| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-22页 |
| ·鸡球虫病的危害及防治现状 | 第16-18页 |
| ·鸡球虫基因工程苗的研究进展 | 第18-19页 |
| ·真核翻译起始因子 3（eIF3）的研究概况 | 第19-22页 |
| 第二章 EteIF3d 基因的克隆及其生物信息学分析 | 第22-49页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·材料与方法 | 第22-37页 |
| ·实验动物及动物房处理 | 第22页 |
| ·虫株的来源与保存 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·柔嫩艾美耳球虫不同发育虫体的收集和纯化 | 第25-27页 |
| ·柔嫩艾美耳球虫子孢子总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·ZB7-B08 基因的 3′和 5′ RACE 扩增 | 第28-31页 |
| ·PCR 目的产物的回收 | 第31-32页 |
| ·回收目的片段与 T-easy 载体的连接与转化 | 第32页 |
| ·阳性克隆的 PCR 鉴定及测序 | 第32-33页 |
| ·目的基因全长序列的拼接及扩增 | 第33-34页 |
| ·目的基因全长 cDNA 的克隆及测序 | 第34页 |
| ·用生物信息学软件对目的基因编码的蛋白进行分析 | 第34页 |
| ·Real-time PCR 方法分析 EteIF3d 基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段的表达情况 | 第34-37页 |
| ·结果 | 第37-47页 |
| ·柔嫩艾美耳球虫未孢子化、孢子化卵囊、子孢子以及第二代裂殖子的纯化 | 第37-38页 |
| ·柔嫩艾美耳球虫发育各阶段的总 RNA 提取结果 | 第38页 |
| ·ZB7-B08 基因全长 cDNA 序列的获取 | 第38-39页 |
| ·ZB7-B08 全长 cDNA 序列的生物信息学分析 | 第39-46页 |
| ·目的基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段表达差异性 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 EteIF3d 基因的原核表达与虫体入侵发育相关研究 | 第49-67页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·材料和方法 | 第49-59页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·虫株来源 | 第49页 |
| ·质粒、菌种以及实验细胞 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·试剂配制 | 第50-53页 |
| ·目的基因重组质粒以及空载体质粒的提取 | 第53页 |
| ·含酶切位点的 EteIF3d 基因序列的克隆 | 第53-54页 |
| ·目的基因重组质粒及空载体双酶切 | 第54页 |
| ·EteIF3d 基因的原核表达载体构建 | 第54页 |
| ·重组蛋白的原核表达、鉴定及纯化 | 第54-56页 |
| ·柔嫩艾美耳球虫子孢子、EteIF3d 重组蛋白兔抗血清的制备 | 第56-57页 |
| ·EteIF3d 重组蛋白抗原性分析 | 第57页 |
| ·EteIF3d 基因在柔嫩艾美耳球虫发育各阶段的免疫荧光定位 | 第57-58页 |
| ·EteIF3d 多抗血清对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵的抑制作用 | 第58-59页 |
| ·结果 | 第59-65页 |
| ·原核表达重组质粒的构建 | 第59-60页 |
| ·EteIF3d 重组蛋白的表达 | 第60-61页 |
| ·EteIF3d 包涵体的纯化 | 第61-62页 |
| ·重组蛋白的 Western-blot 分析 | 第62页 |
| ·EteIF3d 基因的体外荧光定位 | 第62-64页 |
| ·EteIF3d 抗血清对柔嫩艾美耳球虫子孢子入侵细胞的抑制作用 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 EteIF3d 基因编码的重组蛋白对鸡球虫的免疫保护实验 | 第67-83页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料和方法 | 第67-71页 |
| ·实验动物及管理 | 第67页 |
| ·虫株来源 | 第67-68页 |
| ·EteIF3d 重组蛋白的大量制备及乳化 | 第68页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第68页 |
| ·实验分组及时间安排 | 第68页 |
| ·免疫过程中的增重变化 | 第68-69页 |
| ·免疫过程中卵囊产量变化 | 第69页 |
| ·盲肠病变计分 | 第69页 |
| ·体液免疫水平的免疫效果检测 | 第69-70页 |
| ·细胞免疫水平的相关检测 | 第70-71页 |
| ·结果 | 第71-79页 |
| ·免疫增重效果 | 第71-72页 |
| ·盲肠病变记分 | 第72-73页 |
| ·卵囊产量 | 第73页 |
| ·体液免疫效果评价 | 第73-74页 |
| ·细胞免疫效果评价 | 第74-79页 |
| ·讨论 | 第79-83页 |
| 第五章 EteIF3d 基因的酵母真核表达载体构建及其表达分析 | 第83-93页 |
| ·引言 | 第83页 |
| ·材料与方法 | 第83-89页 |
| ·材料 | 第83-85页 |
| ·方法 | 第85-89页 |
| ·结果 | 第89-91页 |
| ·EteIF3d 基因的克隆 | 第89页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第89-90页 |
| ·EteIF3d 的诱导表达 | 第90页 |
| ·目的基因编码蛋白的 Western-blot 检测 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| 第六章 全文结论 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 作者简历 | 第103-104页 |
