| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| ·昆虫肠道微生物多样性研究进展 | 第8-12页 |
| ·昆虫肠道微生物多样性 | 第8-9页 |
| ·肠道菌群多样性的影响因素 | 第9-10页 |
| ·昆虫肠道菌的功能 | 第10-11页 |
| ·昆虫肠道产纤维素酶菌的研究 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶 | 第12-16页 |
| ·纤维素酶的酶系组成、作用机理 | 第12页 |
| ·动物内源性纤维素酶 | 第12-13页 |
| ·微生物纤维素酶 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的应用与前景 | 第14-16页 |
| 2 引言 | 第16-17页 |
| ·研究目的及意义 | 第16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-17页 |
| ·柞蚕肠道菌群结构鉴定 | 第16页 |
| ·肠道产酶菌的筛选 | 第16页 |
| ·纤维素酶基因的克隆与表达 | 第16-17页 |
| ·技术路线 | 第17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·仪器与试剂 | 第17-21页 |
| ·主要实验仪器 | 第17-18页 |
| ·主要生化试剂 | 第18页 |
| ·常用溶液的配置 | 第18-20页 |
| ·试验用培养基 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·柞蚕解剖 | 第21页 |
| ·肠道菌的培养、分离、纯化 | 第21页 |
| ·肠道菌的生理生化检测 | 第21页 |
| ·肠道菌 DNA 提取 | 第21页 |
| ·细菌 16S rDNA 序列扩增、分析 | 第21-22页 |
| ·产酶菌的筛选 | 第22页 |
| ·酶活测定 | 第22-24页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第22-23页 |
| ·脂肪酶活力测定 | 第23页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第23-24页 |
| ·内切葡聚糖酶基因(endo-β-glucosidase)的原核表达 | 第24-25页 |
| ·内切葡聚糖酶基因的扩增 | 第24页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·菌液的诱导表达 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第25页 |
| ·表达产物的 Western blot 分析 | 第25-26页 |
| ·重组菌株表达的稳定性检测 | 第26-27页 |
| 4 结果 | 第27-39页 |
| ·肠道菌群结构鉴定 | 第27-29页 |
| ·菌落形态及生理生化特征 | 第27-28页 |
| ·16S rDNA 序列的系统发育分析 | 第28-29页 |
| ·产酶菌的筛选鉴定 | 第29-31页 |
| ·酶活测定 | 第31-32页 |
| ·纤维素酶活力 | 第31页 |
| ·脂肪酶活力 | 第31页 |
| ·蛋白酶活力 | 第31-32页 |
| ·产纤维素酶菌的发酵条件 | 第32-33页 |
| ·不同发酵时间对产纤维素酶的影响 | 第32页 |
| ·不同 pH 对产纤维素酶的影响 | 第32-33页 |
| ·不同温度对产纤维素酶的影响 | 第33页 |
| ·内切葡萄糖苷酶基因序列分析 | 第33-35页 |
| ·内切葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第35-36页 |
| ·表达产物的 Western blot 分析 | 第36页 |
| ·细胞外酶活测定 | 第36-37页 |
| ·重组菌株表达的稳定性检测 | 第37-39页 |
| 5 讨论 | 第39-42页 |
| ·柞蚕肠道菌多样性 | 第39页 |
| ·肠道产酶菌 | 第39-40页 |
| ·酶活测定 | 第40页 |
| ·产纤维素酶菌的发酵条件 | 第40页 |
| ·内切葡萄糖苷酶基因的原核表达 | 第40-41页 |
| ·重组质粒稳定性检测 | 第41-42页 |
| 6 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
| 个人简介 | 第50页 |