| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 第一部分：文献综述 | 第16-32页 |
| 第一章 猪链球菌2型的生物学特性与致病机制的研究进展 | 第17-26页 |
| 1 生物学特征 | 第17-18页 |
| 2 猪链球菌的流行 | 第18页 |
| 3 细胞表面蛋白的研究进展 | 第18-21页 |
| 4 SodA的研究进展 | 第21页 |
| 5 猪链球菌的致病机制的研究进展 | 第21-24页 |
| 6 猪链球菌的治疗与预防 | 第24-26页 |
| 第二章 细菌中CcpA介导碳源代谢性抑制与致病性 | 第26-32页 |
| 1 细菌中碳源性化合物转移 | 第26-27页 |
| 2 碳分解代谢物阻遏(CCR) | 第27页 |
| 3 CcpA在CCR中的作用 | 第27-28页 |
| 4 HprK在CCR中的作用 | 第28-29页 |
| 5 CcpA与致病性 | 第29-32页 |
| 第二部分：实验研究 | 第32-114页 |
| 第一章 ：猪链球菌2型分离株基因型与致病性 | 第33-47页 |
| 摘要 | 第33-34页 |
| 1 材料 | 第34页 |
| ·菌株、载体与仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| 2 方法 | 第34-40页 |
| ·引物设计与合成 | 第34-37页 |
| ·细菌DNA提取 | 第37页 |
| ·PCR扩增与克隆 | 第37-38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| ·粘附与侵袭试验 | 第38-39页 |
| ·存活试验 | 第39页 |
| ·小鼠致病力试验 | 第39-40页 |
| 3. 结果 | 第40-45页 |
| ·猪链球菌2型分离株的菌毛型,ST型和毒力型的相关性研究 | 第40-44页 |
| ·不同菌毛型细菌的粘附与侵袭能力比较 | 第44页 |
| ·不同菌毛型细菌的抗吞噬能力的分析 | 第44页 |
| ·不同菌毛型细菌的毒力比较 | 第44-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-47页 |
| 第二章 猪链球菌2型分选酶对猪链球菌2型致病性的研究 | 第47-61页 |
| 摘要 | 第47-48页 |
| 1 材料 | 第48页 |
| ·菌株、载体和培养条件 | 第48页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-55页 |
| ·构建突变载体 | 第48-52页 |
| ·猪链球菌感受态的制备 | 第52页 |
| ·电转 | 第52页 |
| ·突变株的构建 | 第52页 |
| ·PCR的鉴定 | 第52-53页 |
| ·细胞迁移试验 | 第53页 |
| ·细胞粘附和侵袭试验 | 第53-54页 |
| ·存活试验 | 第54-55页 |
| ·小鼠致病力试验 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-60页 |
| ·猪链球菌2型分选酶基因的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| ·突变株的鉴定 | 第56页 |
| ·分选酶突变株对细菌粘附和侵袭的影响 | 第56-58页 |
| ·分选酶突变株对吞噬细胞中的杀灭的影响 | 第58页 |
| ·分选酶突变株对脑血管内皮细胞的迁移影响 | 第58-59页 |
| ·分选酶突变株对小鼠毒力的影响 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-61页 |
| 第三章 ：猪链球菌2型CcpA对碳水化合物代谢和致病性研究 | 第61-85页 |
| 摘要 | 第61-62页 |
| 1 材料 | 第62-63页 |
| ·菌株、载体和培养条件 | 第62页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第62-63页 |
| 2 方法 | 第63-75页 |
| ·生物信息学分析 | 第63页 |
| ·构建突变载体 | 第63-65页 |
| ·猪链球菌感受态的制备 | 第65页 |
| ·电转 | 第65页 |
| ·CcpA突变株的构建 | 第65-66页 |
| ·CcpA互补株的构建 | 第66页 |
| ·补菌株在mRNA和蛋白水平的鉴定 | 第66-72页 |
| ·猪链球菌对糖的利用分析 | 第72-73页 |
| ·猪链球菌碳分解代谢物阻遏分析 | 第73-74页 |
| ·细胞粘附和侵袭试验 | 第74-75页 |
| ·小鼠致病力试验 | 第75页 |
| 3. 结果 | 第75-84页 |
| ·CcpA编码基因的一般特性和分子进化树分析 | 第75-76页 |
| ·猪链球菌2型野生株和突变株对于各种糖的利用率比较 | 第76-79页 |
| ·猪链球菌2型CCR的研究 | 第79-80页 |
| ·CcpA对毒力基因调控研究 | 第80页 |
| ·CcpA突变株对脑血管内皮细胞的粘附和侵袭的影响 | 第80-81页 |
| ·CcpA突变株在小鼠模型中致病力降低 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-85页 |
| 第四章 猪链球菌2型SodA基因功能及致病性研究 | 第85-98页 |
| 摘要 | 第85-86页 |
| 1 材料 | 第86页 |
| ·菌株、载体和培养条件 | 第86页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第86页 |
| 2 方法 | 第86-92页 |
| ·生物信息学分析 | 第86-87页 |
| ·构建突变载体 | 第87-88页 |
| ·猪链球菌感受态的制备 | 第88页 |
| ·电转 | 第88页 |
| ·突变菌株的构建 | 第88-89页 |
| ·SodA互补质粒的构建 | 第89页 |
| ·SodA互补菌株的构建 | 第89页 |
| ·SodA活性的检测 | 第89-90页 |
| ·体外抗过氧化物试验 | 第90页 |
| ·存活试验 | 第90-91页 |
| ·小鼠致病力试验 | 第91-92页 |
| 3 结果 | 第92-96页 |
| ·SodA基因的序列对比分析 | 第92页 |
| ·SodA在缺失和互补菌株中的活性鉴定 | 第92页 |
| ·体外抗氧化应激作用 | 第92-94页 |
| ·抗细胞吞噬作用 | 第94-95页 |
| ·小鼠毒力试验 | 第95-96页 |
| 4. 讨论 | 第96-98页 |
| 第五章 猪链球菌2型Sgp1和Sgp1菌毛蛋白分析及免疫保护的研究 | 第98-114页 |
| 摘要 | 第98-99页 |
| 1 材料 | 第99页 |
| ·菌种、载体及血清 | 第99页 |
| ·主要试剂 | 第99页 |
| 2 方法 | 第99-106页 |
| ·菌毛蛋白编码基因的生物信息学分析 | 第99页 |
| ·菌毛蛋白原核表达 | 第99-104页 |
| ·重组蛋白抗体的制备与验证 | 第104-106页 |
| ·免疫保护试验 | 第106页 |
| 3 结果 | 第106-112页 |
| ·生物信息学预测SS2菌毛基因 | 第106-107页 |
| ·PCR扩增Sgp1和Sgp2基因 | 第107-108页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第108页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第108-109页 |
| ·兔血清中抗体效价的测定 | 第109-110页 |
| ·抗体与细菌免疫反应的分析 | 第110-111页 |
| ·胶体金免疫电镜验证重组蛋白 | 第111-112页 |
| ·菌毛蛋白的免疫保护作用 | 第112页 |
| 4. 讨论 | 第112-114页 |
| 结论 | 第114-115页 |
| 创新点 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-126页 |
| 作者简介 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
