| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-23页 |
| 1 传染性法氏囊病概述 | 第10-11页 |
| ·传染性法氏囊病的发现 | 第10页 |
| ·传染性法氏囊病的生物学特征 | 第10页 |
| ·传染性法氏囊病流行现状 | 第10-11页 |
| 2 传染性法氏囊病毒分子生物学研究进展 | 第11-12页 |
| 3 传染性法氏囊病检测方法的研究进展 | 第12-13页 |
| ·IBD 常规检测方法及应用 | 第12-13页 |
| ·IBD 分子生物学检测方法研究进展 | 第13页 |
| 4 动物细胞大规模培养技术的研究进展 | 第13-19页 |
| ·动物细胞培养及常用的细胞系 | 第13-14页 |
| ·微载体及其培养技术的发展 | 第14-15页 |
| ·生物反应器的种类及应用 | 第15-16页 |
| ·生物反应器微载体大规模培养动物细胞的现状 | 第16-17页 |
| ·安普激流灌注式生物反应器的应用 | 第17-19页 |
| 5 传染性法氏囊病疫苗研究进展 | 第19-23页 |
| ·传统疫苗的研究及应用 | 第19-20页 |
| ·新型疫苗研究进展 | 第20-23页 |
| 试验一 传染性法氏囊病毒实时 QRT-PCR 检测方法的建立 | 第23-32页 |
| 1 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂和材料 | 第23页 |
| ·细胞系和病毒株 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·病毒 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第24页 |
| ·标准品的制备 | 第24页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立 | 第24-25页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量 RT-PCR 的敏感性、特异性及重复性实验 | 第25页 |
| ·实时 QRT-PCR 检测方法对 IBDV 在方瓶 DF-1 细胞中增殖动态的测定 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-30页 |
| ·标准质粒 p-18T-493 的构建 | 第25-26页 |
| ·标准曲线的建立 | 第26页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量敏感性实验 | 第26-27页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量特异性实验 | 第27-28页 |
| ·SYBR GreenⅠ荧光定量重复性实验 | 第28-29页 |
| ·QRT-PCR 和 TCID50方法对 IBDV 在方瓶中增殖动态的测定 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 实验二、用激流式生物反应器大规模培养传染性法氏囊病毒的研究 | 第32-55页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·主要材料 | 第32-33页 |
| ·细胞与病毒种毒 | 第33页 |
| ·实验场地 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-36页 |
| ·IBDV 在微型反应器（转管纸片载体）DF-1 细胞上培养特性的研究 | 第33-35页 |
| ·IBDV 在 AP10 激流式生物反应器中 DF-1 细胞上繁殖特性的研究 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-52页 |
| ·转管中 DF-1 细胞的生长动态和糖耗测定 | 第36-38页 |
| ·IBDV 在转管 DF-1 细胞中接毒量(MOI)和收毒时间的确定 | 第38-39页 |
| ·IBDV 在转管(纸片载体)DF-1 细胞中的繁殖动态 | 第39-43页 |
| ·IBDV 在转管(纸片载体)DF-1 细胞中二次收毒测定 | 第43-44页 |
| ·激流式生物反应器中 IBDV 增殖动态的测定 | 第44-48页 |
| ·激流式生物反应器中 IBDV 二次收毒实验 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 试验三 用反应器和转瓶培养 IBDV 制备灭活疫苗的研究 | 第55-69页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·主要试剂和材料 | 第55-56页 |
| ·细胞与病毒 | 第56页 |
| ·试验用 SPF 鸡 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-59页 |
| ·IBDV HQ 株在 DF-1 细胞系上种毒库的建立和鉴定 | 第56-57页 |
| ·IBDCEF 细胞、DF-1 细胞转瓶及反应器 DF-1 细胞灭活疫苗的制备及检验 | 第57-59页 |
| 3 结果 | 第59-67页 |
| ·IBDV HQ 株在 DF-1 细胞系上种毒库的建立和鉴定结果 | 第59-62页 |
| ·病毒含量的测定 | 第59页 |
| ·特异性测定 | 第59-60页 |
| ·纯净度检验 | 第60-61页 |
| ·免疫原性测定 | 第61-62页 |
| ·保存期的测定 | 第62页 |
| ·转瓶 CEF 细胞、DF-1 细胞及反应器 DF-1 细胞 IBD 疫苗的制备和检验 | 第62-67页 |
| ·反应器病毒液的制备 | 第62-63页 |
| ·转瓶 CEF 细胞和 DF-1 细胞 IBD 病毒液的制备及浓缩试验结果 | 第63页 |
| ·IBD 三种病毒液的灭活和检验 | 第63-64页 |
| ·IBD 三种疫苗的乳化与分装 | 第64页 |
| ·IBD 三种疫苗的检验结果 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 英文摘要 | 第74-75页 |
