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应用昆虫杆状病毒表达载体系统制备口蹄疫病毒空衣壳及其免疫原性检测

英文缩略词表第1-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-13页
综述第13-23页
 1. 口蹄疫及其防控研究进展第13-19页
   ·口蹄疫特点及流行状况第13-14页
   ·口蹄疫病毒的结构特征第14页
   ·口蹄疫病毒包装机理第14-15页
   ·口蹄疫的防控策略及其空衣壳疫苗的研究进展第15-19页
 2. 杆状病毒-昆虫细胞表达系统概述第19-23页
   ·昆虫杆状病毒载体第20-21页
   ·昆虫细胞系第21页
   ·BEVS 应用概述第21页
   ·BEVS 在 VLPs 疫苗研发中的应用第21-23页
第一部分 重组 pFastBac1-P12A3C 载体和重组病毒载体 rBacmid 的构建第23-44页
 1. 材料第23-28页
   ·实验材料第23页
   ·主要仪器设备第23-25页
   ·主要试剂第25-27页
   ·主要试剂的配制第27-28页
 2. 实验方法及实验步骤第28-37页
   ·技术路线第28-29页
   ·引物设计第29页
   ·获得目的基因 P12A3C第29-33页
   ·构建重组质粒 pFastBac1-P12A3C第33-34页
   ·突变克隆的定点回复突变第34-35页
   ·获得重组杆状病毒载体 rBacmid第35-37页
 3. 实验结果第37-42页
   ·P12A 和 3C 基因的 PCR 扩增第37-38页
   ·获得串联的 P12A3C 基因第38-39页
   ·重组载体 pFastBac1-P12A3C 的构建第39-40页
   ·测序结果第40-41页
   ·定点回复突变结果第41-42页
   ·获得重组病毒载体 rBacmid第42页
 4. 分析与讨论第42-44页
第二部分 FMDV 空衣壳在 Sf9 昆虫细胞系中表达及其检测第44-62页
 1. 材料第44-46页
   ·实验材料第44页
   ·主要仪器设备第44页
   ·主要试剂第44页
   ·主要试剂配制第44-46页
 2. 实验方法及实验步骤第46-53页
   ·技术路线第46页
   ·实验方法及实验步骤第46-53页
 3. 实验结果第53-58页
   ·细胞形态学检测第53-54页
   ·DNA 水平检测第54页
   ·mRNA 水平检测第54-55页
   ·蛋白质水平检测第55-57页
   ·FMDV 病毒样粒子形态学检测第57-58页
   ·病毒原液的滴度第58页
 4. 分析与讨论第58-62页
第三部分 FMDV 空衣壳的大量制备及免疫动物实验第62-69页
 1. 材料第62-63页
   ·实验材料第62页
   ·主要仪器设备第62页
   ·主要试剂第62页
   ·主要溶液的配制第62-63页
 2. 实验方法及实验步骤第63-66页
   ·大量培养细胞并接毒第63页
   ·浓缩 FMDV 空衣壳第63-64页
   ·对浓缩的空衣壳进行检测第64页
   ·免疫豚鼠实验第64-65页
   ·间接 ELISA 检测第65-66页
 3. 实验结果第66-68页
   ·Western Blot 检测第66页
   ·SDS-PAGE 检测第66-67页
   ·浓缩蛋白浓度第67页
   ·ELISA 结果第67-68页
 4. 分析与讨论第68-69页
第四部分 结论第69-70页
参考文献第70-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表的学术论文第75页

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