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猪TTV2ORF1基因的原核表达以及间接ELISA检测方法的建立

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 文献综述第11-25页
 1 引言第11页
 2 病原学第11-14页
   ·猪TTV的分类与理化性质第11页
   ·猪TTV的基因型第11-12页
   ·猪TTV的基因组结构与特征第12-14页
 3 TTV的流行病学调查第14-19页
   ·流行范围第14-16页
   ·不同猪群流行情况第16-17页
   ·传播方式第17-18页
   ·致病性第18-19页
 4 TTV的检测方法第19-20页
 5 目的和意义第20-21页
 参考文献第21-25页
第二章 猪TTV2 ORF1基因的原核表达及多克隆抗体的制备第25-53页
 摘要第25页
   ·材料第25-26页
     ·载体和菌株第25页
     ·主要试剂与仪器第25-26页
     ·实验动物第26页
   ·方法第26-33页
     ·目的基因的克隆第26-27页
     ·重组质粒pMD18-T-g1和pMD18-T-g2的构建与鉴定第27-29页
     ·重组表达质粒pcold-g1和pcold-g2的构建与鉴定第29-30页
     ·重组蛋白的诱导表达第30-31页
     ·重组蛋白的纯化第31-32页
     ·Western blot检测第32-33页
     ·多克隆抗体的制备第33页
   ·实验结果第33-48页
     ·目的片段的扩增第33-34页
     ·克隆载体的酶切鉴定结果第34-35页
     ·重组表达质粒的酶切鉴定结果第35-36页
     ·重组蛋白的诱导表达结果第36-37页
     ·表达条件的优化第37-41页
     ·重组蛋白的可溶性检测结果第41-43页
     ·重组蛋白的纯化结果第43-44页
     ·Western blot检测第44-47页
     ·多克隆抗体制备第47-48页
   ·讨论第48-50页
 参考文献第50-51页
 ABSTRACT第51-53页
第三章 猪TTV2间接ELISA检测方法的建立第53-71页
 摘要第53页
   ·材料第53-54页
     ·抗原第53页
     ·血清及酶标抗体第53-54页
     ·主要试剂与仪器第54页
   ·方法第54-58页
     ·间接ELISA检测方法的操作步骤第54页
     ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定第54-55页
     ·抗原包被条件的确定第55页
     ·封闭条件的确定第55-56页
     ·抗原抗体反应条件的确定第56-57页
     ·临界值的确定第57页
     ·特异性试验第57页
     ·重复性试验第57页
     ·临床样品的检测第57-58页
   ·结果第58-66页
     ·抗原最佳包被浓度和抗体最佳稀释度的确定第58页
     ·抗原包被条件的确定第58-60页
     ·封闭条件的确定第60-61页
     ·抗原抗体反应条件的确定第61-64页
     ·间接ELISA临界值的确定第64-65页
     ·特异性试验第65页
     ·重复性试验第65-66页
     ·临床样品的检测第66页
   ·讨论第66-68页
 参考文献第68-69页
 ABSTRACT第69-71页
全文总结第71-73页
附录 常用试剂的配制第73-77页
致谢第77页

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