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番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱及其功能的初步研究

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-21页
   ·转录因子第13页
   ·WRKY转录因子的结构特征第13-15页
     ·WRKY转录因子的结构与分类第13-14页
     ·WRKY结构域与W-box的结合第14-15页
   ·WRKY转录因子的表达第15-16页
   ·WRKY转录因子的生物学功能第16-18页
     ·WRKY转录因子参与植物生物胁迫反应第16-17页
     ·WRKY转录因子参与植物非生物胁迫反应第17页
     ·WRKY转录因子参与植物生长发育第17-18页
   ·基因表达谱研究方法第18-20页
     ·RT-PCR第18-19页
     ·Northern印迹杂交第19页
     ·cDNA微阵列技术第19页
     ·实时荧光定量PCR第19-20页
   ·研究目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-29页
   ·实验材料第21-23页
     ·植物材料第21页
     ·菌株、质粒与毒源第21页
     ·试剂与仪器第21-22页
     ·所用引物及其序列第22-23页
     ·所用软件及网址第23页
   ·实验方法第23-29页
     ·番木瓜WRKY基因编码序列的推测第23页
     ·荧光定量PCR引物的设计第23页
     ·番木瓜苗的种植第23-24页
     ·番木瓜幼苗处理第24页
     ·Trizol法提取番木瓜RNA第24页
     ·荧光定量PCR第24-26页
       ·模板cDNA的合成第24-25页
       ·荧光定量PCR第25-26页
     ·番木瓜TF_(807.3)基因的克隆第26-27页
       ·PCR克隆第26页
       ·目的片段AT克隆第26-27页
       ·转化大肠杆菌及阳性克隆的筛选第27页
     ·植物表达载体pCAMBIA3300-TF_(807.3)的构建第27页
     ·重组质粒pCAMBIA3300-TF_(807.3)转化根癌农杆菌第27-28页
     ·根癌农杆菌渗入实验第28-29页
3 结果与分析第29-42页
   ·推测的番木瓜WRKY基因编码序列的获得及其分类第29-33页
   ·番木瓜WRKY转录因子受胁迫诱导后的基因表达谱第33-38页
     ·荧光定量PCR引物反应条件及扩增效率的确定第33-34页
     ·SA诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第34页
     ·低温诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第34-35页
     ·创伤诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第35-36页
     ·干旱诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第36页
     ·病原侵染诱导后番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第36-38页
   ·番木瓜基因TF_(807.3)的获得第38-39页
   ·番木瓜TF_(807.3)基因的表达模式第39-40页
   ·番木瓜基因TF_(807.3)的功能分析第40-42页
     ·番木瓜基因TF_(807.3)超表达载体的获得第40-41页
     ·农杆菌介导的番木瓜瞬时转化体系中TF_(807.3)的功能研究第41-42页
4 讨论第42-46页
   ·番木瓜WRKY转录因子的分类与结构第42页
   ·番木瓜WRKY转录因子的基因表达谱第42-43页
   ·TF_(807.3)基因的功能分析第43-44页
   ·荧光定量PCR实验的影响因素第44-45页
   ·下一步工作与展望第45-46页
参考文献第46-52页
附录1 常用溶液和培养基的配制第52页
附录2 DNA片段凝胶回收第52-53页
附录3 大肠杆菌感受态细胞的制备及目的质粒转化第53页
附录4 大肠杆菌质粒DNA的提取第53-54页
附录5 DNA的乙醇沉淀纯化第54页
附录6 番木瓜(日升)TF_(807.3)基因编码区序列第54-55页
致谢第55页

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