| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-21页 |
| ·5'UTR在基因表达过程中的作用 | 第12-17页 |
| ·5'末端寡聚嘧啶序列在基因表达调控中的作用 | 第12-14页 |
| ·5'UTR二级结构在基因表达调控中的作用 | 第14-16页 |
| ·选择性剪切形成不同的5'UTR对基因表达进行调控 | 第16-17页 |
| ·启动子在基因表达过程中的作用 | 第17-18页 |
| ·内含子在基因表达过程中的作用 | 第18-19页 |
| ·内含子在基因表达调控中的正调控作用 | 第18页 |
| ·选择性的保留内含子在基因表达调控中的作用 | 第18-19页 |
| ·第一个内含子在基因表达调控中的作用 | 第19页 |
| ·3'UTR的基因表达过程中的作用 | 第19-20页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-56页 |
| ·实验材料 | 第21-26页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·酶及化学试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·培养基的配制 | 第22-24页 |
| ·试剂的配制 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-56页 |
| ·生物信息学分析 | 第26页 |
| ·不同克隆的构建策略 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增拟南芥RPL36B不同片段所需引物 | 第27-30页 |
| ·Touchdown PCR反应体系 | 第30-31页 |
| ·PCR产物的检测 | 第31-32页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第32-33页 |
| ·拟南芥RPL36B目的片段在含有(HA)_3标签的SK(-)载体的克隆 | 第33-40页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备和转化 | 第40页 |
| ·菌落PCR验证转化结果 | 第40-41页 |
| ·大肠杆菌质粒抽提及酶切验证 | 第41-44页 |
| ·拟南芥RPL36B五个构建与表达载体pCAMBIA1301的连接 | 第44-46页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备、转化及质粒抽提 | 第46-48页 |
| ·拟南芥RPL36B在胡萝卜及烟草悬浮细胞BY2的转化 | 第48-49页 |
| ·转化体的GUS染色 | 第49页 |
| ·植物RNA的抽提 | 第49-50页 |
| ·RNA变性电泳 | 第50页 |
| ·Northern blot | 第50-52页 |
| ·Western blot | 第52-55页 |
| ·GUS报告基因的构建 | 第55-56页 |
| 第3章 结果与分析 | 第56-73页 |
| ·用RST-tool-Paster软件分析得到目的基因 | 第56-57页 |
| ·实验构建结果 | 第57-67页 |
| ·实验构建的基础 | 第57页 |
| ·拟南芥RPL36B替换启动子在SK(-)的克隆和鉴定 | 第57-58页 |
| ·拟南芥RPL36B删除第一个内含子在SK(-)的克隆与鉴定 | 第58-60页 |
| ·拟南芥RPL36B替换启动子并删除第一个内含子的克隆与鉴定 | 第60-61页 |
| ·拟南芥RPL36B替换5'UTR在SK(-)的克隆与鉴定 | 第61-62页 |
| ·拟南芥RPL36B移动第一个内含子在SK(-)的克隆与鉴定 | 第62-65页 |
| ·拟南芥RPL36B不同构建在表达载体pCAMBIA1301的克隆与鉴定 | 第65-67页 |
| ·植物转基因 | 第67-68页 |
| ·抗生素浓度对愈伤组织生长的影响 | 第67页 |
| ·不同激素对于愈伤组织形成的影响 | 第67-68页 |
| ·侵染时间的影响 | 第68页 |
| ·转基因组织的GUS染色 | 第68-69页 |
| ·胡萝卜愈伤组织的GUS染色 | 第68-69页 |
| ·烟草悬浮细胞BY2的GUS染色 | 第69页 |
| ·转基因烟草RNA提取及Nothern blot结果 | 第69-70页 |
| ·转基因烟草蛋白提取及Western blot结果 | 第70-71页 |
| ·GUS报告基因的构建 | 第71-73页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第73-76页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| ·进一步的工作方向 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
| 附录A | 第82-83页 |
| 附录B | 第83-85页 |
