结核亚单位疫苗EAMMB的构建及表达纯化
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 縮略词表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 1. 材料和方法 | 第12-27页 |
| ·材料 | 第12-16页 |
| ·材料 | 第12页 |
| ·仪器设备 | 第12-13页 |
| ·引物设计与合成 | 第13页 |
| ·主要试剂及配方 | 第13-16页 |
| ·方法 | 第16-27页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| ·BCG DNA基因组提取 | 第17页 |
| ·目的基因的扩增 | 第17-18页 |
| ·质粒提取 | 第18页 |
| ·质粒和PCR产物双酶切鉴定及纯化 | 第18-20页 |
| ·连接体系的建立 | 第20页 |
| ·转化 | 第20-21页 |
| ·菌落PCR验证及双酶切验证 | 第21页 |
| ·BL21(DE3)转化 | 第21-22页 |
| ·蛋白表达及可溶性分析 | 第22-23页 |
| ·融合蛋白EAMMB纯化 | 第23-25页 |
| ·蛋白HBHAd纯化 | 第25页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第25-27页 |
| 2. 结果 | 第27-34页 |
| ·hbha基因的扩增 | 第27页 |
| ·质粒pET30a-EAMM提取和酶切 | 第27-28页 |
| ·质粒pET30a-EAMMB双酶切图 | 第28页 |
| ·质粒pET30a提取和酶切 | 第28页 |
| ·质粒pET30a-HBHAd双酶切图 | 第28-29页 |
| ·测序结果图 | 第29-30页 |
| ·融合蛋白EAMMB表达条件摸索 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白EAMMB纯化条件摸索 | 第31-32页 |
| ·洗涤次数的摸索 | 第31-32页 |
| ·硫酸铵沉淀条件摸索 | 第32页 |
| ·EAMMB纯化结果 | 第32页 |
| ·带His标签蛋白HBHAd纯化 | 第32-34页 |
| ·咪唑洗脱浓度的摸索 | 第32-33页 |
| ·带标签蛋白HBHAd纯化结果 | 第33-34页 |
| 3. 讨论与结论 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 综述 | 第39-45页 |
| 摘要 | 第39页 |
| 1. 我国结核病现状 | 第39页 |
| 2. HBHA蛋白特性 | 第39-41页 |
| ·蛋白结构特点 | 第39-40页 |
| ·分布特性 | 第40页 |
| ·免疫学特性 | 第40-41页 |
| 3. HBHA在疫苗研制和结核病诊断中的研究进展 | 第41页 |
| 4. 展望 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 在学期间研究成果 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
