摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-7页 |
引言 | 第7-8页 |
第一章 人HepG2细胞的培养及传代 | 第8-12页 |
一:材料 | 第8-9页 |
1、实验对象 | 第8页 |
2、主要实验仪器及耗材 | 第8页 |
3、玻璃器皿处理 | 第8-9页 |
4、实验所用试剂及配制方法 | 第9页 |
二:方法 | 第9-12页 |
1、细胞的复苏 | 第9页 |
2、细胞的计数 | 第9页 |
3、细胞的培养及传代 | 第9-10页 |
4、细胞形态学观察 | 第10页 |
5、细胞的冻存 | 第10-12页 |
第二章 血管紧张素Ⅱ诱导VEGF mRNA在人肝癌细胞中的表达 | 第12-24页 |
一:材料 | 第12-13页 |
1、实验对象 | 第12页 |
2、实验所用试剂(盒)、药品 | 第12页 |
3、实验所用仪器 | 第12-13页 |
4、PCR引物序列 | 第13页 |
二:方法 | 第13-20页 |
1、AT1R受体的检测 | 第13-16页 |
·HepG2细胞总RNA的提取 | 第13页 |
·RNA纯度的检测 | 第13-14页 |
·RNA完整性的检测 | 第14页 |
·RNA逆转录为cDNA | 第14-15页 |
·cDNA的扩增 | 第15页 |
·PCR产物的电泳、拍照 | 第15-16页 |
2、MTT法检测不同时间、不同浓度药物处理后HepG2细胞的增殖 | 第16-17页 |
·实验分组及药物处理 | 第16页 |
·MTT法检测各处理组增殖情况 | 第16-17页 |
3、RT-PCR半定量法检测不同时间、不同浓度药物处理后VEGF mRNA表达的变化 | 第17-19页 |
·RT-PCR半定量法原理 | 第17页 |
·实验分组及药物处理 | 第17页 |
·RNA的提取、检测 | 第17-18页 |
·RNA的逆转录 | 第18页 |
·cDNA的扩增(PCR) | 第18-19页 |
·PCR产物的电泳及电泳图片的分析 | 第19页 |
4、统计学处理 | 第19-20页 |
三:结果 | 第20-24页 |
1、AT1R受体的检测 | 第20页 |
2、MTT法检测结果 | 第20页 |
3、RT-PCR半定量法检测结果 | 第20-24页 |
·不同浓度AngⅡ处理HepG2细胞后VEGF mRNA的表达 | 第20-21页 |
·AngⅡ处理不同时间后HepG2细胞VEGFmRNA的表达 | 第21-24页 |
讨论 | 第24-26页 |
结论 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-29页 |
综述 | 第29-41页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第41-42页 |
附录 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-46页 |