| 目录 | 第1-7页 |
| CONTENTS | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-24页 |
| ·仔猪腹泻的流行与危害 | 第15-16页 |
| ·ETEC 与仔猪腹泻 | 第16-18页 |
| ·ETEC 的致病机制 | 第16页 |
| ·菌毛黏附素 | 第16-17页 |
| ·肠毒素 | 第17-18页 |
| ·用于防控 F4+ETEC 引起的仔猪腹泻疫苗研究现状 | 第18-20页 |
| ·M 细胞靶向性疫苗研究进展 | 第20-21页 |
| ·乳酸杆菌调控肠道健康 | 第21-22页 |
| ·乳酸杆菌活载体表达 ETEC 抗原研究进展 | 第22-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-44页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·引物 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-44页 |
| ·表达 STa-LTB-STb-FaeG、STa-LTB-STb-FaeG-co1、FaeG、FaeG-co1 融合基因重组大肠杆菌的构建 | 第25-36页 |
| ·重组大肠杆菌的诱导表达及鉴定 | 第36页 |
| ·重组蛋白免疫学指标的测定 | 第36-37页 |
| ·重组干酪乳杆菌的构建、诱导表达与鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组乳酸菌一次免疫效果评价 | 第39-41页 |
| ·重组乳酸菌三次免疫效果评价 | 第41-42页 |
| ·重组乳酸菌免疫哺乳期小鼠免疫效果评价 | 第42-44页 |
| 3 结果 | 第44-70页 |
| ·目的基因 FaeG 的 PCR 扩增结果 | 第44页 |
| ·目的基因 FaeG-co1 的 PCR 扩增结果 | 第44-45页 |
| ·目的基因 STa-LTB 的 PCR 扩增结果 | 第45页 |
| ·目的基因 STb 的 PCR 扩增结果 | 第45页 |
| ·目的基因 STa-LTB-STb 的 PCR 扩增结果 | 第45-46页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第46-48页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体 pET-30b-FaeG 的鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体 pET-30b-FaeG-co1 的鉴定结果 | 第47页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体 pET-30b-STa-LTB-STb-FaeG 的鉴定结果 | 第47-48页 |
| ·大肠杆菌重组表达载体 pET-30b-STa-LTB-STb-FaeG-co1 的鉴定结果 | 第48页 |
| ·重组大肠杆菌表达蛋白的鉴定 | 第48-52页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定结果 | 第48-50页 |
| ·Western blot 鉴定结果 | 第50-52页 |
| ·重组大肠杆菌免疫小鼠免疫学指标的测定 | 第52-54页 |
| ·免疫保护性实验 | 第52-53页 |
| ·免疫小鼠抗 ETEC 特异性 IgG 水平对比 | 第53-54页 |
| ·重组乳酸菌的鉴定结果 | 第54-56页 |
| ·重组乳酸杆菌表达蛋白的鉴定 | 第56-57页 |
| ·表达产物 Western blot 鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组乳酸菌一次免疫小鼠免疫学指标的测定 | 第57-61页 |
| ·小鼠一次免疫血清 IgG 测定结果 | 第57-58页 |
| ·小鼠一次免疫粪便 sIgA 测定结果 | 第58页 |
| ·小鼠一次免疫外生殖道 sIgA 测定结果 | 第58-59页 |
| ·脾淋巴细胞增殖结果 | 第59-60页 |
| ·小鼠经干酪乳杆菌一次免疫后攻毒实验结果 | 第60-61页 |
| ·重组乳酸菌三次免疫小鼠免疫学指标的测定 | 第61-66页 |
| ·小鼠三次免疫血清 IgG 测定结果 | 第61-62页 |
| ·小鼠三次免疫粪便 sIgA 测定结果 | 第62页 |
| ·小鼠三次免疫外生殖道 sIgA 测定结果 | 第62-63页 |
| ·小鼠三次免疫鼻冲洗液中 sIgA 测定结果 | 第63页 |
| ·脾淋巴细胞增殖结果 | 第63-64页 |
| ·细胞因子检测结果 | 第64-65页 |
| ·小鼠经干酪乳杆菌三次免疫后攻毒实验结果 | 第65-66页 |
| ·重组乳酸菌免疫哺乳期小鼠免疫学指标的测定 | 第66-70页 |
| ·哺乳期小鼠免疫后血清 IgG 测定结果 | 第66-67页 |
| ·哺乳期小鼠免疫后粪便 sIgA 测定结果 | 第67页 |
| ·哺乳期小鼠免疫后外生殖道 sIgA 测定结果 | 第67-68页 |
| ·哺乳期小鼠免疫后攻毒实验结果 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-75页 |
| ·课题设计思路 | 第70-71页 |
| ·大肠杆菌融合蛋白免疫效果分析 | 第71页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌免疫效果评价 | 第71-75页 |
| ·粘膜免疫应答效果评价 | 第72-73页 |
| ·体液免疫应答效果评价 | 第73页 |
| ·口服重组干酪乳杆菌对 ETEC 的保护力 | 第73-75页 |
| 5 结论 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录 | 第84-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
