| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 绪论 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| ·柯萨奇病毒、副流感病毒的研究进展 | 第15-18页 |
| ·柯萨奇病毒、副流感病毒的特性 | 第15-16页 |
| ·柯萨奇病毒、副流感病毒的分型、基因组成及复制 | 第16-18页 |
| ·柯萨奇病毒、副流感病毒的流行病学及致病性 | 第18-21页 |
| ·柯萨奇病毒的流行病学及致病性 | 第18-19页 |
| ·副流感病毒的流行病学及致病性 | 第19-21页 |
| ·柯萨奇、副流感病毒引起呼吸系统疾病的发病机制 | 第21-25页 |
| ·急性上呼吸道感染、急性气管-支气管炎 | 第21-23页 |
| ·病毒性肺炎 | 第23-24页 |
| ·支气管哮喘 | 第24页 |
| ·慢性阻塞性肺病 | 第24-25页 |
| ·目前对于呼吸系统感染病毒的诊断方法 | 第25-27页 |
| ·病毒培养方法 | 第25-26页 |
| ·非培养技术检测病毒 | 第26-27页 |
| ·套式 PCR 简介 | 第27页 |
| ·套式 PCR 定义 | 第27页 |
| ·套式 PCR 的操作过程 | 第27页 |
| ·基因芯片技术的简介 | 第27-31页 |
| ·目前基因芯片主要分类 | 第28-29页 |
| ·基因芯片制备全过程 | 第29页 |
| ·基因芯片的应用 | 第29-31页 |
| 第二章 柯萨奇、副流感病毒序列分析及芯片探针的设计 | 第31-42页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·菌株及质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第31页 |
| ·设计用软件 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·各种溶液 | 第32页 |
| ·方法及步骤 | 第32-36页 |
| ·CV 与 PIV 基因的基因序列比对及人工合成 | 第32页 |
| ·CV-A16、CV-A7 与 PIV-1 基因扩增引物的设计 | 第32-33页 |
| ·CV-A16、CV-A7 与 PIV-1 基因芯片检测用引物和探针的设计 | 第33页 |
| ·阳性坐标探针、阳性靶标的设计 | 第33页 |
| ·设计原则 | 第33-34页 |
| ·探针的稀释和定量 | 第34页 |
| ·含目的基因的质粒的扩增及提取 | 第34-35页 |
| ·CV-A16 型保守序列、CV-A7 型 VP3 基因及 PIV-1 型 HN 基因的鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的浓度测定 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·CV-A16 保守序列、CV-A7 型 VP3 基因及 PIV-1 型 HN 基因的合成结果 | 第36-38页 |
| ·套式 PCR 引物的设计结果 | 第38页 |
| ·基因芯片探针设计结果 | 第38-39页 |
| ·人工合成 CV-A16 保守序列、CV-A7 型 VP3、PIV-1 型HN 基因的扩增结果及酶切结果 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第三章 关于检测 CV-A16、CV-A7、PIV-1基因芯片的构建及应用 | 第42-51页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·病毒和质粒 | 第42页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第42-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·稀释、定量探针 | 第43-44页 |
| ·芯片的设计方案 | 第44页 |
| ·点样及后处理 | 第44-45页 |
| ·待检片段的荧光标记 | 第45页 |
| ·按照公式计算 3 种病毒拷贝数 | 第45页 |
| ·芯片的杂交 | 第45页 |
| ·芯片的清洗及扫描 | 第45-46页 |
| ·基因芯片的灵敏性 | 第46页 |
| ·基因芯片的特异性 | 第46页 |
| ·基因芯片的重复性 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·CV-A16、CV-A7、PIV-1 型点样后扫描结果 | 第46页 |
| ·CV-A16、CV-A7、PIV-1 的套式 PCR 灵敏性结果 | 第46-47页 |
| ·CV-A16、CV-A7、PIV-1 芯片的灵敏性结果 | 第47-48页 |
| ·CV-A16、CV-A7、PIV-1 芯片的特异性结果 | 第48-49页 |
| ·CV-A16、CV-A7、PIV-1 芯片的重复性结果 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
