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猪嗜血支原体PCR和ELISA抗体检测方法的建立与应用

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 猪嗜血支原体的研究进展第11-31页
 1 猪嗜血支原体的病原学第11-17页
   ·起源与分类地位第11-12页
   ·形态及理化特性第12-14页
   ·分子生物学特点第14-16页
   ·与宿主的相互作用及宿主的免疫机制第16-17页
 2 猪嗜血支原体的流行病学第17-18页
 3 猪嗜血支原体病的临床症状和病理变化第18页
 4 猪嗜血支原体的检测方法第18-22页
   ·形态学检测第18-19页
   ·血清学检测第19-21页
   ·分子生物学检测第21-22页
   ·动物试验第22页
 5 猪嗜血支原体病的防治第22-24页
   ·预防第22-23页
   ·治疗第23-24页
 参考文献第24-31页
第二章 猪嗜血支原体PCR及与荧光定量PCR检测方法的建立和比较第31-49页
 摘要第31-32页
 1 材料和方法第32-38页
   ·病料来源第32页
   ·试剂、菌株和毒株第32页
   ·引物及探针第32-33页
   ·猪嗜血支原体16S rRNA重组质粒的构建第33-36页
   ·PCR检测方法的建立第36-37页
   ·FQ-PCR检测方法的建立第37-38页
   ·两种方法对临床样品检测的比较第38页
 2 结果第38-45页
   ·标准阳性质粒的构建第38-40页
   ·PCR方法的建立第40-43页
   ·FQ-PCR方法的建立第43-45页
   ·两种方法对临床样品检测的比较第45页
 3 讨论第45-47页
 参考文献第47-48页
 ABSTRACT第48-49页
第三章 猪嗜血支原体MSG1蛋白单克隆抗体的制各及鉴定第49-65页
 摘要第49-50页
 1 材料与方法第50-57页
   ·菌株、细胞、实验动物第50页
   ·主要试剂第50页
   ·抗原蛋白和检测蛋白的制备第50-51页
   ·动物免疫第51页
   ·间接ELISA方法检测多抗效价第51-52页
   ·单克隆抗体的制备第52-54页
   ·单克隆抗体的鉴定第54-57页
 2 结果第57-60页
   ·抗原蛋白制备及纯化第57页
   ·杂交瘤细胞株的筛选第57-58页
   ·MAb的特异性鉴定第58页
   ·单抗的Ig型鉴定第58-59页
   ·单抗的抗原位点分析第59页
   ·间接免疫荧光试验第59-60页
   ·杂交瘤细胞株分泌MAb的稳定性鉴定第60页
 3 讨论第60-62页
 参考文献第62-63页
 ABSTRACT第63-65页
第四章 猪嗜血支原体阻断ELISA检测方法的建立和应用第65-81页
 摘要第65-66页
 1 材料与方法第66-69页
   ·试剂、菌株、细胞及血清第66页
   ·抗原蛋白的制备第66页
   ·单克隆抗体的纯化及辣根过氧化酶(HRP)标记第66页
   ·阻断ELISA术式第66-67页
   ·阻断ELISA最佳反应条件的选择第67-68页
   ·阻断ELISA临界值的确定第68页
   ·阻断ELISA的重复性试验第68页
   ·阻断ELISA的敏感性试验第68页
   ·阻断ELISA特异性试验第68-69页
   ·临床血清样品的检测第69页
 2 结果第69-77页
   ·单克隆抗体的纯化和HRP标记第69页
   ·阻断ELISA最佳反应条件的选择第69-74页
   ·阻断ELISA临界值的确定第74页
   ·阻断ELISA的重复性试验第74-75页
   ·阻断ELISA的敏感性试验第75页
   ·阻断ELISA特异性试验第75-76页
   ·临床血清样品的检测第76-77页
 3 讨论第77-78页
 参考文献第78-80页
 ABSTRACT第80-81页
全文总结第81-83页
致谢第83-85页
攻读硕士学位期间发表论文第85-87页
附录第87-92页

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