| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| ·microRNA 的概述 | 第8页 |
| ·miRNA 的特征 | 第8-9页 |
| ·microRNA 的合成 | 第9-11页 |
| ·miRNA 与siRNA | 第11-12页 |
| ·miRNA 的作用 | 第12-13页 |
| ·miRNA 的发现 | 第13-14页 |
| ·小片段 RNA 克隆 | 第13页 |
| ·miRNAs 的筛选 | 第13页 |
| ·miRNAs 的生物信息学分析 | 第13-14页 |
| ·miRNAs 的靶标预测与验证 | 第14页 |
| ·miRNAs 靶标的生物信息学分析 | 第14页 |
| ·miRNAs 靶标的实验验证 | 第14页 |
| ·microRNA 定量检测方法 | 第14-16页 |
| ·Northern blotting 法 | 第14页 |
| ·实时荧光定量PCR 法[81] | 第14-15页 |
| ·克隆测序法 | 第15页 |
| ·新一代大规模测序技术 | 第15-16页 |
| 2. 引言 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-28页 |
| ·实验材料与试剂 | 第17-20页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第17-18页 |
| ·主要的缓冲液和试剂成分及配制 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·玉米籽粒miRNA 建库 | 第20-22页 |
| ·RNA 相关实验操作原则 | 第20页 |
| ·RNA 实验相关物品的处理 | 第20页 |
| ·总RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·总RNA 的纯化 | 第21页 |
| ·Illumina sequencing 技术测序 | 第21-22页 |
| ·生物信息分析内容 | 第22页 |
| ·同源性分析 | 第22页 |
| ·二级结构预测 | 第22-23页 |
| ·测序结果分析RNA 表达量 | 第23页 |
| ·靶标预测 | 第23页 |
| ·Northern Blot 试验验证miRNA 及其表达情况 | 第23-24页 |
| ·总RNA 的提取同上 | 第23页 |
| ·Northern blot 验证 | 第23-24页 |
| ·5’RACE 验证靶基因 | 第24-28页 |
| ·5’接头的连接 | 第24-25页 |
| ·Trizol 法纯化 | 第25页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增 | 第26页 |
| ·巢式PCR | 第26-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-49页 |
| ·玉米总RNA 提取结果 | 第28-29页 |
| ·microRNA 序列 | 第29-30页 |
| ·二级结构预测结果 | 第30-36页 |
| ·同源性分析 | 第36-37页 |
| ·miRNA 表达量分析 | 第37-44页 |
| ·miRNA 靶基因的预测 | 第44-46页 |
| ·Northern Blot 实验验证miRNA 及其表达情况 | 第46-47页 |
| ·5’RACE 实验验证靶基因 | 第47-49页 |
| ·5’接头的连接 | 第47页 |
| ·PCR 扩增 | 第47-49页 |
| 5 结论与讨论 | 第49-53页 |
| ·改良CTAB 法提取玉米籽粒总RNA | 第49页 |
| ·新一代测序技术检测miRNA | 第49-50页 |
| ·microRNA 保守性分析 | 第50页 |
| ·玉米microRNA 靶序列的功能多样性 | 第50-51页 |
| ·microRNA 表达 | 第51页 |
| ·下一步的研究 | 第51-52页 |
| ·microRNA 研究的发展前景 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| Abstract | 第60-61页 |
