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精神分裂症相关蛋白dysbindin-1在神经发育中的作用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第1章 绪论(精神分裂症相关蛋白dysbindin-1研究进展)第12-26页
   ·引言第12页
   ·精神分裂症概述第12页
   ·精神分裂与遗传因素第12-15页
   ·精神分裂症发病机制的研究第15-17页
     ·精神分裂症发病与神经递质系统第15-16页
     ·精神分裂症发病与神经发育第16-17页
   ·精神分裂症发病相关蛋白dysbindin-1的研究进展第17-22页
     ·DTNBP1基因及其编码蛋白dysbindin-1简介第17-18页
     ·DTNBP1与精神分裂症发病的关系第18-19页
     ·Dysbindin-1在脑中的表达以及其亚细胞定位研究第19-20页
     ·Dysbindin-1的功能研究进展第20-22页
   ·p53对神经元发育的影响第22-26页
第2章 材料与方法第26-46页
   ·相关质粒构建第26-32页
     ·聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)第26页
     ·琼脂糖凝胶电泳第26-27页
     ·从琼脂糖凝胶上回收DNA片段第27页
     ·质粒DNA或DNA片段的限制内切性酶酶切第27页
     ·DNA片段的连接反应(TaKaRa DNA Ligation Kit)第27页
     ·大肠杆菌(JM109和BL21(DE3))化学感受态细胞的制备第27-28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第28页
     ·大肠杆菌质粒DNA小量抽提第28-29页
     ·基于PCR的DNA定点突变(TaKaRa MutanBEST Kit)第29-30页
     ·本论文所需质粒的构建第30-32页
   ·酵母双杂交筛选以及酵母生长检测第32页
   ·体外结合实验第32-33页
     ·重组蛋白质在大肠杆菌中的诱导表达第32-33页
     ·GST Pull-down第33页
   ·细胞培养第33-34页
   ·动物实验第34页
   ·原代神经元的分离以及培养第34页
   ·细胞转染(脂质体转染法)第34-35页
   ·免疫共沉淀(Co-immunocipitation,Co-IP)第35-36页
   ·蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第36-38页
   ·Western Blot第38-39页
   ·免疫细胞化学第39页
   ·RNA干扰第39-40页
   ·药物处理第40页
   ·RNA抽提和RT-PCR检测第40-42页
   ·细胞分化实验以及突起生长检测第42页
   ·报告基因活性的检测(以24孔板为例)第42-43页
   ·MTT法检测活细胞(以24孔板为例)第43-44页
   ·数据分析第44-46页
第3章 结果与讨论第46-72页
   ·引言第46页
   ·Necdin与dysbindin-1的结合鉴定第46-48页
   ·Dysbindin-1改变necdin的定位并影响p53的转录活性第48-54页
   ·Dysbindin-1的97-118位氨基酸序列参与调节necdin第54-58页
   ·Dysbindin-1通过调节p53下游基因产物影响分化细胞突起生长第58-62页
   ·在体水平上dysbidnin-1对突起生长调节的研究第62-66页
   ·讨论第66-69页
   ·总结与展望第69-72页
     ·总结第69-71页
     ·展望第71-72页
参考文献第72-78页
致谢第78-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80页

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