中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第10-13页 |
1 材料 | 第13-16页 |
·细胞株 | 第13页 |
·试剂 | 第13-15页 |
·常用试剂 | 第13-14页 |
·其他常用溶液配制 | 第14-15页 |
·主要仪器设备 | 第15-16页 |
2. 方法 | 第16-23页 |
·NIT-1细胞的常规培养 | 第16页 |
·siRNA片段设计与合成 | 第16-17页 |
·Fox01 siRNA转染 | 第17-18页 |
·转染FAM标记的阴性对照siRNA | 第17页 |
·根据最优转染条件转染Fox01siRNA | 第17页 |
·TORC2siRNA的转染方法 | 第17-18页 |
·调控NIT-1细胞中Fox01、TORC2基因的表达 | 第18页 |
·各项检测方法与观测指标 | 第18-23页 |
·MTT法检测各组细胞的增值情况 | 第18-19页 |
·用免疫荧光细胞核染色法,检测细胞凋亡情况 | 第19-20页 |
·胰岛细胞分泌功能检测 | 第20页 |
·免疫蛋白印迹技术,检测Fox01、TORC2、AKT蛋白表达水平 | 第20-23页 |
·统计与分析 | 第23页 |
3. 结果 | 第23-34页 |
·NIT-1细胞正常的生长状态 | 第23页 |
·Fox01基因在NOD鼠NIT-1细胞中的定位 | 第23-24页 |
·调控Fox01基因的表达,检测NIT-1细胞的增殖、凋亡与胰岛素分泌情况 | 第24-29页 |
·MTT法检测细胞增殖结果 | 第24-25页 |
·免疫荧光细胞核染色法检测细胞凋亡情况 | 第25-27页 |
·放射免疫法检测胰岛素分泌功能 | 第27-29页 |
·免疫蛋白印迹技术检测NIT-1细胞中调控Fox01基因、TORC2基因的表达与之相关基因的表达水平的变化 | 第29-34页 |
·蛋白定量结果 | 第29-30页 |
·用Fox01 siRNA技术调控Fox01基因的表达,抑制效果鉴定 | 第30页 |
·免疫蛋白印迹技术检测蛋白的表达 | 第30-31页 |
·Fox01siRNA干预细胞以后,TORC2蛋白表达水平的变化 | 第31-32页 |
·TORC2SiRNA干预细胞后,TORC2蛋白表达水平的变化 | 第32-33页 |
·TORC2SiRNA干预细胞后,Fox01蛋白表达水平的变化 | 第33-34页 |
4. 讨论 | 第34-37页 |
5. 结论 | 第37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
中英文缩写词对照表 | 第42-43页 |
综述 | 第43-49页 |
参考文献 | 第45-49页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |