18页 |
| ·相关溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-24页 |
| ·细菌的分离 | 第19页 |
| ·寄生虫虫卵检查 | 第19-20页 |
| ·直接涂片法 | 第19页 |
| ·漂浮法 | 第19页 |
| ·沉淀法 | 第19-20页 |
| ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第20-21页 |
| ·病料的处理 | 第20页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第20页 |
| ·cDNA的合成 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR反应 | 第21页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
| ·目的基因的回收及序列测定 | 第21页 |
| ·PEDV的RT-PCR反应条件的优化 | 第21-22页 |
| ·PEDV RT-PCR反应中各成份最佳浓度的确定 | 第21页 |
| ·PEDV RT-PCR最佳退火温度的确定 | 第21-22页 |
| ·最佳反应条件RT-PCR方法检测PEDV | 第22页 |
| ·PEDV RT-PCR对TGEV、RV特异性检测及病料中TGEV、RV检测 | 第22页 |
| ·间接酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第22-24页 |
| ·待检样品的处理 | 第22-23页 |
| ·冲洗包被板 | 第23页 |
| ·包被抗体与封闭 | 第23页 |
| ·加样品 | 第23页 |
| ·加酶标记抗体 | 第23页 |
| ·加底物溶液 | 第23-24页 |
| ·终止反应 | 第24页 |
| ·结果判定 | 第24页 |
| 3、结果 | 第24-30页 |
| ·细菌分离结果 | 第24页 |
| ·寄生虫检查结果 | 第24页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第24-25页 |
| ·PEDV的RT-PCR反应条件的优化 | 第25-30页 |
| ·PEDV RT-PCR反应中各成份最佳浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·PEDV RT-PCR最佳退火温度的初步确定 | 第26-27页 |
| ·最佳反应条件RT-PCR方法检测PEDV | 第27-28页 |
| ·PEDV RT-PCR对TGEV、RV特异性检测及病料中TGEV、RV检测 | 第28页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第28-30页 |
| 三、分析与讨论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-35页 |
| 附录 | 第35-38页 |
| 致谢 | 第38页 |
