| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-30页 |
| ·植物启动子研究进展 | 第13-22页 |
| ·植物基因启动子核心结构及其功能 | 第14页 |
| ·植物启动子的类型 | 第14-18页 |
| ·组成型启动子 | 第14-15页 |
| ·组织特异型启动子 | 第15-18页 |
| ·诱导型启动子 | 第18页 |
| ·启动子克隆方法 | 第18-19页 |
| ·启动子效率的检测及活性比较 | 第19-22页 |
| ·组织化学定位法 | 第20页 |
| ·分光光度法 | 第20-21页 |
| ·荧光分析法 | 第21页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳原位分析 | 第21-22页 |
| ·植物转录因子的研究进展 | 第22-26页 |
| ·植物转录因子的结构 | 第22-24页 |
| ·DNA 结合区(DNA-binding domain) | 第22-23页 |
| ·转录调控区(activation domain) | 第23页 |
| ·核定位信号（nuclear localization signal） | 第23-24页 |
| ·寡聚化位点(oligomerization site) | 第24页 |
| ·植物转录因子的分类 | 第24-26页 |
| ·根据结构的分类 | 第24-25页 |
| ·根据作用方式的分类 | 第25-26页 |
| ·植物转录因子基因分离与功能鉴定方法 | 第26页 |
| ·AP2/EREBP 类转录因子的功能及其相关基因的研究 | 第26-30页 |
| ·调控植物的生长发育 | 第27-28页 |
| ·调控植物的抗逆反应 | 第28-30页 |
| ·研究的目的意义 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-46页 |
| ·花生启动子功能鉴定试验 | 第30-41页 |
| ·试验材料 | 第30-32页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌种与质粒 | 第30-31页 |
| ·供试培养基 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·试验引物 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-41页 |
| ·农杆菌 LBA4404 的转化及鉴定 | 第32-33页 |
| ·拟南芥种植 | 第33页 |
| ·农杆菌的准备 | 第33-34页 |
| ·转化拟南芥 | 第34页 |
| ·T0代拟南芥种子的筛选 | 第34页 |
| ·转基因拟南芥的 PCR 检测 | 第34-36页 |
| ·纯合的转基因拟南芥获得 | 第36页 |
| ·转基因拟南芥植株 GUS 组织化学染色分析 | 第36页 |
| ·转基因拟南芥中 GUS 基因表达的定量分析 | 第36-38页 |
| ·转基因拟南芥转录水平 GUS 基因表达差异分析 | 第38-41页 |
| ·花生 WRI1 基因的克隆及序列分析 | 第41-46页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·数据来源及生物信息学分析软件 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-46页 |
| ·花生 WRI1 基因的电子克隆及引物设计 | 第42页 |
| ·花生幼果总 RNA 的提取 | 第42-43页 |
| ·总 RNA 的检测 | 第43页 |
| ·所提取 RNA 的逆转录 | 第43页 |
| ·目的基因 AhWRI1 的 RT-PCR | 第43-44页 |
| ·目的基因的胶回收 | 第44页 |
| ·目的片段与 pEASY-T_1载体连接并转化大肠杆菌 | 第44-45页 |
| ·阳性重组子鉴定和测序 | 第45-46页 |
| ·序列分析 | 第46页 |
| ·花生 WRI1 基因拼接序列分析 | 第46页 |
| ·花生 WRI1 基因扩增序列分析 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-71页 |
| ·转基因拟南芥植株获得 | 第46-47页 |
| ·含 Oleosin 启动子拟南芥中 GUS 基因表达的定量分析 | 第47-51页 |
| ·转基因拟南芥中 GUS 酶活力差异分析 | 第47-50页 |
| ·BSA 标准曲线的制备 | 第47-48页 |
| ·荧光标准曲线的制备 | 第48页 |
| ·不同组织 GUS 酶活力差异分析 | 第48-50页 |
| ·转基因拟南芥中 GUS 基因转录水平表达量的差异分析 | 第50-51页 |
| ·拟南芥 RNA 的提取和 cDNA 链的合成 | 第50页 |
| ·转录水平 GUS 基因表达量差异分析 | 第50-51页 |
| ·含 Ara h1 启动子拟南芥中 GUS 基因表达的定量分析 | 第51-53页 |
| ·转基因拟南芥中 GUS 酶活力差异分析 | 第51-52页 |
| ·转录水平 GUS 基因表达量差异分析 | 第52-53页 |
| ·含 CaMV 35S 启动子拟南芥中 GUS 基因表达的定量分析 | 第53-55页 |
| ·转基因拟南芥中 GUS 酶活力差异分析 | 第53-54页 |
| ·转录水平 GUS 基因表达量差异分析 | 第54-55页 |
| ·三种启动子表达特性比较 | 第55-56页 |
| ·Oleosin 启动子与 CaMV 35S 启动子表达的组织特异性比较 | 第55-56页 |
| ·含不同启动子的转基因拟南芥 GUS 酶活力比较 | 第56页 |
| ·花生 WRI1 基因的克隆及序列分析 | 第56-71页 |
| ·花生 WRI1 基因的 in silico 分析 | 第56-63页 |
| ·AhWRI1 电子克隆序列 | 第56-58页 |
| ·AhWRI1 蛋白同源性分析 | 第58-59页 |
| ·AhWRI1 蛋白的理化性质 | 第59-60页 |
| ·AhWRI1 蛋白信号肽预测及亚细胞定位分析 | 第60页 |
| ·AhWRI1 蛋白结构域分析及功能预测 | 第60-61页 |
| ·AhWRI1 蛋白二级结构及三级结构预测分析 | 第61-62页 |
| ·AhWRI1 蛋白的固有无序化分析 | 第62-63页 |
| ·花生总 RNA 的提取及逆转录 | 第63页 |
| ·花生 WRI1 基因的 RT-PCR 扩增 | 第63-64页 |
| ·花生 WRI1 基因 RT-PCR 扩增序列分析 | 第64-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达特性分析 | 第71页 |
| ·利用转基因拟南芥检测启动子表达特性的分析 | 第71-72页 |
| ·利用电子克隆技术克隆花生 WRI1 基因 | 第72-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| ·获得含三种启动子的转基因拟南芥株系 | 第73页 |
| ·花生 Oleosin 启动子的表达特性 | 第73页 |
| ·花生 Ara h1 启动子的表达特性 | 第73页 |
| ·花生 WRI1 基因的电子克隆及序列分析 | 第73-74页 |
| 6 后续研究工作 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录 1：主要化学试剂及缓冲液配制 | 第81-83页 |
| 附录 2：常用培养基配方 | 第83-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第86页 |
