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羧基化单壁碳纳米管对端粒酶及端粒的生物医学效应

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 文献综述第12-46页
   ·引言第12-13页
     ·碳纳米管第13-24页
     ·碳纳米管的制备第13-14页
     ·碳纳米管的结构和分类第14-16页
     ·碳纳米管的功能化第16-17页
     ·碳纳米管的生物应用第17-24页
       ·碳纳米管与核酸的相互作用第17-19页
       ·金属离子诱导下的 DNA 构象变化第19-20页
       ·SWNTs 诱导的 DNA 构象变化第20-21页
       ·SWNTs 诱导的 DNA 构型变化的应用第21-22页
       ·碳纳米管与细胞的相互作用第22-24页
     ·端粒和端粒酶第24-27页
     ·端粒第24-25页
     ·端粒酶第25-27页
     ·G-四链DNA第27-40页
     ·G-四链 DNA 的结构多样性第27-29页
     ·端粒 G-四链 DNA 的拓扑结构第29-32页
     ·人端粒 G-四链 DNA 的体内存在及生物学功能第32-34页
     ·端粒 RNA(TERRA)第34-35页
       ·端粒 G-四链 DNA 的识别及靶向第35-40页
       ·配体对端粒 G-四链体的识别第35-38页
       ·稳定端粒 G-四链 DNA 小分子配体的作用机制第38-40页
   ·DNA与小分子识别的研究方法第40-44页
 本论文的立题依据和研究内容第44-46页
第二章 碳纳米管的合成,修饰及细胞内的定位第46-62页
   ·引言第46-47页
   ·实验部分第47-51页
     ·药品和试剂第47页
     ·仪器和方法第47-51页
       ·不同功能化碳纳米管的制备第47-48页
       ·羧基化石墨烯,碳点,量子点的制备第48-49页
       ·表征手段第49-50页
       ·生物检测分析第50-51页
   ·结果与讨论第51-61页
   ·本章小结第61-62页
第三章 碳纳米管在细胞内外对端粒酶活性的抑制第62-81页
   ·引言第62-63页
   ·实验部分第63-67页
     ·药品和试剂第63页
     ·仪器和方法第63-67页
       ·紫外热变性(UV melting)实验第63页
       ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)第63-64页
       ·生物检测分析第64-67页
   ·结果与讨论第67-80页
     ·不同羧基化修饰纳米材料对 i-motif 的稳定作用第67-69页
     ·羧基修饰的 SWNTs 在细胞外对端粒酶活性的抑制作用第69-73页
     ·SWNTs 在细胞内对端粒酶活性的抑制作用第73-77页
     ·SWNTs 对端粒酶的抑制作用不依赖其定位及表达的变化第77-80页
   ·本章小结第80-81页
第四章 碳纳米管诱导的生长抑制及DNA损伤反应的产生第81-98页
   ·引言第81页
   ·实验部分第81-87页
     ·药品和试剂第81-82页
     ·仪器和方法第82-87页
       ·短期的细胞增殖分析(short-termcell proliferation assay)第82页
       ·质粒的构建及转染第82-83页
       ·长期的细胞增殖分析(long-termexposure study)第83-84页
       ·染色质免疫沉淀(ChIPassay)第84-86页
       ·端粒 DNA 的实时定量 PCR 检测(Telomere qRT-PCR analysis)第86-87页
   ·结果与讨论第87-97页
     ·SWNTs 诱导的非急性细胞毒性第87-88页
     ·SWNTs 诱导的生长抑制第88-92页
     ·SWNTs 诱导的 DNA 损伤反应的产生第92-94页
     ·SWNTs 诱导的 DNA 损伤反应发生在端粒上第94-97页
   ·本章小结第97-98页
第五章 碳纳米管诱导的端粒结合蛋白的解离及对端粒长度的影响第98-115页
   ·引言第98页
   ·实验部分第98-103页
     ·药品和试剂第98-99页
     ·仪器和方法第99-103页
       ·基因组 DNA 的提取第99页
       ·化学发光检测端粒长度及 3′-悬端长度第99-101页
       ·免疫共沉淀第101-102页
       ·免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交第102-103页
   ·结果与讨论第103-114页
     ·SWNTs 诱导的端粒结合蛋白 TRF2, POT1 从端粒上解离第103-107页
     ·SWNTs 诱导端粒相关蛋白 PCBP1 从端粒上解离第107-112页
     ·SWNTs 诱导的端粒 3′-悬端的降解第112-114页
   ·本章小结:第114-115页
第六章 碳纳米管诱导的端粒打开及生物学效应分析第115-136页
   ·引言第115页
   ·实验部分第115-119页
     ·药品和试剂第115页
     ·仪器和方法第115-119页
       ·细胞遗传学分析第115-116页
       ·端粒-末端脱氧尿嘧啶转移酶检测第116-118页
       ·细胞周期分析第118页
       ·细胞凋亡分析第118页
       ·细胞衰老分析第118-119页
   ·结果与讨论第119-132页
     ·SWNTs 诱导的后期桥,微核形成及端粒融合第119-120页
     ·利用端粒-TdT assay 分析端粒的去保护状态第120-124页
     ·SWNTs 诱导的细胞周期阻滞,凋亡和衰老第124-126页
     ·SWNTs 诱导的 p16 和 p21 蛋白的上调第126-129页
     ·低水平的 SWNTs 在细胞内的积累及其生长抑制分析第129-132页
   ·本章小结第132-136页
结论与展望第136-138页
参考文献第138-158页
主要学术成果第158-160页
 发表及待发表文章第158-159页
 会议论文第159-160页
致谢第160页

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