摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第1章 绪论(精神分裂症相关蛋白dysbindin-1研究进展) | 第12-26页 |
·引言 | 第12页 |
·精神分裂症概述 | 第12页 |
·精神分裂与遗传因素 | 第12-15页 |
·精神分裂症发病机制的研究 | 第15-17页 |
·精神分裂症发病与神经递质系统 | 第15-16页 |
·精神分裂症发病与神经发育 | 第16-17页 |
·精神分裂症发病相关蛋白dysbindin-1的研究进展 | 第17-22页 |
·DTNBP1基因及其编码蛋白dysbindin-1简介 | 第17-18页 |
·DTNBP1与精神分裂症发病的关系 | 第18-19页 |
·Dysbindin-1在脑中的表达以及其亚细胞定位研究 | 第19-20页 |
·Dysbindin-1的功能研究进展 | 第20-22页 |
·p53对神经元发育的影响 | 第22-26页 |
第2章 材料与方法 | 第26-46页 |
·相关质粒构建 | 第26-32页 |
·聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第26页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
·从琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第27页 |
·质粒DNA或DNA片段的限制内切性酶酶切 | 第27页 |
·DNA片段的连接反应(TaKaRa DNA Ligation Kit) | 第27页 |
·大肠杆菌(JM109和BL21(DE3))化学感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第28页 |
·大肠杆菌质粒DNA小量抽提 | 第28-29页 |
·基于PCR的DNA定点突变(TaKaRa MutanBEST Kit) | 第29-30页 |
·本论文所需质粒的构建 | 第30-32页 |
·酵母双杂交筛选以及酵母生长检测 | 第32页 |
·体外结合实验 | 第32-33页 |
·重组蛋白质在大肠杆菌中的诱导表达 | 第32-33页 |
·GST Pull-down | 第33页 |
·细胞培养 | 第33-34页 |
·动物实验 | 第34页 |
·原代神经元的分离以及培养 | 第34页 |
·细胞转染(脂质体转染法) | 第34-35页 |
·免疫共沉淀(Co-immunocipitation,Co-IP) | 第35-36页 |
·蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第36-38页 |
·Western Blot | 第38-39页 |
·免疫细胞化学 | 第39页 |
·RNA干扰 | 第39-40页 |
·药物处理 | 第40页 |
·RNA抽提和RT-PCR检测 | 第40-42页 |
·细胞分化实验以及突起生长检测 | 第42页 |
·报告基因活性的检测(以24孔板为例) | 第42-43页 |
·MTT法检测活细胞(以24孔板为例) | 第43-44页 |
·数据分析 | 第44-46页 |
第3章 结果与讨论 | 第46-72页 |
·引言 | 第46页 |
·Necdin与dysbindin-1的结合鉴定 | 第46-48页 |
·Dysbindin-1改变necdin的定位并影响p53的转录活性 | 第48-54页 |
·Dysbindin-1的97-118位氨基酸序列参与调节necdin | 第54-58页 |
·Dysbindin-1通过调节p53下游基因产物影响分化细胞突起生长 | 第58-62页 |
·在体水平上dysbidnin-1对突起生长调节的研究 | 第62-66页 |
·讨论 | 第66-69页 |
·总结与展望 | 第69-72页 |
·总结 | 第69-71页 |
·展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第80页 |