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FoxO1与TORC2基因对胰岛NIT-1细胞株的调控作用及两基因表达之间的相互关系研究

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-13页
1 材料第13-16页
   ·细胞株第13页
   ·试剂第13-15页
     ·常用试剂第13-14页
     ·其他常用溶液配制第14-15页
   ·主要仪器设备第15-16页
2. 方法第16-23页
   ·NIT-1细胞的常规培养第16页
   ·siRNA片段设计与合成第16-17页
   ·Fox01 siRNA转染第17-18页
     ·转染FAM标记的阴性对照siRNA第17页
     ·根据最优转染条件转染Fox01siRNA第17页
     ·TORC2siRNA的转染方法第17-18页
   ·调控NIT-1细胞中Fox01、TORC2基因的表达第18页
   ·各项检测方法与观测指标第18-23页
     ·MTT法检测各组细胞的增值情况第18-19页
     ·用免疫荧光细胞核染色法,检测细胞凋亡情况第19-20页
     ·胰岛细胞分泌功能检测第20页
     ·免疫蛋白印迹技术,检测Fox01、TORC2、AKT蛋白表达水平第20-23页
   ·统计与分析第23页
3. 结果第23-34页
   ·NIT-1细胞正常的生长状态第23页
   ·Fox01基因在NOD鼠NIT-1细胞中的定位第23-24页
   ·调控Fox01基因的表达,检测NIT-1细胞的增殖、凋亡与胰岛素分泌情况第24-29页
     ·MTT法检测细胞增殖结果第24-25页
     ·免疫荧光细胞核染色法检测细胞凋亡情况第25-27页
     ·放射免疫法检测胰岛素分泌功能第27-29页
   ·免疫蛋白印迹技术检测NIT-1细胞中调控Fox01基因、TORC2基因的表达与之相关基因的表达水平的变化第29-34页
     ·蛋白定量结果第29-30页
     ·用Fox01 siRNA技术调控Fox01基因的表达,抑制效果鉴定第30页
     ·免疫蛋白印迹技术检测蛋白的表达第30-31页
     ·Fox01siRNA干预细胞以后,TORC2蛋白表达水平的变化第31-32页
     ·TORC2SiRNA干预细胞后,TORC2蛋白表达水平的变化第32-33页
     ·TORC2SiRNA干预细胞后,Fox01蛋白表达水平的变化第33-34页
4. 讨论第34-37页
5. 结论第37页
参考文献第37-42页
中英文缩写词对照表第42-43页
综述第43-49页
 参考文献第45-49页
攻读学位期间发表的学术论文目录第49-50页
致谢第50页

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