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亲和层析介质的制备及其对家蝇GABA受体的分离纯化

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 前言第11-27页
   ·GABA受体概述第11-14页
     ·哺乳动物GABA受体与昆虫GABA受体第11-13页
     ·家蝇GABA受体的研究进展第13-14页
   ·GABA受体的分离纯化方法第14-23页
     ·去污剂对GABA受体分离的影响第14-17页
     ·GABA受体的分离纯化方法第17-23页
       ·沉淀法第17-18页
       ·密度梯度离心法第18页
       ·凝胶过滤法第18页
       ·亲和色谱法第18-20页
       ·离子交换色谱法第20页
       ·羟基磷灰石色谱第20-21页
       ·多种分离纯化方法的联合使用第21页
       ·受体的分离纯化方法评述第21-23页
   ·亲和层析介质的制备第23-25页
     ·亲和层析介质的组成第23-24页
     ·基质的活化方法第24-25页
   ·论文的研究内容、目的及意义第25-27页
     ·本论文研究目的及意义第25页
     ·本论文研究内容第25-27页
第二章 亲和层析介质的制备第27-42页
   ·实验材料与设备第27-28页
     ·实验材料第27-28页
     ·实验设备第28页
   ·实验方法第28-35页
     ·基质的活化第28-31页
       ·1,4-丁二醇二缩水甘油醚活化Sepharose 6B第28-29页
       ·活化温度对Sepharose 6B环氧基修饰密度的影响第29页
       ·活化时间对Sepharose 6B环氧基修饰密度的影响第29页
       ·1,4-丁二醇二缩水甘油醚用量对Sepharose 6B环氧基修饰密度的影响第29-30页
       ·NaOH浓度和DMSO对Sepharose 6B环氧基修饰密度的影响第30页
       ·环氧基修饰密度的测定第30-31页
     ·亲和配体的偶联第31-35页
       ·配体的筛选第31-33页
       ·Ro7-1986/1与活化后Sepharose 6B的偶联第33-34页
       ·偶联后介质中残余环GABA基的封闭第34页
       ·配体偶联密度的测定第34页
       ·介质平均粒径分布及测定第34-35页
       ·介质的扫描电子显微镜及能谱分析第35页
   ·结果与讨论第35-41页
     ·DMSO和NaOH浓度对活化效率的影响第35-36页
     ·活化温度对活化效率的影响第36页
     ·活化时间对活化效率的影响第36-37页
     ·1,4-丁二醇二缩水甘油醚用量对活化效率的影响第37页
     ·环GABA基修饰密度与配体偶联密度第37-38页
       ·环GABA基修饰密度修饰密度的确定第38页
       ·配体偶联密度的确定第38页
     ·介质的表征第38-41页
       ·样品的形貌分析第38-39页
       ·样品的能谱分析第39-40页
       ·样品的粒径分布图第40-41页
   ·小结第41-42页
第三章 家蝇脑组织内GABA受体的分离与纯化第42-54页
   ·实验材料与仪器第42-44页
     ·实验材料第42-43页
       ·供试家蝇第42页
       ·试剂第42-43页
       ·缓冲液第43页
     ·实验仪器第43-44页
   ·实验方法第44-48页
     ·GABA受体粗提液的制备第44页
     ·GABA受体粗提液的浓缩第44页
     ·GABA受体制剂的超滤第44页
     ·亲和层析纯化GABA受体第44页
     ·GABA受体的离子交换层析第44-45页
     ·Sephadex G-200凝胶过滤分离纯化受体蛋白第45页
     ·蛋白质浓度测定第45-46页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第46-48页
       ·缓冲液的配制第46-47页
       ·凝胶的制备第47-48页
       ·制备样品和上样第48页
       ·电泳及考马斯亮蓝染色第48页
   ·结果与讨论第48-53页
     ·GABA受体粗提液的制备第48-49页
     ·GABA受体粗提液的超滤第49-50页
     ·亲和层析分离纯化GABA受体第50-51页
     ·DEAE-Sephacel离子交换层析分离纯化GABA受体第51-52页
     ·Sephadex G-200凝胶过滤分离纯化GABA受体第52-53页
     ·蛋白回收率第53页
   ·小结第53-54页
第四章 结论、展望与创新点第54-56页
   ·结论第54页
   ·展望第54-55页
   ·创新点第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-65页
作者简介第65页
专利及论文发表情况第65页

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