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猪伪狂犬病病毒FZJX株的分离鉴定及TK基因的克隆与序列分析

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 前言第12-25页
 1 伪狂犬病的分布情况第12页
 2 伪狂犬病病毒的理化特性第12-13页
 3 伪狂犬病病毒分子生物学特性第13-18页
   ·伪狂犬病病毒的基因组结构第14-15页
   ·伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白第15-16页
     ·必需糖蛋白第15-16页
     ·非必需糖蛋白第16页
   ·与伪狂犬病毒毒力相关的基因及蛋白第16-17页
   ·伪狂犬病病毒的复制第17-18页
 4 伪狂犬病病毒的潜伏感染第18-19页
 5 伪狂犬病的流行病学第19页
 6 伪狂犬病的发病机理第19页
 7 伪狂犬病的临床症状第19-20页
 8 伪狂犬病的诊断第20-21页
   ·PRV 的分离鉴定第20页
   ·PRV 的血清学诊断第20页
   ·PRV 核酸的PCR 诊断第20-21页
   ·PRV 核酸杂交诊断第21页
 9 伪狂犬病病毒疫苗的研究进展第21-24页
   ·传统疫苗第21页
   ·基因缺失疫苗(单基因缺失疫苗、双/多基因缺失疫苗)第21-22页
   ·重组疫苗第22-23页
     ·以腺病毒为载体第22页
     ·以痘病毒为载体第22-23页
       ·以痘苗病毒为载体第22页
       ·以猪痘病毒为载体第22-23页
     ·以传染性鼻气管炎病毒为载体第23页
     ·以伪狂犬病病毒为载体第23页
   ·亚单位疫苗第23页
   ·基因疫苗第23-24页
 10 本项目研究的目的和意义第24-25页
第二章 材料和方法第25-35页
 1 试验材料第25-26页
   ·主要试剂第25页
   ·试验动物第25页
   ·其它第25-26页
   ·主要仪器第26页
 2 试验内容与方法第26-35页
   ·样品的采集与处理第26页
   ·病毒的分离与传代第26-27页
   ·病毒的鉴定第27-31页
     ·病毒的电镜观察第27页
       ·病毒的细胞切片电镜观察第27页
       ·病毒的负染电镜观察第27页
     ·病毒的血凝试验第27-28页
     ·鸡胚接毒试验第28页
     ·易感动物接毒试验第28-29页
       ·家兔接毒试验第28页
       ·小白鼠接毒试验第28页
       ·仔猪接毒试验第28-29页
     ·病毒核酸的PCR 鉴定第29-31页
       ·病毒DNA 的提取第29页
       ·TK 基因的引物设计第29-30页
       ·TK 基因的PCR 扩增第30-31页
   ·TK 基因的克隆第31-33页
     ·PCR 产物的纯化第31页
     ·DH5α感受态细胞的制备第31-32页
     ·PMD18-T 载体与纯化PCR 产物的连接第32页
     ·连接产物转化DH5α感受态细胞第32页
     ·重组质粒DNA 的提取(采用质粒提取试剂盒)第32-33页
     ·重组质粒的酶切鉴定第33页
   ·TK 基因的序列测定与序列分析第33-35页
第三章 试验结果第35-53页
 1 病毒的分离与传代第35-36页
 2 病毒的电镜观察第36-37页
   ·病毒的细胞切片电镜观察第36页
   ·病毒的负染电镜观察第36-37页
 3 病毒的血凝试验第37页
 4 鸡胚接毒试验第37-38页
 5 易感动物的接毒试验第38-39页
   ·家兔接毒试验第38页
   ·小白鼠接毒试验第38页
   ·仔猪接毒试验第38-39页
 6 病毒核酸的PCR 鉴定第39-40页
 7 重组质粒的酶切鉴定第40页
 8 TK 基因的序列测定与序列分析第40-48页
   ·TK 基因序列的测定及比对第40-47页
   ·TK 基因序列的同源性比较第47页
   ·TK 基因序列的进化树分析第47-48页
 9 TK 基因推导氨基酸的序列分析第48-53页
   ·TK 基因推导氨基酸序列的比对第48-52页
   ·TK 基因推导氨基酸序列的同源性比较第52页
   ·TK 基因推导氨基酸序列的进化树分析第52-53页
第四章 分析与讨论第53-59页
 1 病毒的分离与传代第53页
 2 病毒的电镜观察第53-54页
 3 病毒的血凝试验第54页
 4 鸡胚接毒试验第54-55页
 5 家兔接毒试验第55页
 6 小白鼠接毒试验第55页
 7 仔猪接毒试验第55-56页
 8 病毒核酸的PCR 鉴定第56-57页
 9 TK 基因的序列分析第57-58页
 10 PRV 的致痒性分析第58-59页
第五章 小结第59-60页
参考文献第60-65页
附 各种相关试剂配制第65-67页
致谢第67页

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