摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
主要符号对照表 | 第7-8页 |
第1章 前言 | 第8-13页 |
·选题意义 | 第8-10页 |
·国内外研究进展 | 第10-13页 |
·LRRK2 的功能研究 | 第10-12页 |
·本课题研究内容 | 第12-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-18页 |
·材料 | 第13-15页 |
·引物合成 | 第13页 |
·质粒及感受态细胞 | 第13页 |
·分子生物学工具酶 | 第13页 |
·分子生物学试剂盒 | 第13-14页 |
·培养基的配制 | 第14页 |
·仪器设备 | 第14-15页 |
·方法 | 第15-18页 |
·质粒提取 | 第15页 |
·酶切片段及 PCR 反应产物的回收 | 第15-16页 |
·转化 DH5a 大肠杆菌 | 第16-17页 |
·DNA 测序 | 第17-18页 |
第3章 大肠杆菌中 LRRK2 功能区域的表达(pET-32b 载体) | 第18-25页 |
·引言 | 第18页 |
·研究内容 | 第18-22页 |
·pET-32b-LLC 大肠杆菌表达系统的构建 | 第18-21页 |
·重组质粒的鉴定 | 第21页 |
·目的蛋白的试表达 | 第21-22页 |
·可溶性蛋白的检测 | 第22页 |
·实验结果 | 第22-23页 |
·pET-32b-LLC 质粒的构建 | 第22-23页 |
·LLC 的表达 | 第23页 |
·结论与讨论 | 第23-25页 |
第4章 大肠杆菌中 LLC 的表达(pE-SUMOstar 载体) | 第25-33页 |
·引言 | 第25-26页 |
·研究内容 | 第26-30页 |
·pE-SUMOstar-LLC 大肠杆菌表达系统的构建 | 第26-29页 |
·目的蛋白的试表达 | 第29页 |
·可溶性 LLC 蛋白的检测 | 第29-30页 |
·实验结果 | 第30-31页 |
·pE-SUMOstar-LLC 质粒的构建 | 第30页 |
·LLC 的表达 | 第30-31页 |
·结论与讨论 | 第31-33页 |
第5章 Sf21 细胞中 LLC 的表达 | 第33-44页 |
·引言 | 第33-35页 |
·研究内容 | 第35-40页 |
·LLC 蛋白真核表达体系构建 | 第35-37页 |
·Gateway LR 重组反应及重组杆状病毒质粒的检测 | 第37-38页 |
·转染 Sf21 昆虫细胞 | 第38-39页 |
·收集病毒及病毒的扩增 | 第39-40页 |
·LLC 表达的检测 | 第40页 |
·实验结果 | 第40-42页 |
·真核表达体系构建 | 第40-41页 |
·Sf21 细胞的转染 | 第41-42页 |
·LLC 蛋白的试表达 | 第42页 |
·结论与讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第47页 |