| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| ·转基因动物的研究历史 | 第11-12页 |
| ·转基因动物研究的提出与尝试 | 第11页 |
| ·转基因动物研究的发展 | 第11-12页 |
| ·转基因牛的研究概况 | 第12-14页 |
| ·国外转基因牛的研究进展 | 第12-13页 |
| ·国内转基因牛的研究进展 | 第13-14页 |
| ·Fat-1基因的研究 | 第14-16页 |
| ·Fat-1基因的发现 | 第14页 |
| ·Fat-1转基因动物及基因功能的研究 | 第14-15页 |
| ·Fat-1基因的应用前景 | 第15-16页 |
| ·转基因动物检测方法 | 第16-19页 |
| ·转基因动物个体的检测 | 第16页 |
| ·蛋白质的检测 | 第16-17页 |
| ·DNA检测方法 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 转基因牛阳性牛的鉴定 | 第20-25页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·试验动物 | 第20页 |
| ·试验试剂 | 第20页 |
| ·主要试验试剂的配置 | 第20-21页 |
| ·试验器材 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-24页 |
| ·DNA的提取 | 第21页 |
| ·PCR法对转基因阳性牛的鉴定 | 第21-22页 |
| ·Southern杂交技术对转基因阳性牛的鉴定 | 第22-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-25页 |
| ·DNA的提取 | 第24页 |
| ·PCR的鉴定结果 | 第24页 |
| ·Southern杂交 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25页 |
| 3 转基因牛中外源基因拷贝数的检测 | 第25-31页 |
| ·试验材料 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·绝对定量标准品的构建 | 第26-28页 |
| ·荧光定量PCR扩增体系和程序 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-30页 |
| ·荧光定量PCR标准曲线的制定 | 第28-30页 |
| ·外源基因拷贝数的计算 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 4 外源基因对基因组表达的影响 | 第31-49页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·试验试剂 | 第31页 |
| ·试验器材 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-36页 |
| ·RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·总RNA的纯化(QIAGEN RNeasy(?) Mini Kit) | 第32页 |
| ·cDNA第一链和第二链一步法合成 | 第32-33页 |
| ·aaUTP标记cRNA合成 | 第33-34页 |
| ·cRNA纯化(QIAGEN RNeasy(?) Mini Kit) | 第34页 |
| ·cRNA浓度测定 | 第34页 |
| ·cRNA样品荧光标记 | 第34-35页 |
| ·荧光标记cRNA样品纯化(QIAGEN RNeasy(?) Mini Kit) | 第35页 |
| ·荧光分子浓度及掺入率计算 | 第35页 |
| ·cRNA样品片段化和芯片杂交(4x44K microarrays) | 第35页 |
| ·芯片洗涤 | 第35-36页 |
| ·芯片扫描 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-49页 |
| ·总RNA检测结果 | 第36页 |
| ·差异表达基因结果 | 第36-41页 |
| ·差异表达基因生物信息学分析的结果 | 第41-45页 |
| ·差异表达基因的生物学功能分析的结果 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
