目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-21页 |
·转录因子 | 第13页 |
·WRKY转录因子的结构特征 | 第13-15页 |
·WRKY转录因子的结构与分类 | 第13-14页 |
·WRKY结构域与W-box的结合 | 第14-15页 |
·WRKY转录因子的表达 | 第15-16页 |
·WRKY转录因子的生物学功能 | 第16-18页 |
·WRKY转录因子参与植物生物胁迫反应 | 第16-17页 |
·WRKY转录因子参与植物非生物胁迫反应 | 第17页 |
·WRKY转录因子参与植物生长发育 | 第17-18页 |
·基因表达谱研究方法 | 第18-20页 |
·RT-PCR | 第18-19页 |
·Northern印迹杂交 | 第19页 |
·cDNA微阵列技术 | 第19页 |
·实时荧光定量PCR | 第19-20页 |
·研究目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-29页 |
·实验材料 | 第21-23页 |
·植物材料 | 第21页 |
·菌株、质粒与毒源 | 第21页 |
·试剂与仪器 | 第21-22页 |
·所用引物及其序列 | 第22-23页 |
·所用软件及网址 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-29页 |
·番木瓜WRKY基因编码序列的推测 | 第23页 |
·荧光定量PCR引物的设计 | 第23页 |
·番木瓜苗的种植 | 第23-24页 |
·番木瓜幼苗处理 | 第24页 |
·Trizol法提取番木瓜RNA | 第24页 |
·荧光定量PCR | 第24-26页 |
·模板cDNA的合成 | 第24-25页 |
·荧光定量PCR | 第25-26页 |
·番木瓜TF_(807.3)基因的克隆 | 第26-27页 |
·PCR克隆 | 第26页 |
·目的片段AT克隆 | 第26-27页 |
·转化大肠杆菌及阳性克隆的筛选 | 第27页 |
·植物表达载体pCAMBIA3300-TF_(807.3)的构建 | 第27页 |
·重组质粒pCAMBIA3300-TF_(807.3)转化根癌农杆菌 | 第27-28页 |
·根癌农杆菌渗入实验 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-42页 |
·推测的番木瓜WRKY基因编码序列的获得及其分类 | 第29-33页 |
·番木瓜WRKY转录因子受胁迫诱导后的基因表达谱 | 第33-38页 |
·荧光定量PCR引物反应条件及扩增效率的确定 | 第33-34页 |
·SA诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第34页 |
·低温诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第34-35页 |
·创伤诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第35-36页 |
·干旱诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第36页 |
·病原侵染诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第36-38页 |
·番木瓜基因TF_(807.3)的获得 | 第38-39页 |
·番木瓜TF_(807.3)基因的表达模式 | 第39-40页 |
·番木瓜基因TF_(807.3)的功能分析 | 第40-42页 |
·番木瓜基因TF_(807.3)超表达载体的获得 | 第40-41页 |
·农杆菌介导的番木瓜瞬时转化体系中TF_(807.3)的功能研究 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-46页 |
·番木瓜WRKY转录因子的分类与结构 | 第42页 |
·番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱 | 第42-43页 |
·TF_(807.3)基因的功能分析 | 第43-44页 |
·荧光定量PCR实验的影响因素 | 第44-45页 |
·下一步工作与展望 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附录1 常用溶液和培养基的配制 | 第52页 |
附录2 DNA片段凝胶回收 | 第52-53页 |
附录3 大肠杆菌感受态细胞的制备及目的质粒转化 | 第53页 |
附录4 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第53-54页 |
附录5 DNA的乙醇沉淀纯化 | 第54页 |
附录6 番木瓜(日升)TF_(807.3)基因编码区序列 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |