| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词对照表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-29页 |
| 一、Rubisco的研究进展 | 第15-20页 |
| ·Rubisco的结构 | 第15-17页 |
| ·Rubisco的组装及亚基的功能 | 第17-19页 |
| ·Rubisco酶的活化、催化及其调节作用 | 第19-20页 |
| 二、植物体内的蛋白水解酶 | 第20-24页 |
| ·植物体内蛋白水解酶的类型 | 第21页 |
| ·植物体内蛋白水解酶的定位 | 第21-22页 |
| ·内肽酶的研究技术和方法 | 第22-24页 |
| 三、Rubisco的降解及其与蛋白水解酶的关系 | 第24-29页 |
| ·Rubisco的降解与活性氧 | 第24页 |
| ·Rubisco的降解与蛋白水解酶 | 第24-29页 |
| ·降解Rubisco的蛋白水解酶 | 第24-25页 |
| ·蛋白水解酶降解Rubisco的途径 | 第25-29页 |
| 第一章 与Rubisco大亚基降解相关的蛋白酶的生化特性 | 第29-37页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| ·小麦品种及其培养 | 第29页 |
| ·仪器与试剂 | 第29页 |
| ·粗酶液提取 | 第29-30页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第30页 |
| ·天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30页 |
| ·电泳后切胶回收Rubisco | 第30页 |
| ·十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30页 |
| ·考马斯亮蓝R-250染色与脱色 | 第30-31页 |
| ·不同温度下,Rubisco大亚基的降解 | 第31页 |
| ·不同浓度的ATP对Rubisco大亚基降解的影响 | 第31页 |
| ·降解LSU为51KD的蛋白酶在时间上的表达特性 | 第31页 |
| ·幼嫩叶片中Rubisco的降解情况 | 第31页 |
| ·幼嫩叶中LSU降解作用是蛋白酶作用的检验 | 第31页 |
| ·其他小麦品种中Rubisco大亚基的降解情况 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-35页 |
| ·不同温度下切胶回收得到的Rubisco的降解情况 | 第32页 |
| ·不同浓度的ATP对Rubisco大亚基降解的影响 | 第32-33页 |
| ·降解LSU为51KD的蛋白酶在时间上的表达特性 | 第33-34页 |
| ·幼嫩叶片中Rubisco的降解情况 | 第33-34页 |
| ·幼嫩叶中LSU降解为51KD是蛋白酶作用的检验 | 第34页 |
| ·其他小麦品种中Rubisco大亚基的降解情况 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第二章 与Rubisco大亚基降解相关的蛋白酶合成的细胞定位 | 第37-47页 |
| 1 材料与方法 | 第37-40页 |
| ·小麦品种及其培养 | 第37页 |
| ·仪器与试剂 | 第37页 |
| ·抑制剂对小麦叶片进行处理 | 第37-38页 |
| ·粗酶液提取和蛋白含量测定 | 第38页 |
| ·天然梯度凝胶电泳 | 第38页 |
| ·电泳后切胶回收Rubisco | 第38页 |
| ·SDS-PAGE | 第38页 |
| ·考马斯亮蓝R-250染色法 | 第38页 |
| ·蛋白酶荧光底物检测蛋白酶活性 | 第38页 |
| ·不同浓度的两种抑制剂处理下Rubisco大亚基的降解情况 | 第38-39页 |
| ·pH7.5条件下不同抑制剂处理对该蛋白酶合成的抑制作用 | 第39页 |
| ·两种不同抑制剂其等量混合液处理下Rubisco大亚基的降解情况 | 第39页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理叶片中与Rubisco结合的蛋白酶活性荧光定量分析 | 第39页 |
| ·不同抑制剂处理暗处叶片不同时间后Rubisco大亚基的降解情况 | 第39页 |
| ·pH5.5条件下不同抑制剂处理对该蛋白酶合成的抑制作用 | 第39-40页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理叶片对Rubisco大亚基降解情况的影响 | 第39页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理作用下与Rubisco结合的蛋白酶的荧光定量分析 | 第39-40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-44页 |
