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小麦盐胁迫应答相关基因TaERF5的功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-20页
   ·小麦盐胁迫研究进展第13-16页
     ·世界土地盐渍化现状第13页
     ·植物盐胁迫研究进展第13-14页
     ·ERF 转录因子第14-15页
     ·ERF 转录因子在代谢、发育中的调控作用第15页
     ·ERF 转录因子在盐胁迫应答中的作用第15-16页
   ·基因的功能研究第16-18页
     ·基因的单体型研究第16-17页
     ·基于单体型的关联分析第17页
     ·连锁分析及其与关联分析的整合第17页
     ·功能标记的运用第17-18页
   ·研究的目的意义和技术路线第18-20页
     ·研究的目的意义第18-19页
     ·技术路线第19-20页
第二章 材料与方法第20-34页
   ·材料第20-21页
     ·小麦材料第20页
     ·水稻材料第20页
     ·载体第20页
     ·酶及其它试剂第20-21页
     ·试剂盒第21页
     ·引物第21页
   ·方法第21-34页
     ·小麦全长 cDNA 文库筛选第21页
     ·小麦基因组 DNA 提取第21-22页
     ·小麦不同组织总 RNA 的提取第22页
     ·cDNA 第一链的合成第22-23页
       ·总 RNA 中 DNA 的消化处理第22-23页
       ·cDNA 第一链合成第23页
     ·普通小麦 TaERF5 基因的克隆第23-24页
       ·引物设计第23-24页
       ·PCR 扩增第24页
     ·产物克隆转化和测序第24-26页
       ·PCR 产物纯化第24页
       ·PCR 产物的连接与转化第24-25页
       ·重组质粒的提取第25页
       ·DNA 测序第25-26页
     ·染色体定位第26页
     ·序列生物信息学分析第26页
     ·TaERF5 的亚细胞定位第26-27页
       ·目标基因的瞬时表达载体的构建第26-27页
       ·基因枪轰击洋葱的表皮第27页
     ·TaERF5 的组织表达分析第27-28页
     ·TaERF5 功能标记的开发及遗传作图第28-29页
       ·单体型确定第28-29页
       ·TaERF5 的功能标记开发和遗传作图第29页
     ·TaERF5 单体型与性状的关联第29-30页
     ·TaERF5 基因的遗传转化第30-32页
       ·双元载体构建第30页
       ·农杆菌介导的遗传转化第30-31页
       ·转基因 T0 代单株的基因型鉴定第31页
       ·转基因 T1 代株系的盐胁迫鉴定和基因型鉴定第31-32页
     ·短期及长期盐胁迫下 TaERF5 在小麦材料中的表达第32页
       ·短期盐胁迫处理第32页
       ·长期盐胁迫处理第32页
     ·不同胁迫条件下 TaERF5 在小麦材料中的表达第32-34页
第三章 实验结果第34-48页
   ·小麦 TaERF5 基因的克隆与序列分析第34-38页
     ·小麦 ERF 转录因子序列的获得第34页
     ·小麦 TaERF5 基因的克隆与染色体定位第34-35页
     ·小麦 TaERF5 基因的生物信息学分析第35-37页
     ·小麦 TaERF5 基因的系统进化分析第37-38页
   ·小麦 TaERF5 的亚细胞定位第38-39页
   ·TaERF5 在小麦植株中的表达分析第39页
   ·小麦 TaERF5 基因的单体型及进化分析第39-41页
   ·小麦 TaERF5-B 功能标记的开发及遗传作图第41页
   ·小麦 TaERF5-B 基因单体型的分布特点及其与农艺性状的关系第41-44页
   ·TaERF5 基因的遗传转化第44-45页
     ·T0 代转基因水稻的测序验证第44页
     ·T1 代转基因水稻的性状与基因共分离验证第44-45页
   ·TaERF5 在非生物胁迫及激素处理下的表达情况第45-46页
   ·小麦材料长期盐胁迫处理结果第46-48页
第四章 讨论第48-52页
   ·TaERF5 是一个新的多效性基因第48-49页
   ·TaERF5-B 经历了选择效应第49-50页
   ·TaERF5-B 可能的作用机制第50-51页
   ·Gateway 技术构建载体的优势及模式植物水稻在基因功能研究中的应用第51-52页
第五章 全文结论第52-53页
参考文献第53-61页
附录第61-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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