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磷氮霉素生物合成基因簇中的调控基因的功能研究及几个结构基因的改造

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-12页
论文目录第12-14页
1 前言第14-24页
   ·组合生物合成简介第14-16页
     ·磷氮霉素简介及国内外研究现状第16-20页
     ·磷氮霉素的简介第16-18页
     ·磷氮霉素类化合物的国内外研究进展第18-20页
   ·本课题组关于磷氮霉素的前期研究进展及研究意义第20-24页
2 材料与方法第24-42页
   ·实验材料第24-30页
     ·菌株及构建突变株第24-25页
     ·质粒与粘粒第25-26页
     ·实验室常用仪器第26-27页
     ·常用溶液、缓冲液及培养基配制第27-29页
     ·其他第29-30页
   ·实验方法第30-42页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳及 DNA 片段的纯化第30-31页
     ·目标基因的 PCR 及 PCR 产物的克隆第31-32页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第32-33页
     ·大肠杆菌质粒 DNA 的提取第33-34页
     ·有关链霉菌 S.platensis SAM-0654 的基本操作第34-35页
     ·链霉菌 S.platensis SAM-0654 和 E.coli ET12567 之间的属间接合转移第35-36页
     ·原位杂交第36-38页
     ·与 RT-PCR 相关的实验操作第38-40页
     ·链霉菌 S.platensis SAM-0654 的发酵及发酵后检测第40-41页
     ·研究过程中的序列分析第41-42页
3 结果与讨论第42-64页
   ·磷氮霉素生物合成基因簇的补全第42-48页
     ·PNs 与 PLMs 生物合成基因簇的对比第42-43页
     ·补全与 P450 相关的基因簇第43-48页
   ·磷氮霉素生物合成基因簇中调控基因 pnR2 的研究第48-60页
     ·调控基因 pnR2 的前期研究第48-50页
     ·调控基因 pnR2 的回补第50-55页
     ·野生型中增加 pnR2 拷贝第55-57页
     ·pnR2 基因的调控机制研究第57-60页
   ·磷氮霉素生物合成基因簇中结构基因的改造第60-64页
     ·起始功能域(LD)的替换第60-61页
     ·硫酯酶功能域(TE)的替换第61-64页
4 总结与展望第64-66页
   ·总结第64-65页
   ·展望第65-66页
5 致谢第66-68页
6 参考文献第68-70页
附录第70-73页
 附录一第70-72页
 附录二第72-73页

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