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补肾壮骨法对人骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及基质代谢的影响

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-19页
英文缩略语第19-20页
第一章 文献综述第20-38页
 第一节 中医药治疗骨关节炎临床研究进展第20-28页
  参考文献第25-28页
 第二节 白介素-1与骨关节炎第28-38页
  参考文献第33-38页
第二章 理论探讨 从肾藏象论衰老与骨关节炎第38-44页
 1. 肾虚骨衰是OA的病机关键第38-39页
 2. 肾虚是衰老的根本原因第39-40页
 3. 衰老可能是OA发生的核心机制第40-41页
 4. 补肾法是治疗OA的重要治法第41-42页
 参考文献第42-44页
第三章 实验研究第44-103页
 前言第44-46页
 实验研究一 人骨关节炎软骨细胞系建立与鉴定第46-56页
  1 材料和方法第46-49页
   ·主要试剂和仪器第46-47页
   ·标本来源与组织取材第47页
   ·OA软骨细胞的原代培养第47-48页
   ·传代第48页
   ·细胞贴壁观察第48页
   ·MTT法检测细胞增殖及绘制生长曲线第48页
   ·细胞来源鉴定第48-49页
  2 结果第49-53页
   ·细胞生长及形态特征第49-51页
   ·细胞贴壁特性第51-52页
   ·细胞增殖状态及生长曲线第52页
   ·细胞来源鉴定第52-53页
  3 讨论第53-55页
   ·软骨细胞是OA软骨破坏的靶细胞第53-54页
   ·OA软骨细胞有限细胞系建立及鉴定第54-55页
  4 结论第55页
  参考文献第55-56页
 实验研究二 人骨关节炎软骨细胞增殖、细胞周期及凋亡研究第56-63页
  1 材料和方法第56-58页
   ·主要试剂和仪器第56页
   ·标本来源与组织取材第56-57页
   ·软骨细胞体外培养第57页
   ·MTT法检测细胞增殖第57页
   ·PI法流式细胞术分析细胞周期第57页
   ·Annexin V法流式细胞术分析细胞凋亡第57页
   ·统计学处理第57-58页
  2 结果第58-60页
   ·OA软骨细胞的增殖特性第58页
   ·OA软骨细胞周期特点第58-59页
   ·OA软骨细胞凋亡率第59-60页
  3 讨论第60-62页
   ·OA软骨细胞增殖速度减慢第61页
   ·OA软骨细胞过度凋亡第61-62页
  4 结论第62-63页
 实验研究三 人骨关节炎软骨细胞IL-1β蛋白表达状况第63-71页
  1 材料和方法第63-66页
   ·主要试剂和仪器第63-64页
   ·标本来源与组织取材第64页
   ·软骨细胞体外培养第64页
   ·ELISA法检测细胞上清液中IL-1β含量第64页
   ·Western blot检测细胞因子IL-1β蛋白表达第64-66页
   ·统计学处理第66页
  2 结果第66-68页
   ·OA软骨细胞上清液中IL-1β含量检测第66-67页
   ·Western blot检测OA软骨细胞IL-1β蛋白表达第67-68页
  3 讨论第68-69页
   ·IL-1β与OA第68页
   ·IL-1β诱导软骨细胞凋亡第68-69页
   ·IL-1β促进软骨细胞的分解代谢第69页
   ·IL-1β可能通过诱导软骨细胞凋亡,促进其分解代谢,加速OA发展第69页
  4 结论第69-70页
  参考文献第70-71页
 实验研究四 人骨关节炎软骨细胞金属基质蛋白酶蛋白表达状况第71-76页
  1 材料和方法第71-72页
   ·主要试剂和仪器第71页
   ·标本来源与组织取材第71页
   ·软骨细胞体外培养第71-72页
   ·Western blot检测软骨细胞金属基质蛋白酶1、3、13的表达第72页
   ·统计学处理第72页
  2 结果第72-73页
   ·丽素红染色显示蛋白质转膜情况第72页
   ·OA软骨细胞MMP-1、3、13蛋白的表达第72-73页
  3 讨论第73-75页
   ·金属基质货白酶与OA第73-74页
   ·MMPs是参与OA软骨破坏的关键酶第74-75页
  4 结论第75页
  参考文献第75-76页
 实验研究五 牛膝健步颗粒对人骨关节炎软骨细胞增殖及凋亡的影响第76-86页
  1 材料和方法第76-77页
   ·主要试剂和仪器第76页
