| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 1 前言 | 第17-42页 |
| ·艾美耳球虫研究进展 | 第17-18页 |
| ·球虫的发育过程 | 第18-19页 |
| ·微管蛋白的研究进展 | 第19-24页 |
| ·微管的装配过程 | 第19-20页 |
| ·微管相关蛋白 | 第20-21页 |
| ·微管特异性药物 | 第21页 |
| ·微管的功能 | 第21-22页 |
| ·寄生虫的微管蛋白的研究 | 第22-24页 |
| ·鸡球虫的主要抗原 | 第24-28页 |
| ·子孢子表面抗原 | 第24-25页 |
| ·微线蛋白抗原 | 第25-26页 |
| ·折光体蛋白抗原 | 第26页 |
| ·配殖生殖阶段抗原基因 | 第26-27页 |
| ·其它相关的抗原分子基因 | 第27-28页 |
| ·IL-18的研究现状 | 第28-33页 |
| ·IL-18的理化性质 | 第28-29页 |
| ·IL-18的免疫学活性 | 第29-30页 |
| ·鸡IL-18及其生物学活性 | 第30-33页 |
| ·宿主特异性免疫应答 | 第33-35页 |
| ·免疫反应在抗球虫感染中作用 | 第33页 |
| ·T淋巴细胞 | 第33-34页 |
| ·自然杀伤细胞和巨噬细胞 | 第34页 |
| ·体液免疫在抗球虫感染中作用 | 第34-35页 |
| ·鸡球虫疫苗研究进展 | 第35-40页 |
| ·鸡球虫病活疫苗 | 第35-37页 |
| ·鸡球虫病重组疫苗 | 第37-40页 |
| ·研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 2. 材料与方法 | 第42-66页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·病原及试验动物 | 第42页 |
| ·菌株及质粒 | 第42页 |
| ·主要工具酶及分子生物学试剂 | 第42页 |
| ·主要生化试剂 | 第42-43页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-65页 |
| ·堆型艾美尔球虫α-tubulin基因克隆及序列分析 | 第43-49页 |
| ·堆型艾美尔球虫α-tubulin基因的原核蛋白表达及纯化 | 第49-51页 |
| ·α-tubulin多克隆抗体制备和生物活性检测 | 第51-53页 |
| ·重组真核表达质粒PVAX-α-tubulin的构建 | 第53-54页 |
| ·PVAX-3-1E-linker-α--tubulin真核表达质粒的构建 | 第54-56页 |
| ·PVAX-3-1E-linker-α--tubulin融合基因真核表达质粒二级结构的预测分析 | 第56页 |
| ·重组质粒体外表达的检测 | 第56-59页 |
| ·试验动物分组及其处理 | 第59页 |
| ·试验材料采取及处理 | 第59-62页 |
| ·免疫器官T、B淋巴细胞增殖 | 第62页 |
| ·免疫雏鸡血液T、B淋巴细胞增殖试验 | 第62-63页 |
| ·免疫雏鸡免疫器官及血液T淋巴细胞亚型检测 | 第63页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血液中抗3-1E和α-tubulin的IgG抗体 | 第63-64页 |
| ·真核表达质粒对球虫感染的保护效果 | 第64-65页 |
| ·数据处理 | 第65-66页 |
| 3 试验结果 | 第66-101页 |
| ·RT-PCR扩增E. acervulina子孢子α-tubulin基因 | 第66-69页 |
| ·孢子化卵囊总RNA的提取 | 第66页 |
| ·堆型艾美尔球虫α-tubulin基因的扩增 | 第66-67页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-α-tubulin鉴定 | 第67页 |
| ·重组质粒pMD18-T-α-tubulin序列测定及二级结构预测分析 | 第67-69页 |
| ·堆型艾美耳球虫α-tubulin基因的原核表达及纯化 | 第69-72页 |
| ·α-tubulin基因的亚克隆 | 第69-70页 |
| ·原核表达质粒pET30a-α-tubulin的PCR及酶切鉴定 | 第70-71页 |
| ·α-tubulin基因原核蛋白表达及纯化 | 第71-72页 |
| ·堆型艾美耳球虫α-tubulin基因重组真核表达质粒的构建和鉴定 | 第72-73页 |
| ·重组质粒PVAX-α-tubulin的PCR和酶切鉴定 | 第72-73页 |
| ·重组质粒PVAX-α-tubulin的测序鉴定 | 第73页 |
| ·PVAX-3-1E-α-tubulin融合基因真核表达质粒的构建和鉴定 | 第73-77页 |
| ·PVAX-3-1E-α-tubulin基因推测表达蛋白特性软件预测结果 | 第73页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E-α-tubulin的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第73-75页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第75-77页 |
| ·重组质粒的体外表达 | 第77-79页 |
| ·重组质粒PVAX-α--tubulin体外瞬时表达 | 第77-79页 |
| ·重组质粒PVAX-3-1E-α-tubulin体外瞬时表达 | 第79页 |
| ·雏鸡免疫器官及外周血T、B淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第79-87页 |
| ·胸腺T淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第79-80页 |
| ·雏鸡外周血液T淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第80-82页 |
| ·雏鸡脾脏T淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第82-83页 |
| ·外周血B淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第83-85页 |
| ·脾脏B淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第85-87页 |
| ·雏鸡免疫器官及血液不同亚型T淋巴细胞数量动态变化 | 第87-96页 |
| ·雏鸡血液CD4~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第87-88页 |
| ·雏鸡胸腺CD4~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第88-90页 |
| ·雏鸡脾脏CD4~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第90-91页 |
| ·雏鸡血液CD8~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第91-93页 |
| ·雏鸡胸腺CD8~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第93-95页 |
| ·雏鸡脾脏CD8~+T淋巴细胞数量动态变化 | 第95-96页 |
| ·雏鸡外周血液抗E. acerulina IgG抗体含量动态变化 | 第96-97页 |
| ·真核表达质粒对球虫感染的保护效果 | 第97-101页 |
| ·雏鸡增重效果 | 第97-99页 |
| ·克粪便卵囊排出数(OPG)和十二指肠病变计分 | 第99页 |
| ·DNA疫苗免疫鸡对球虫感染的抗球虫指数(ACI) | 第99-101页 |
| 4 讨论 | 第101-112页 |
| ·3-1 E-linker-α-tubulin融合基因真核载体表达质粒的设计与构建 | 第102-103页 |
| ·α-tubulin多克隆抗体的制备及其生物学活性检测 | 第103页 |
| ·雏鸡核酸免疫的讨论与分析 | 第103-104页 |
| ·雏鸡免疫后T淋巴细胞增殖功能变化结果分析 | 第104-105页 |
| ·免疫后血液和脾脏B淋巴细胞增殖功能动态变化结果分析 | 第105-106页 |
| ·雏鸡免疫后和感染E. acevulina后不同亚型T细胞动态变化结果分析 | 第106-109页 |
| ·雏鸡免疫后CD4~+T淋巴细胞亚型数量变化 | 第107页 |
| ·雏鸡免疫后CD8~+T淋巴细胞亚型数量变化 | 第107-108页 |
| ·雏鸡感染E. acevvulina后CD4~+、CD8~+T细胞亚型数量变化 | 第108-109页 |
| ·雏鸡外周血液抗E. acervulina IgG抗体含量动态变化结果分析 | 第109-110页 |
| ·重组质粒抗球虫免疫效果 | 第110-112页 |
| 5 结论 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-125页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第125页 |