| ·不同浓度的两种抑制剂下,Rubisco大亚基的降解情况 | 第40页 |
| ·pH7.5条件下,两种不同抑制剂对该蛋白酶合成的抑制作用 | 第40-43页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理下Rubisco大亚基的降解情况 | 第40-41页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理的叶片中与Rubisco结合的蛋白酶活性的荧光定量分析 | 第41-42页 |
| ·抑制剂暗处处理叶片不同时间后Rubisco大亚基的降解情况 | 第42-43页 |
| ·pH5.5条件下不同抑制剂对该蛋白酶合成的抑制作用 | 第43-44页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理下Rubisco大亚基的降解 | 第43页 |
| ·两种不同抑制剂及其等量混合液处理叶片中与Rubisco结合的蛋白酶蛋活性的荧光定量分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 分离纯化结合Rubisco并降解大亚基的蛋白酶 | 第47-61页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| ·小麦品种及其培养 | 第47页 |
| ·仪器与试剂 | 第47页 |
| ·粗酶液提取和蛋白含量测定 | 第47页 |
| ·天然梯度凝胶电泳 | 第47页 |
| ·电泳后切胶回收Rubisco | 第47-48页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE | 第48页 |
| ·非完全变性SDS-PAGE | 第48页 |
| ·Gel-SDS-PAGE | 第48页 |
| ·蛋白及蛋白酶染色方法 | 第48-49页 |
| ·氨基黑染色法 | 第48页 |
| ·银染方法 | 第48页 |
| ·考马斯亮蓝R-250染色法 | 第48-49页 |
| ·强阴离子交换层析分离结合Rubisco且降解LSU的蛋白酶 | 第49页 |
| ·mono-Q强阴离子交换层析 | 第49页 |
| ·用SDS-PAGE法和荧光分光光度计法对主峰组份进行检测 | 第49页 |
| ·对强阴离子交换层析中其他它峰的组份进行检测 | 第49页 |
| ·非完全变性SDS-PAGE分离纯化结合Rubisco并降解大亚基的蛋白酶 | 第49-51页 |
| ·不同浓度的SDS对Rubisco大亚基降解的影响 | 第49-50页 |
| ·切胶回收大亚基所得样品的降解情况及其荧光测定 | 第50页 |
| ·Rubisco切胶回收酶液中小亚基及大小亚基之外的成分对大亚基降解的影响 | 第50页 |
| ·Rubisco切胶回收酶液进行SDS-PAGE时分离开的该蛋白酶在凝胶中的位置 | 第50页 |
| ·冬季时,切胶回收的Rubisco全酶样品中该蛋白酶的降解作用 | 第50页 |
| ·银染法检测切胶回收的Rubisco全酶样品中该蛋白酶的含量 | 第50-51页 |
| ·切胶回收的Rubisco全酶样品中蛋白酶活性的检测 | 第51页 |
| ·不同生长时期的小麦叶片中蛋白酶活性的检测 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-59页 |
| ·强阴离子交换层析分离结合Rubisco且降解LSU的蛋白酶 | 第51-54页 |
| ·Rubisco切胶回收样的mono-Q强阴离子交换层析 | 第51-52页 |
| ·用SDS-PAGE法和荧光分光光度计法对主峰组份进行检测 | 第52-53页 |
| ·对强阴离子交换层析中其它蛋白峰的成分进行检测 | 第53-54页 |
| ·非完全变性SDS-PAGE分离结合Rubisco且降解LSU的蛋白酶 | 第54-59页 |
| ·不同浓度的SDS对Rubisco大亚基降解的影响 | 第54页 |
| ·切胶回收大亚基所得样品的降解情况及其荧光测定 | 第54-55页 |
| ·Rubisco切胶回收酶液中小亚基及大小亚基之外的成分对大亚基降解的影响 | 第55-56页 |
| ·Rubisco切胶回收酶液进行SDS-PAGE时分离开的该蛋白酶在凝胶中的位置 | 第56-57页 |
| ·冬季时，切胶回收的Rubisco全酶样品中该蛋白酶的降解作用 | 第57页 |
| ·切胶回收的Rubisco全酶样品中蛋白酶活性的检测 | 第57-58页 |
| ·不同生长时期的叶片中紧密结合Rubisco且分子量比大亚基大的蛋白酶活性的检测 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 全文结论 | 第61-63页 |
| 创新之处 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
