摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
縮略词 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 ERβ短发夹状RNAi表达载体的构建与鉴定 | 第16-36页 |
·材料和试剂 | 第16-18页 |
·实验方法 | 第18-29页 |
·设计ERβ沉默的shRNA | 第18-21页 |
·质粒pSUPER的扩增和鉴定 | 第21-24页 |
·ERβRNAi质粒的构建及鉴定 | 第24-29页 |
·结果 | 第29-32页 |
·ERβ特异性siRNA的设计结果 | 第29-31页 |
·ERβ特异性RNAi质粒构建及鉴定结果 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-35页 |
结论 | 第35-36页 |
第二章 ERβ基因沉默载体的筛选及包装 | 第36-54页 |
·材料和试剂 | 第36-40页 |
·实验方法 | 第40-49页 |
·重组质粒ERβRNAi沉默ERβ基因表达效率的检测及筛选 | 第40-47页 |
·重组质粒ERβRNAi逆转录病毒包装及检测 | 第47-49页 |
·统计方法 | 第49页 |
·结果 | 第49-51页 |
·重组质粒转染MC3T3-E1细胞的结果 | 第49-50页 |
·重组质粒ERβRNAi对靶基因沉默效果的检测结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
第三章 制备ERβRNAi细胞模型,研究ERβ基因敲低对骨细胞生长的影响 | 第54-73页 |
·材料和试剂 | 第54-61页 |
·实验方法 | 第61-66页 |
·小鼠成骨细胞ERβ基因沉默细胞模型的建立 | 第61-62页 |
·应用RNAi研究ERβ基因对小鼠成骨细胞增殖作用的调控 | 第62-63页 |
·应用RNAi研究ERβ基因对小鼠成骨细胞成骨能力的调控 | 第63-66页 |
·统计学方法 | 第66页 |
·结果 | 第66-69页 |
·ERβ沉默对成骨细胞增殖能力的影响结果 | 第66-67页 |
·ERβ基因沉默对小鼠成骨细胞功能的影响结果 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-72页 |
结论 | 第72-73页 |
第四章 制备ERβRNAi动物模型,初步研究ERβ基因在青春期椎体线性生长中的作用 | 第73-92页 |
·材料和方法 | 第73-76页 |
·实验方法 | 第76-79页 |
·实验动物模型的制备及验证 | 第76页 |
·小鼠动物模型身长及体重变化的测量 | 第76-77页 |
·组织学检测ERβRNAi对青春期椎体线性生长的影响 | 第77-79页 |
·统计方法 | 第79页 |
·结果 | 第79-87页 |
·动物模型的验证结果 | 第79-80页 |
·动物模型身长和体重的测量结果 | 第80-86页 |
·组织学检测ERβRNAi对青春期调控椎体线性生长的影响结果 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-91页 |
结论 | 第91-92页 |
总结 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-98页 |
附图 | 第98-117页 |
综述 | 第117-130页 |
参考文献 | 第125-130页 |
致谢 | 第130-132页 |
主要研究成果 | 第132-133页 |