中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文略缩语 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 文献综述及本论文研究思路 | 第13-23页 |
1 文献综述 | 第13-19页 |
·甘草植株中甘草酸含量差异研究现状 | 第13页 |
·甘草酸生物合成研究进展 | 第13-14页 |
·基因拷贝数变异的研究现状 | 第14-16页 |
·基因拷贝数的检测方法研究进展 | 第16-19页 |
2 研究思路与方法 | 第19-23页 |
·研究目标 | 第19-20页 |
·研究内容 | 第20页 |
·研究方案 | 第20-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
第二章 REAL TIME PCR测定甘草HMGR、SQS1、B-AS基因拷贝数 | 第23-45页 |
1 实验材料、试剂及仪器 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌体和质粒 | 第23页 |
·试剂 | 第23-24页 |
·仪器和耗材 | 第24页 |
2 溶液及培养基配制 | 第24-25页 |
3 实验方法 | 第25-30页 |
·甘草总DNA提取 | 第25页 |
·内标基因的确定 | 第25页 |
·甘草HMGR、SQS1、β-AS、Lectin基因的获得 | 第25-27页 |
·甘草HMGR、SQS、β-AS、Lectin基因质粒标准品的获得 | 第27-28页 |
·Real time PCR标准曲线的建立 | 第28-29页 |
·Real time PCR扩增 | 第29-30页 |
4 实验结果 | 第30-42页 |
·甘草总DNA的提取 | 第30页 |
·基因片段的扩增 | 第30-31页 |
·菌液(含质粒标准品)PCR鉴定 | 第31页 |
·序列分析 | 第31-33页 |
·标准曲线的建立 | 第33-35页 |
·熔解曲线分析 | 第35-37页 |
·甘草样品Real time PCR扩增 | 第37-38页 |
·甘草样品Real time PCR扩增结果 | 第38-40页 |
·甘草HMGR、SQS1、β-AS基因CNVs分析 | 第40-41页 |
·甘草基因不同拷贝数组合的筛选 | 第41-42页 |
5 小结与讨论 | 第42-45页 |
·小结 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第三章 HPLC测定甘草中甘草酸、甘草苷含量 | 第45-56页 |
1 实验材料、试剂及仪器 | 第45页 |
·植物材料 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·仪器和耗材 | 第45页 |
2 实验方法 | 第45-47页 |
·对照品溶液制备 | 第45页 |
·供试品溶液制备 | 第45页 |
·色谱条件 | 第45-46页 |
·线性关系考察 | 第46页 |
·精密度试验 | 第46页 |
·重复性试验 | 第46页 |
·稳定性试验 | 第46页 |
·加样回收率 | 第46-47页 |
·样品测定 | 第47页 |
3 实验结果 | 第47-54页 |
·对照品溶液色谱图 | 第47-48页 |
·供试品溶液色谱图 | 第48-49页 |
·线性关系考察 | 第49页 |
·精密度试验 | 第49-50页 |
·重复性试验 | 第50页 |
·稳定性试验 | 第50-51页 |
·加样回收率试验 | 第51页 |
·样品测定 | 第51-54页 |
4 小结和讨论 | 第54-56页 |
·小结 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第四章 甘草HMGR、SQS1、B-AS基因CNVS和甘草酸含量相关性分析 | 第56-64页 |
1 甘草HMGR基因CNVs与甘草酸、甘草苷含量相关性分析 | 第56-57页 |
2 甘草SQS1基因CNVs与甘草酸、甘草苷含量相关性分析 | 第57-58页 |
3 甘草B-AS基因CNVs与甘草酸、甘草苷含量相关性分析 | 第58-59页 |
4 甘草3个基因拷贝数组合多态性与甘草酸、甘草苷含量相关性分析 | 第59-62页 |
5 小结和讨论 | 第62-64页 |
·小结 | 第62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
第六章 总结和展望 | 第64-66页 |
1 总结 | 第64-65页 |
2 展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录 | 第71-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
个人简历 | 第82页 |