   ·标本来源、组织取材及软骨细胞体外培养第76页
   ·牛膝健步颗粒含药血清制备第76页
   ·实验分组与给药第76-77页
   ·CCK-8法检测细胞增殖第77页
   ·Annexin V法流式细胞术分析细胞凋亡第77页
   ·统计学处理第77页
  2 结果第77-79页
   ·牛膝健步颗粒对OA软骨细胞增殖的影响第77-78页
   ·牛膝健步颗粒对OA软骨细胞凋亡的影响第78-79页
  3 讨论第79-83页
   ·关于中药血清药理学第79-80页
   ·牛膝健步颗粒方药分析第80-83页
   ·牛膝健步颗粒促进OA软骨细胞增殖,抑制OA软骨细胞凋亡第83页
  4 结论第83-84页
  参考文献第84-86页
 实验研究六 牛膝健步颗粒对人骨关节炎软骨细胞IL-1β蛋白表达的影响第86-90页
  1 材料和方法第86-87页
   ·主要试剂和仪器第86页
   ·标本来源、组织取材与软骨细胞体外培养第86页
   ·牛膝健步颗粒含药血清制备第86页
   ·实验分组与给药第86页
   ·ELISA法检测细胞上清液中IL-1β含量第86页
   ·Western blot检测细胞因子IL-1β蛋白表达第86页
   ·统计学处理第86-87页
  2 结果第87-88页
   ·牛膝健步颗粒对OA软骨细胞上清液中IL-1β含量的影响第87页
   ·牛膝健步颗粒对OA软骨细胞IL-1β蛋白表达的影响第87-88页
  3 讨论第88-89页
   ·牛膝健步颗粒抑制OA软骨细胞IL-1β的分泌第88页
   ·牛膝健步颗粒抑制OA软骨细胞IL-1β蛋白表达第88-89页
  4 结论第89-90页
 实验研究七 牛膝健步颗粒对人骨关节炎软骨细胞金属基质蛋白酶表达的影响第90-93页
  1 材料和方法第90页
   ·主要试剂和仪器第90页
   ·标本来源、组织取材与软骨细胞体外培养第90页
   ·牛膝健步颗粒含药血清制备第90页
   ·实验分组与给药第90页
   ·Western blot检测软骨细胞MMPs蛋白表达第90页
   ·统计学处理第90页
  2 结果第90-92页
   牛膝健步颗粒对OA软骨细胞MMPs蛋白表达的影响第90-92页
  3 讨论第92页
   ·牛膝健步颗粒的前期研究第92页
   ·牛膝健步颗粒抑制OA软骨细胞MMPs蛋白表达第92页
  4 结论第92-93页
 实验研究八 淫羊藿苷对人骨关节炎软骨细胞增殖及凋亡的影响第93-96页
  1 材料和方法第93-94页
   ·主要试剂和仪器第93页
   ·标本来源、组织取材及软骨细胞体外培养第93页
   ·无菌淫羊藿苜溶液配制第93页
   ·实验分组与给药第93页
   ·CCK-8法检测细胞增殖第93页
   ·Annexin V法流式细胞术分析细胞凋亡第93页
   ·统计方法第93-94页
  2 结果第94-95页
   ·淫羊藿苷对OA软骨细胞增殖的影响第94页
   ·淫羊藿苷对OA软骨细胞凋亡的影响第94-95页
  3 讨论第95页
   ·淫羊藿主要化学成分第95页
   ·淫羊藿苷促进OA软骨细胞增殖,抑制OA软骨细胞凋亡第95页
  4 结论第95页
  参考文献第95-96页
 实验研究九 淫羊藿苷对人骨关节炎软骨细胞IL-1β及金属基质蛋白酶表达的影响第96-101页
  1 材料和方法第96-97页
   ·主要试剂和仪器第96页
   ·标本来源、组织取材与软骨细胞体外培养第96页
   ·无菌淫羊藿苷溶液配制第96页
   ·实验分组与给药第96页
   ·ELISA法检测细胞上清液中IL-1 β含量第96页
   ·Western blot检测细胞因子IL-1β及MMP-1、3、13蛋白表达第96页
   ·统计学处理第96-97页
  2 结果第97-99页
   ·淫羊藿苷对OA软骨细胞上清液中IL-1β含量的影响第97页
   ·淫羊藿苷对OA软骨细胞IL-1β蛋白表达的影响第97-98页
   ·淫羊藿苷对OA软骨细胞MMP-1、3、13蛋白表达的影响第98-99页
  3 讨论第99-100页
   ·淫羊藿对骨与关节疾病影响的药理研究概况第99-100页
   ·淫羊藿苷抑制OA软骨细胞细胞因子及细胞外基质蛋白的表达第100页
  4 结论第100页
  参考文献第100-101页
 实验研究小结第101-103页
结语第103-106页
致谢第106-108页
个人简历第108页

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